老年子宫内膜癌患者HER2、P53及DNA错配修复蛋白表达特点和临床意义

目的探讨老年子宫内膜癌患者人表皮生长因子受体(HER)2、P53及DNA错配修复蛋白表达特点和临床意义。方法选取老年子宫内膜癌患者50例,术中收集子宫内膜癌组织标本;并收集同期行刮宫术的22例患者正常增生期子宫内膜标本。免疫组化检测HER2、P53及DNA错配修复蛋白(MSH2、MLH1、PMS2)表达水平。收集子宫内膜癌患者年龄、国际妇产科联盟(FIGO)分期、分化程度、肌层浸润、淋巴结转移;术后对患者进行2年的随访,记录生存情况。结果子宫内膜癌组织中HER2阳性表达率明显高于子宫内膜正常组织,P53、MSH2、MLH1、PMS2阳性表达率明显低于子宫内膜正常组织(P<0.01)。随着FIGO分期、肌层浸润程度的增加、分化程度降低,HER2阳性表达率逐渐升高,P53、MSH2、MLH1、PMS2阳性表达率逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移患者HER2阳性表达率明显高于无淋巴结转移患者,P53、MSH2、MLH1、PMS2阳性表达率明显低于无淋巴结转移患者(P<0.05)。HER2阳性表达的老年子宫内膜癌患者生存率明显低于HER2阴性表达患者(P<0.01);P53、MSH2、MLH1、PMS2阴性表达的老年子宫内膜癌患者生存率明显低于P53、MSH2、MLH1、PMS2阳性表达的患者(P<0.01)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,HER2、P53、MSH2、MLH1、PMS2单独和联合检测对老年子宫内膜癌患者生存情况均具有较高的预测价值(P<0.05);其中联合检测的预测价值最高(曲线下面积=0.934),特异度和阳性预测值明显高于各指标单独检测(P<0.05)。结论老年子宫内膜癌患者HER2高表达,P53、MSH2、MLH1、PMS2低表达,且与病理特征、生存时间密切相关,联合检测可用于预测患者的生存情况。

DNA错配修复基因的遗传变异/突变与肿瘤治疗反应

DNA错配修复(mismatch repair,MMR)是一个复杂的生物学过程,在维持基因组完整性方面起着重要作用。微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI)由MMR蛋白功能缺陷导致。MMR基因的遗传变异或突变对肿瘤的发生、发展以及预后起到关键作用,其相关研究已取得显著成果。目前国内外多个指南建议对晚期实体瘤患者检测MMR/MSI,其结果可以预测肿瘤患者的预后,并可预测肿瘤辅助化疗及免疫治疗疗效,对治疗方案的选择具有指导意义。

DNA错配修复系统研究进展

DNA错配修复 (mismatchrepair ,MMR)系统广泛存在于生物体中 .从原核生物大肠杆菌到真核生物及人类 ,MMR系统有不同的组成成分和修复机制 .人体内MMR基因缺陷会造成基因组的不稳定并诱发遗传性非息肉型直肠癌以及其他自发性肿瘤 .大肠杆菌MMR系统中的MutS蛋白可特异识别错配或未配对碱基 ,目前已经发展了多种基于MutS蛋白的基因突变 /多态性检测技术 .

子宫内膜癌中错配修复(MMR)蛋白表达缺失筛查Lynch综合征及其临床病理特点

目的:通过分析比较子宫内膜癌患者的错配修复(MMR)蛋白表达缺失的情况,研究其与临床标准诊断之间的关系,以及MMR蛋白表达缺失者的临床病理特征。方法:收集北京大学第一医院2011年12月至2015年7月收治的313例子宫内膜癌患者的临床资料,免疫组化法分析子宫内膜癌组织中MMR蛋白(MLH1/MSH2/MSH6/PMS2)表达情况。结果:临床诊断或可疑的Lynch综合征22例(7.0%),存在MMR表达缺失者49例(15.7%)。临床诊断或可疑Lynch的患者中,存在MMR表达缺失者的比例明显升高(P=0.011),其中主要是MSH6表达缺失存在差异(P=0.004)。MSH2表达缺失和MSH6表达缺失的患者中合并高血压的比例更低(P=0.002,P=0.045)、淋巴结转移的比例更高(P=0.025,P=0.020)、肿瘤分化差(P=0.030,P=0.010);MSH6表达缺失的患者,相对年龄更小(P=0.021)。结论:免疫组化检测MMR蛋白表达缺失在诊断或可疑Lynch综合征患者中的比例更高,可用于辅助进行Lynch综合征的筛查及诊断。MMR蛋白表达缺失与患者低龄、存在淋巴结转移、肿瘤分化不良等临床病理特征相关。

错配修复蛋白、Ki67蛋白表达与老年结直肠癌患者根治术后无进展生存期的关系

[目的]探讨错配修复蛋白、Ki67蛋白表达与老年结直肠癌(CRC)患者根治术后无进展生存期(PFS)的相关性.[方法]选取2016年10月至2021年10月在汉中市中心医院行结直肠癌根治术治疗的96例老年CRC患者,并收集患者结直肠癌组织标本和癌旁组织.比较结直肠癌组织、癌旁组织错配修复蛋白与Ki67蛋白表达情况,分析癌组织中错配修复蛋白、Ki67蛋白表达与临床病理特征的相关性,采用Cox回归分析影响老年CRC患者预后的相关因素,分析错配修复蛋白、Ki67蛋白表达与老年CRC患者根治术后PFS的相关性.[结果]结直肠癌组织错配修复蛋白阴性表达率、Ki67蛋白阳性表达率均高于癌旁组织(P<0.05).不同肿瘤直径、临床分期、淋巴结转移情况、分化程度、浸润深度的老年CRC患者癌组织中错配修复蛋白阴性表达率、Ki67蛋白阳性表达率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).96例老年CRC患者术后随访3年,失访3例,剩余93例患者中21例(22.58%)死亡.Cox回归分析显示,肿瘤直径、临床分期、淋巴结转移、分化程度、错配修复蛋白阴性表达、Ki67蛋白阳性表达均是影响老年CRC患者预后的独立危险因素(P<0.05).错配修复蛋白阳性表达患者与阴性表达患者生存曲线比较,差异有统计学意义(P<0.05).Ki67蛋白阴性表达患者与阳性表达患者生存曲线比较,差异有统计学意义(P<0.05).[结论]老年CRC患者癌组织错配修复蛋白阴性、Ki67蛋白阳性表达率较高,错配修复蛋白、Ki67蛋白表达与患者临床病理特征及预后均存在相关性.

DNA错配修复与癌症的发生及治疗

DNA错配修复是细胞复制后的一种修复机制,具有维持DNA复制保真度,控制基因变异的作用。DNA错配修复缺陷使整个基因组不稳定,最终会导致肿瘤和癌症的发生。DNA错配修复系统不仅通过矫正在DNA重组和复制过程中产生的碱基错配而保持基因组的稳定,而且通过诱导DNA损伤细胞的凋亡而消除由突变细胞生长形成的癌变。错配修复缺陷细胞的抗药性也引起了癌症化疗研究方面的关注。大多数情况下,错配修复健全型细胞对肿瘤化疗药物敏感,而错配修复缺陷细胞却有较高的抗性。DNA错配修复系统通过修复和诱导细胞凋亡维护基因组稳定的功能,显示了错配修复途径在癌症生物学和分子医学中的重要性。

DNA错配修复蛋白缺失与Ⅱ、Ⅲ期结肠癌根治术后复发转移及预后的关系

目的探讨DNA错配修复蛋白(MMR)缺失与Ⅱ、Ⅲ期结肠癌根治术后复发转移及预后的关系。方法采用免疫组织化学法检测294例结肠癌患者手术标本的MMR表达,回顾性分析其表达对结肠癌患者临床病理参数及生存率的影响。结果多因素分析结果显示,肿瘤部位、分化程度和分期是影响MMR表达状态的独立性危险因素(P<0.05);单因素结果显示,年龄、分化程度、T和N分期是影响患者复发转移率、总体生存率的危险因素;仅有N分期是影响患者复发转移率的独立性危险因素;仅有肿瘤分化程度、N分期和MMR缺失是影响患者总体生存率的独立性危险因素。220例DNA错配修复缺陷蛋白完整(pMMR)患者中,69例出现复发转移(31.4%),48例死亡(21.8%);74例DNA错配修复蛋白缺失(dMMR)患者中,13例出现复发转移(17.6%),9例死亡(12.2%)。两组患者的无病生存率(P=0.034)、总体生存率(P=0.047)差异均具有统计学意义。结论肿瘤部位、分化程度和分期与MMR表达状态密切相关;MMR表达缺失患者预后明显较差,可作为判断患者预后的一个潜在标志物。

DNA错配修复系统组成和功能的研究进展

DNA错配修复(Mismateh repair,MMR)系统广泛的存在于从原核到真核的生物体中,是进化上保守的生化通路。MMR系统由一系列特异性修复DNA碱基错配的酶分子(错配修复基因产物)组成。细胞由于此系统的存在使DNA复制保持忠实性,从而保持遗传物质的完整性和稳定性,避免遗传物质发生突变。MMR系统基因的失活会导致自发突变率的明显增加,从而导致微卫星不稳定(MSI),可能引发某些肿瘤发生。近年来,MMR系统的研究越来越受到学者的重视,对MMR作用机制及组成该系统的几种酶蛋白结构与功能方面的研究不断深入,加深了对MMR系统的理解。这些为MMR系统相关的应用研究,尤其是为肿瘤发生奠定了理论的基础。本文重点讨论了错配修复系统的蛋白组成、各蛋白的功能及它们如何相互协调发挥作用的最新研究进展。

DNA错配修复基因mutS的高效表达及表达产物活性鉴定

将DNA错配修复基因mutS(2 5 6kb)克隆于分泌型原核表达载体pET32a(+)上 ,以N端融合 6个组氨酸的形式在E .coliAD494(DE3)中进行了IPTG诱导表达。SDS PAGE分析证实有一与预期分子量相应的诱导表达条带 ,其表达量占全菌蛋白质的 35 %左右 ,且表达蛋白以可溶形式存在。利用固定化金属离子 (Ni2 +)配体亲和层析柱纯化目的蛋白 ,其纯度为 90 %以上。与含有错配碱基DNA双链的结合反应证明该蛋白具有特异性识别。

DNA错配修复基因甲基化在H446细胞获得性耐药中的作用

目的探讨DNA错配修复基因MLH1(human MutL homolog1)、MSH2(human MutS homolog2)甲基化在人小细胞肺癌H446细胞获得性耐药中的作用。方法RT-PCR及Western blot法检测H446细胞及其多药耐药细胞H446/DDP中MLH1、MSH2基因的mRNA表达和蛋白表达,甲基化特异性PCR(MSP)法检测MLH1、MSH2基因启动子CpG岛甲基化状态。结果H446/DDP细胞中MLH1、MSH2基因的mRNA及蛋白水平均较H446细胞显著降低(P<0.01),且其启动子甲基化程度明显增强。结论DNA错配修复基因MLH1、MSH2启动子甲基化诱导其表达下调可能是人小细胞肺癌获得性耐药的重要机制之一。

结直肠癌DNA错配修复蛋白的表达及临床病理学意义

目的探讨错配修复蛋白在结直肠癌中的表达及临床病理学意义。方法采用免疫组织化学法,对55例结直肠癌组织标本进行MLH1、MSH2、MSH6、PMS2四种错配修复蛋白检测,同时观察其与临床病理学参数关系。采用real-time PCR法对其中10例进行鼠类肉瘤病毒癌基因(KRAS)第2号外显子和鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌基因同源体B1(BRAF)基因第15号外显子突变检测。结果 55例患者中50例四种蛋白均阳性表达,为微卫星稳定(MSS),5例患者蛋白表达有缺失,提示为高频微卫星不稳定(MSI-H),缺失率为9.09%,其中4例MLH1、PMS2联合缺失,1例MSH2、MSH6联合缺失;MSI-H患者肿瘤多发生在右半结肠,与MSS患者相比差异显著(P=0.01),其中3例为黏液癌或伴黏液分化癌,均无淋巴结转移;10例行KRAS及BRAF突变检测的病例中,6例存在KRAS基因突变,1例存在BRAF基因突变且表现为MLH1、PMS2表达联合缺失。结论 MSI-H结直肠癌患者多发生在右半结肠,这类患者有以黏液癌或伴有黏液分化癌多见及淋巴结转移少见为特征的趋势;MSI-H与MSS患者相比,在年龄、性别、肿块大小、肿瘤分级及分期方面无显著差异;发现散发性结直肠癌中具有微卫星不稳定的病例,结合其他检测可进一步指导临床用药,为新的治疗方案提供理论依据。

DNA错配修复基因与肿瘤研究新进展

DNA错配修复 (mismatchrepair,MMR)基因对维持基因组的稳定性有重要作用 ,MMR基因突变与肿瘤的发生、发展关系密切。近年来 ,MMR基因在肿瘤组织中的作用成为研究热点 ,本文就其新进展作一简要综述。

DNA总体低甲基化、错配修复基因启动子甲基化异常与神经管畸形的相关性

目的研究神经管畸形(NTDs)胚胎脑组织和皮肤组织DNA总体甲基化以及错配修复基因启动子区甲基化水平。方法在山西省吕梁地区以医院为基础进行病例-对照研究。从县级医院及妇幼保健院收集经B超诊断为NTDs的胎儿标本,同时收集非病理性引产、无畸形和发育迟缓的胎儿作为正常对照组。运用甲基化定量试剂盒测定脑组织和皮肤组织的DNA总体甲基化水平,甲基化特异性多连接依赖性探针扩增试剂盒检测7个错配修复基因(MLH1,MSH2,MSH6,MSH3,MLH3,PMS2和MGMT)启动子区甲基化水平。结果共有65例NTDs胚胎,48例对照胚胎进入研究。①NTDs组的脑组织DNA总体甲基化水平显著低于对照组(5.3%vs6.5%,P<0.001),DNA总体低甲基化显著增加了NTDs发生风险(OR=4.98,95%CI:1.42～17.53)。皮肤组织DNA总体甲基化水平在两组间差异无统计学意义(13.3%vs13.1%,P>0.05);②NTDs和对照组的MSH6启动子(MSH6-301:2.5%vs3.7%,P<0.05)和PMS2启动子(PMS2-328:5.7%vs6.7%;PMS2-142:2.0%vs2.7%,P<0.05)的甲基化水平存在显著差异。结论 DNA总体低甲基化、错配修复基因启动子区的异常甲基化修饰与NTDs发生有关。

DNA错配修复基因hMLH1与肿瘤及化疗耐药相关性的研究进展

DNA是生命活动最重要的遗传物质。DNA复制产生的误差(碱基错配)是一种重要的损伤。若DNA损伤得不到修复,将会导致基因的突变,其中一部分突变有利于物种的进化,而另一部分将导致细胞恶化和死亡。DNA错配修复系统(mismatch repair system,MMR)是人体细胞中存在的一种能识别并修复DNA碱基错配的安全保障系统。到目前为止,已从人体细胞中共分离克隆到9种MMR基因。hMLH1基因是一系列DNA错配修复基因中最重要的一种,也是MMR系统的重要成分,其甲基化可导致MMR缺陷。近年来的研究发现,hMLH1的失活与肿瘤发生发展有关,并可能因此导致肿瘤对某些抗肿瘤药物耐药。

DNA错配修复和临床肿瘤新进展

DNA复制是一个严谨有序的过程,细胞分裂时,碱基错配的概率约为1/1010～1/109。错配修复系统(MMR)是一个从细菌到真核细胞皆保守的DNA修复途径,它负责修复DNA中错配的碱基,或者DNA聚合酶的校对功能失调而引起的复制错误,插入,遗失碱基,使DNA整体复制的保真度增加50～1 000倍。MMR系统失控会导致DNA序列中微卫星序列的不稳定性(MSI)或编码功能蛋白的基因突变,改变正常细胞功能,从而引发肿瘤。

前列腺癌DNA错配修复基因缺失的表达研究

为了探讨DNA错配修复基因 (MMR)在前列腺癌中的表达及其意义 .采用免疫组化方法检测 11例前列腺癌患者的 2 0份标本中错配修复基因MSH2 ,MLH1,PMS1和PMS2 的表达 ,分析了其与前列腺癌发生与发展的关系 .结果 :这 4种MMR基因在肿瘤区的表达都有不同程度的降低 ,PMS1在肿瘤细胞中大部分缺失或降低 ,在肿瘤区的表达率依次为MLH1>MSH2 >PMS2 >PMS1.结论 :在前列腺癌组织中PMS1和PMS2 蛋白表达的丢失在MMR突变中是占主导的 。

缺氧对人小细胞肺癌H446细胞DNA错配修复基因MLH1、MSH2表达的影响及其机制探讨

背景与目的:缺氧对DNA错配修复系统(mismatch repair,MMR)活性的调控是肿瘤细胞遗传不稳定的重要原因,但其机制尚不完全清楚。本研究拟观察缺氧状态下人小细胞肺癌H446细胞DNA错配修复基因MLH1、MSH2的表达变化,初步探讨DNA甲基化在其中的作用。方法:应用RT-PCR、Western blot等方法检测H446细胞在缺氧状态下以及甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理后MLH1、MSH2基因的表达水平,同时,采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测MLH1、MSH2基因启动子CpG岛甲基化状态。结果:缺氧状态下,H446细胞MLH1、MSH2基因在转录和翻译水平均显著性降低。同时,随着缺氧时间延长,MLH1基因启动子逐渐由非甲基化状态、部分甲基化状态转变为完全甲基化状态,而MSH2基因启动子则直接由非甲基化状态转变为完全甲基化状态。甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR可使MLH1、MSH2基因表达水平有所恢复,但去除5-Aza-CdR后其表达再次下调。结论:启动子甲基化可能是缺氧诱导H446细胞显著性下调MLH1、MSH2基因表达的重要机制,甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR可恢复其表达。

子宫内膜癌DNA错配修复基因hMLH_1表达的研究

目的:探讨DNA错配修复基因hMLH1的表达与子宫内膜癌的关系。方法:选取1981年1月至2001年12月在天津医科大学总医院住院手术子宫内膜癌104例和正常子宫内膜35例(其中增生期17例,分泌期18例)及子宫内膜不典型增生8例,用免疫组化SABC法检测组织中hMLH1基因蛋白产物的表达,并对hMLH1蛋白表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系进行了分析。结果:子宫内膜癌、子宫内膜不典型增生、正常子宫内膜增生期和分泌期hMLH1表达缺失率分别为64.4%、37.5%、11.8%和5.6%。子宫内膜癌组织中hMLH1的表达缺失率明显高于正常子宫内膜组织(P=0.0001);子宫内膜样腺癌、腺癌伴鳞状上皮分化、透明细胞癌和浆液性癌hMLH1表达缺失率分别为68.9%、50%、25%和0,在子宫内膜样腺癌中hMLH1基因表达缺失率明显高于其他组织学类型(P=0.02,P=0.003)。hMLH1基因表达缺失者5年生存率明显高于阳性表达者(P=0.012),遗传性子宫内膜癌、非特异肿瘤聚集性子宫内膜癌及散发性子宫内膜癌hMLH1蛋白表达缺失率分别为100%、94.1%及55%,遗传性及非特异肿瘤聚集性子宫内膜癌hMLH1基因表达缺失率明显高于散发性子宫内膜癌(P=0.02,P=0.003)。结论:hMLH1基因表达缺失与子宫内膜癌和子宫内膜不典型增生发生有关。hMLH1基因表达缺失与子宫内膜癌组织学类型中的子宫内膜样腺癌有关,hMLH1基因表达缺失者预后较好,且在遗传性子宫内膜癌患者中表达缺失率明显高于散发病例。

DNA错配修复蛋白hMLH1在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌分化的关系

目的:了解错配修复蛋白hMLH1在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌分化的关系。方法:应用SP免疫组织化学法对65例大肠癌组织病理切片进行免疫组化分析。结果:大肠癌旁正常组织hMLH1的表达阳性率为80%,明显高于癌组织hMLH1的表达阳性率46.2%(P<0.01);高分化、中分化和低分化大肠癌组织中hMLH1的表达率分别为68.2%、44.1%和22.2%,高分化大肠癌与低分化大肠癌之间hMLH1的表达存在显著性差异(0.01<P<0.05),但高分化大肠癌与中分化大肠癌、中分化大肠癌与低分化大肠癌之间hMLH1的表达无显著性差异(P>0.05)。结论:hMLH1表达水平与大肠癌的发生及分化相关,大肠癌分化程度越低,hMLH1表达水平越低。

DNA错配修复系统缺陷在结肠癌中的研究进展

结肠癌在其多阶段演变过程中涉及多种基因。约85％的结肠癌由染色体不稳定（chromosomalinsta-bility，CIN）引起，另有约15％的结肠癌则由DNA错配修复（mismatchrepair，MMR）基因缺陷所致，其中遗传性非息肉性结直肠癌（hereditarynonpolypo—siscolorectalcancer，HNPCC）占3％～5％，而散发性结肠癌占10％～15％。