时差成像胚胎培养系统观察精子DNA碎片化指数对卵胞浆内单精子显微注射的胚胎发育及临床结局的影响

目的使用时差成像(time-lapse imagining,TLI)胚胎培养系统观察精子DNA碎片化指数(DNA fragmentation index,DFI)对卵胞浆内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)的胚胎发育指标及临床结局的影响。方法选取2023年1月至6月在上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院辅助生殖科接受ICSI技术助孕的392对夫妇为研究对象,分为常规培养组284周期和TLI组108周期,再根据DFI≤15%、>15%~<30%、≥30%进一步分为正常组、临界组、异常组。比较各组的临床资料以及临床妊娠结局。统计学方法采用t检验、单因素方差分析、χ^(2)检验或Fisher确切概率法。结果6组的女方年龄、基础促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)、身体质量指数(body mass index,BMI)及获卵数比较,差异均无统计学意义(P值均>0.05);男方精液常规指标中,浓度和正常形态率比较,差异均无统计学意义(P值均>0.05);常规正常组、常规临界组、常规异常组、TLI正常组、TLI临界组和TLI异常组的前向运动精子率分别为(46.5±16.5)%、(31.0±14.2)%、(14.8±8.4)%、(41.6±16.2)%、(32.5±14.4)%、(19.3±11.1)%,常规异常组和TLI异常组的前向运动精子率分别低于常规正常组、常规临界组、TLI正常组和TLI临界组(P值均<0.05)。6组的卵裂率和囊胚形成率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。常规正常组、常规临界组、常规异常组、TLI正常组、TIL临界组和TLI异常组的受精率分别为(77.3±18.6)%、(78.6±17.1)%、(68.3±22.7)%、(77.4±14.5)%、(74.5±13.1)%、(63.1±25.4)%;常规异常组的受精率低于常规正常组、常规临界组、TLI正常组(P值均<0.05);TLI异常组的受精率低于常规正常组、常规临界组、TLI正常组、TLI临界组(P值均<0.05)。常规正常组、常规临界组、常规异常组的妊娠率分别为57.4%(39/68)、54.5%(24/44)、27.3%(6/22),异常组低于正常组和临界组(P值均<0.05)。TLI正常组、TLI临界组和TLI异常组3组的妊娠率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。常规组3组之间以及TLI 3组之间的早期流产率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论精子DFI值的升高会影响精子前向运动率,还会影响胚胎的受精率,高DFI精子进行ICSI助孕时使用TLI胚胎培养系统可以获得稳定的妊娠率。

感染模式对HBV感染者精液质量和精子DNA碎片化指数的影响

目的根据乙型肝炎5项标志物检测结果,分析不同感染模式对乙型肝炎病毒(HBV)男性感染者精液常规参数和精子DNA碎片化指数(DFI)的影响。方法经筛选后共纳入236例男性HBV感染者为研究对象,将HBsAg+/HBcAb+、HBsAg+/HBeAb+/HBcAb+和HBsAg+/HBeAg+/HBcAb+3种感染模式患者分别纳入A组(58例)、B组(112例)、C组(66例)。结果C组年龄明显低于A组、B组,差异有统计学意义(P<0.05),A组体质量指数明显低于B组、C组,差异有统计学意义(P<0.05)。C组的精子密度和精子形态正常率稍低于A组、B组,但差异无统计学意义(P>0.05);C组DFI明显高于A组、B组,差异有统计学意义(P<0.05),A组、B组间DFI比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同HBV感染模式患者存在精液常规参数和DFI差异,尤其是HBV“大三阳”感染模式患者精子活力参数和DFI明显受到影响。

精子DNA碎片化指数与复发性流产的关系及其与精液参数的相关性分析

目的:通过分析男性不育患者精子DNA碎片率与精液参数及复发性流产之间的关系,探讨精子DNA碎片化指数(DNA fragmentation index,DFI)对男性不育及不良妊娠结局的影响。方法:选择2015年6月—2016年5月本中心就诊配偶有早期复发性流产史的男性患者65例,原发性不育男性患者97例,正常生育的男性33例(对照组),采用对照研究法对其年龄、精子浓度、精子总活力、精子畸形率、DFI等各项参数进行对比分析,并对原发性不育患者DFI与年龄及各项精液参数进行相关性分析。结果:复发性流产组患者的精子DFI明显高于男性不育组及对照组(P<0.05),精子总活力明显低于男性不育组及对照组(P<0.05),男性不育组的精子畸形率明显高于对照组(P<0.05),在年龄及精子浓度上3组比较差异无统计学意义(P>0.05)。原发性不育患者精子DFI与精子浓度、总活力呈负相关(P<0.05),与年龄、精子畸形率无相关性(P>0.05)。结论:精子DFI是精液参数中一项重要指标,其与精子浓度、精子总活力呈负相关,复发性流产的患者精子DFI明显升高。

显微镜下精索静脉曲张结扎术对精子DNA碎片化临床相关性研究

目的研究与探讨显微镜下精索静脉曲张结扎术对精子DNA碎片化临床相关性。方法选取我院2015年10月～2017年3月期间收治的40例符合原发性精索静脉曲张的诊断标准患者作为研究对象,依据随机数字表方法分为A、B二组,每组各20例;A组行显微镜下精索静脉曲张结扎术,B组应用传统精索静脉高位结扎术;对比两组研究对象的治疗结果,并评估患者精子DNA碎片化变化情况。结果 A组的手术时间为79.87±21.11min,明显高于B组的39.14±13.86min,A组的并发症发生率、住院时间及复发情况均明显的优于B组,差异均具有统计学意义(P<0.05);A组在术后3个月、6个月及12个月的精子DNA碎片率均明显低于B组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论显微镜下精索静脉曲张结扎术较传统精索静脉高位结扎术能够明显改善患者临床症状,改善精子DNA碎片化,值得临床的广泛应用。

精子DNA碎片化指数对其配偶体外受精-胚胎移植后胚胎质量的影响

目的分析精子DNA碎片化指数(DFI)对其配偶体外受精-胚胎移植(IVF-ET)后胚胎质量的影响。方法选取2020年3月至2021年3月漯河市中心医院接收的139例行IVF-ET术者为研究对象,依据DFI分为低含量组(DFI<10%,n=37)、中含量组(10%≤DFI<20%,n=76)、高含量组(DFI≥20%,n=26),对比3组精子常规参数(精子浓度、精子活力、前向运动精子数)、胚胎质量(优质胚胎率、种植成功率、受精成功率)、妊娠结局(流产率、临床妊娠率、活产率、早产率)。结果低含量组、中含量组前向运动精子数高于高含量组(P<0.05);低含量组受精成功率、种植成功率、优质胚胎率高于中含量组和高含量组,且中含量组受精成功率、种植成功率、优质胚胎率高于高含量组(P<0.05);低含量组临床妊娠率、活产率高于中含量组与高含量组,且中含量组临床妊娠率、活产率高于高含量组(P<0.05)。结论DFI越低,配偶IVF-ET后受精成功率、种植成功率、临床妊娠率、活产率越高,临床可通过干预DFI来改善妊娠结局。

不育患者血清维生素D水平与精子DNA碎片化指数相关分析

目的:探讨不孕患者血清25-羟基维生素D[25(OH)D]水平与精子DNA碎片指数(DFI)的相关性,并进一步探讨血清维生素D在男性不育患者中的诊疗价值.方法:对125例男性不育患者分别检测血清25-羟基维生素D水平、精液常规分析与精子DNA碎片化指数等指标,依据25(OH)D水平分为2组,维生素D正常组67例[25(OH)D≥60nmol/L],维生素D缺乏组58例[25(OH)D<60nmol/L],统计分析25(OH)D与患者年龄、精液量,精液PH,精液浓度,精子活力,DFI,高染精子指数等指标的相关性.结果:维生素D正常组的患者的精液量、精子活率、精子活力与精子DNA碎片化指数显著高于维生素D缺乏组,且差异有统计学意义(P<0.01),但在年龄、精液PH值、精液浓度、高染精子指数指标方面,两组间无差异(P>0.05).结论:男性不育患者的精子活率、精子活力与血清[25(OH)D]水平正相关,DFI与血清[25(OH)D]水平负相关,提示男性不育患者可通过补充维生素D的方式改善精液质量.

不育患者血清维生素D水平与精子DNA碎片化指数相关分析

目的:探讨不孕患者血清25-羟基维生素D[25(OH)D]水平与精子DNA碎片指数(DFI)的相关性,并进一步探讨血清维生素D在男性不育患者中的诊疗价值。方法:对125例男性不育患者分别检测血清25-羟基维生素D水平、精液常规分析与精子DNA碎片化指数等指标,依据25(OH)D水平分为2组,维生素D正常组67例[25(OH)D≥60nmol/L],维生素D缺乏组58例[25(OH)D<60nmol/L],统计分析25(OH)D与患者年龄、精液量,精液PH,精液浓度,精子活力,DFI,高染精子指数等指标的相关性。结果:维生素D正常组的患者的精液量、精子活率、精子活力与精子DNA碎片化指数显著高于维生素D缺乏组,且差异有统计学意义(P<0.01),但在年龄、精液PH值、精液浓度、高染精子指数指标方面,两组间无差异(P>0.05)。结论:男性不育患者的精子活率、精子活力与血清[25(OH)D]水平正相关,DFI与血清[25(OH)D]水平负相关,提示男性不育患者可通过补充维生素D的方式改善精液质量。

氧化应激致精子DNA碎片化异常相关机制的研究进展

男性精子DNA碎片化(sperm DNA fragment,SDF)异常与不育,流产及后代发育不良之间的密切关系被越来越多的研究证实。氧化应激,染色质组装异常以及细胞凋亡是目前认为导致SDF的主要机制。其中,氧化应激在SDF异常发生的整个过程居主要地位。

益生菌联合左卡尼汀口服改善肥胖男性精子DNA碎片化率异常的临床观察

目的观察益生菌联合抗氧化剂左卡尼汀口服治疗肥胖男性精子DNA碎片化率(DFI)异常的临床效果,并探讨其可能的机制。方法选取精子DFI异常的肥胖男性179例,按照随机数字表法分为对照组90例、观察组89例。对照组仅口服左卡尼汀,观察组口服左卡尼汀联合益生菌地衣芽孢杆菌活菌胶囊,治疗3个月。记录两组治疗后的临床疗效,比较其治疗前后精子密度、正常形态率、DFI以及血清人连蛋白(Zonulin)、脂多糖结合蛋白(LBP)、精液8-羟基脱氧鸟苷(8OHdG)水平。结果观察组治疗后显效31例、有效35例、无效23例,总有效率74.16%(66/89),对照组分别为15、28、47例及47.78%(43/90);观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗前后两组精子密度、正常形态率比较差异均无统计学意义(P均>0.05);与治疗前比较,治疗后两组DFI均降低,且观察组降低更明显(P均<0.05)。治疗后观察组血清Zonulin、LBP及精液8OHdG水平均低于同组治疗前及对照组治疗后(P均<0.05),治疗前后对照组上述指标无明显变化(P均>0.05)。结论口服益生菌联合左卡尼汀可有效降低肥胖男性的精子DNA碎片化率,其机制可能与减轻肥胖诱发肠道细菌易位而引起的氧化应激、炎症反应有关。

男性不育患者生殖支原体感染导致精子DNA碎片化的相关性研究

目的:研究讨论男性不育患者生殖支原体感染对精子DNA碎片化的影响及其临床应用价值。方法:对生殖支原体感染阳性的100例男性不育患者(患者组)和生殖支原体感染阴性的200例男性不育患者(对照组)同时进行流式细胞仪检测精子DNA碎片化与精液常规参数检查;患者组进行抗菌药物阿奇霉素治疗并检测治疗后的精子DNA碎片化情怳。结果:研究结果表明,患者组的精子DNA碎片化指数(DFI)为(40.1±9.9)%,对照组精子DFI为(5.4±4.9)%,两组差异有统计学意义(P<0.01);患者组的精子DNA碎片化指数(DFI)为(40.1±9.9)%,抗菌药物治疗后的患者组精子DFI为(19.0±9.0)%,两组差异有统计学意义(P<0.01);对比患者治疗前后的精子浓度和活力,差异无统计学意义;而治疗后的不活动精子数明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:生殖支原体感染后的男性不育患者,其精子DNA碎片化程度显著高于未感染生殖支原体男性不育患者,通过抗菌药物治疗可以有效降低感染所造成的精子DNA碎片化水平,精子DNA碎片化分析在生殖支原体感染的男性不育诊疗过程中比精液常规参数分析更有意义。

不育男性精子DNA碎片化指数与精液解脲脲原体及人型支原体感染关系的研究

目的:探讨解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)对不育男性精子浓度、活动力、正常形态率及精子DNA碎片化指数(DNA fragmentation index,DFI)的影响。方法:选取169份精液标本,其中129例特发不育者为不育组,40例正常生育者为对照组,计算机辅助精液分析(CASA)系统分析精子浓度和活动力。精子形态分析采用Shorr染色法,吖啶橙试验(acridine orange test,AOT)检测精子DFI。支原体检测采用培养法。结果:与对照组相比无Uu/Mh、Uu或Uu+Mh感染组精子DFI显著增高(P<0.05),与无Uu/Mh感染组相比,Uu或Uu+Mh感染组DFI亦显著增高(P<0.05)。与正常生育对照组相比无Uu/Mh、Uu或Uu+Mh感染组正常形态率显著降低(P<0.05),其余组间无统计学差异(P>0.05)。与正常对照组相比,无Uu/Mh、Uu、Mh和Uu+Mh感染组的精子浓度、a级、a+b级和a+b+c级精子百分比均显著降低(P<0.05),而除无Uu/Mh感染组外,其余各组间无统计学差异(P>0.05)。结论:特发性不育男性的精子浓度、正常形态率、a级、a+b级和a+b+c级精子百分比较正常男性的均显著下降,Uu/Mh感染并非是最主要原因,可能是其他重要因素或综合因素影响的结果。特发性不育男性精子DFI明显增加,Uu是其中的主要因素之一。Uu可能主要通过对精子DNA,而不是常规参数的影响来造成男性生育力的下降。

精子DNA碎片化指数2种方法的相关性研究

目的研究精子DNA完整性不同检测方法的区别,探讨使用精子染色质结构分析法(SCSA)和精子染色质扩散实验法(SCD)分析精子DNA碎片化率(DFI)结果的一致性。方法分别用SCSA法和SCD法检测119例不育症患者精液的DFI值,采用SPSS 22.0软件进行相关性分析和配对t检验。结果 SCD法检测119例精液标本DFI均值为(15.4±8.9)%,SCSA法DFI均值为(14.2±7.3)%SCD法DFI值高于SCSA法,差异有统计学意义(P<0.05)。SCSA法和SCD法相关性分析呈明显的线性正相关(r=0.816,P<0.01)。结论 SCSA法与SCD法比较,其检测精子DFI结果具有一致性;但SCD法检测值普遍比SCSA法高。

非编码小RNA在不同DNA碎片化指数的精子细胞中的表达差异

目的探究不同精子DNA碎片化指数(DNA fragmentation index,DFI)精液精子细胞中的非编码小RNA(small non-coding RNA,sncRNAs)表达量差异。方法筛选2021年10月至2022年8月期间于海军军医大学附属长海医院生殖医学中心门诊就诊的不育男性患者纳入研究。按DFI分为DFI正常组(DFI<15%)48例、DFI临界状态组(DFI为15%~30%)40例和DFI升高组(DFI>30%)48例,比较3组患者的精子细胞中sncRNAs相对表达量的差异,并分析差异sncRNAs与精子活力的相关性。结果3组样本的年龄、精子浓度差异均无统计学意义(均P>0.05)。3组间精子活力差异有统计学意义(P<0.001),其中DFI升高组的精子活力[(30.36±4.75)%]较DFI正常组[(63.38±9.56)%,P<0.001]和DFI临界状态组[(56.50±5.87)%,P=0.034]下降。3组样本的sncRNAs靶点存在差异性表达,与其余两组相比,DFI升高组中Glu-CTC-40-10和SeC-TCA-37-4相对表达量降低,Gly-GCC、iMet-CAT-18-18和hsa-miR-151a-5p相对表达量增加,差异均有统计学意义(均P<0.001)。Spearman相关性分析显示,Glu-CTC-40-10、SeC-TCA-37-4与精子活力之间呈正相关(r=0.384,P<0.001;r=0.441,P<0.001),Gly-GCC、iMet-CAT-18-18和hsa-miR-151a-5p与精子活力之间呈负相关(r=-0.437,P<0.001;r=-0.423,P<0.001;r=-0.515,P<0.001)。结论与DFI正常的精子细胞相比,sncRNAs在DFI临界状态及升高的精子细胞中存在差异性表达,可能与DFI形成的分子机制有关,具有作为男性不育生物学标志物的潜力。

三种常见致男性不育疾病中精子DNA碎片检测的意义

目的探讨精索静脉曲张、乙肝病毒、生殖系统感染对精子DNA碎片的影响。方法将356例男性不育症患者分为三组,精索静脉曲张组120例,乙肝病毒感染组101例,生殖系统感染组135例,另外选取男性正常生育能力组78例。采用计算机辅助精液分析系统(CASA)检测并比较各组精液体积、浓度、前向运动率(PR)、非前向运动率(NP)和不动率(IM),以及应用精子染色质扩散(SCD)实验方法检测并比较各组的精子DNA碎片化指数(DFI)。结果三种常见致男性不育疾病患者的精液体积、精子浓度及非前向运动(NP)与正常生育男性比较差异无统计学意义(P>0.05)。但PR和IM降低(P<0.05),精子DFI升高(P<0.05)。结论精子DFI能较好地评估精液质量和男性生育能力,在男性不育中进行检测有着重要的意义。

补肾强精颗粒改善特发性弱精子症患者DNA完整性的临床研究

目的探讨补肾强精颗粒改善特发性弱精子症患者DNA完整性的临床效果。方法选取南昌市医学科学研究所附属医院男性不育门诊特发性弱精子症患者110例,采用随机数字表法将患者分为3组,治疗组(n=40)采用补肾强精颗粒治疗,对照组(n=40)采用五子衍宗丸治疗,空白对照组(n=30)给予安慰治疗,比较3组间精液参数与精子DNA碎片化指数(DNA fragmentation index,DFI)的差异。结果治疗组治疗有效率明显高于对照组与空白对照组,对照组治疗有效率明显高于空白对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。治疗前后,3组间患者精液量、液化时间、a、a+b、a+b+c级精子百分率、精浆果糖与酸性磷酸酶水平比较差异无统计学意义。治疗前,3组间患者精子密度、精子畸形率、α-糖苷酶与DFI比较差异无统计学意义,治疗后,治疗组精子密度明显高于对照组与空白对照组,精子畸形率、DFI明显低于对照组与空白对照组,对照组DFI明显低于空白对照组,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,精子密度与DFI呈明显的负相关(r=-0.354),精子畸形率与DFI呈正相关(r=0.324)。结论 DNA完整性异常的主要原因为肾功能失调,补肾强精颗粒可作为改善精子DNA完整性的有效药物。

李祥云教授治疗精子DNA损伤性不育经验

近年来因精子DNA损伤所致的不育逐渐成为男性不育症的研究热点和治疗难点,李祥云教授融汇中西,将中医辨证论治概念进行延伸拓展,针对目前精子DNA损伤重要指标精子DFI指数,采用中医整体论治,认为病位在肾,离不开脾胃运化功能协助,其中瘀血湿毒常常交互存在,需要分证治之,取得显著临床疗效。

三种精液优化处理技术的多参数对比研究

目的:对比研究不同精液优化处理技术的优劣势。方法:选取2018年1月-2019年5月于我院生殖中心就诊,且禁欲3~5d后采集并送检至男科实验室的100份新鲜精液标本作为研究对象,根据不同精子优化处理技术进行分组,SUP组(采用上游法处理)、DGC组(采用密度梯度离心法处理)、联合组(先进行DGC法再进行SUP),比较三种方法处理后精子存活率、活力、形态、DFI及HDS水平。结果:三组处理后精子基本情况比较,联合组精子存活率、活动率均显著高于其余两组, SUP组显著优于DGC组,联合组DFI、HDS值显著低于其余两组,SUP组低于DGC组,差异有统计学意义(P<0.05),三组精子畸形率相当,差异无统计学意义。结论:DGC联合SUP对精子处理具有更好的效果,有利于提高精子存活率,保持DNA完整,减少损伤,在精液优化处理技术中值得推广应用。

补肾法改善精子质量提高体外受精-胚胎移植技术受精率的初步研究

1978年首例试管婴儿诞生以来，以体外受精．胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer，IVF—ET）为代表的辅助生殖技术（assisted reproductive technology，ART），俗称“试管婴儿”技术，在全世界蓬勃发展，给成千上万的不孕患者带来福音。

FSH治疗特发性少、弱精子症患者的临床观察

目的:观察FSH治疗特发性少、弱精子症患者的临床疗效与对精子DNA碎片化的影响。方法:将93例诊断为特发性少、弱精子症的患者根据数字表法随机分为两组,治疗组47例肌肉注射FSH 75IU,qod;对照组46例口服维生素C0.1g,tid。分别治疗3个月,观察治疗前后两组精液参数及其精子DNA碎片的变化。结果:治疗组精子浓度、精子活动力和精子DNA碎片化指数明显优于对照组(P<0.05);治疗组精子活率与对照组无明显统计学差异(P>0.05)。结论:FSH能够明显提高特发性少、弱精子症患者的精液参数,机制可能是通过改善精子DNA碎片化指数。

基于“水饮”理论治疗精索静脉曲张合并少精子症临床观察

目的:观察基于“水饮”理论拟定的蠲饮通络方治疗精索静脉曲张合并少精子症的临床疗效及其对精液参数、精子形态、精子DNA碎片化指数(DFI)、睾丸体积及配偶自然妊娠率的影响。方法:将92例精索静脉曲张合并少精子症的患者随机分为观察组(47例)和对照组(45例),分别采用蠲饮通络方和迈之灵片治疗,疗程均为3个月。观察两组患者治疗前后的临床疗效、精子总数、精子总活动率、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率和精子DFI及睾丸体积的变化,以及治疗后患者配偶妊娠情况。结果:观察组总有效率为87.23%,优于对照组的68.89%(P<0.05);与治疗前相比,观察组患者的精子总数[(16.35±3.52)×10^(6)vs(43.82±6.02)×10^(6)]、总活动率[(17.37±6.76)%vs(36.68±11.32)%]、前向运动精子百分率[(13.42±5.62)%vs(31.03±7.47)%]、正常形态精子百分率[(1.91±0.13)%vs(4.06±0.11)%]、DFI[(43.32±7.84)%vs(26.98±6.87)%]均显著性改善(P<0.05);对照组患者的精子总数[(15.78±3.84)×10^(6)vs(31.53±5.62)×10^(6)]、总活动率[(19.41±6.24)%vs(31.32±9.73)%]、前向运动精子百分率[(14.01±4.98)%vs(20.71±6.49)%]、正常形态精子百分率[(1.88±0.14)%vs(3.12±0.09)%]、DFI[(41.42±9.62)%vs(34.13±5.73)%]也显著性改善(P<0.05),但观察组均优于对照组,且观察组患者配偶自然妊娠率(40.43%)显著高于对照组(20.00%),差异有统计学意义(P<0.05),但两组患者的睾丸体积[观察组:(11.53±1.24)ml vs(10.89±1.17)ml;对照组:(10.94±1.34)ml vs(10.65±1.52)ml]治疗前后均无明显变化(P>0.05)。结论:蠲饮通络方不仅能够提高精索静脉曲张患者的精子总数、总活动率、前向运动精子百分率,而且能够改善正常形态精子百分率和DFI,提高患者配偶的自然妊娠率。