隔指孢属rDNA ITS区间限制性片断长度多态性(RFLP)分析

利用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法对捕食线虫真菌隔指孢属进行了系统发育研究。以 ＩＴＳ１和ＩＴＳ４为引物对该属８种８个菌株的核糖体ＤＮＡ转录间区（ＩＴＳ）进行了 ＰＣＲ扩增， ４种内切酶（ ＡｌｕⅠ、 Ｈａｅ Ⅲ、 Ｈｐａ Ⅱ、 ＴａｑⅠ）酶切。结果表明该属的 ＩＴＳ区长度没有明显差异，其长度范围在５６４～５９５之间，酶切图谱能体现不同种 间的多态性。根据４种内切酶酶切结果，利用ＵＰＧＭＡ法构建的隔指孢属分子系 统树，基本体现了属内不同种间的亲缘关系，从分子水平证明了隔指孢属形态分类 上的合理性。

家蚕卵线粒体DNA限制性内切酶长度多态性研究

利用 2 9种限制性内切酶对 34个不同品种家蚕卵mtDNA进行酶切分析 ,发现一化、二化品种与多化品种的HaeⅢ酶切图谱有差异 ,但不同的地理品种间没有出现酶切多态性现象。另外 ,一些家蚕品种的受精卵和非受精卵mtDNA在BglⅠ和PstⅠ酶切下 ,呈现不同的酶切带型。同时 。

小鼠DNA的限制性片段长度多态性分析

用人类肌红蛋白基因内含子中３３ｂｐ的小卫星ＤＮＡ重复序列为探针，经ｐＢＲ３２２的ＥｃｏＲＩ正向测序引物和α３２ＰｄＣＴＰ在ＴａｑＤＮＡ聚合酶作用下做合成标记，与６种小鼠的ＤＮＡ限制性片段杂交。结果显示，每个品系平均出现可分辨带纹在１３条以上，不同品系小鼠间的杂交带纹表现出高度的多态性。多态性带纹主要分布在６～２３ｋｂ区段；同一近交系的不同个体间的带纹特点及分布完全一致；Ｃ５７与ＡＫＲ及二者与其他鼠间的亲缘关系更远；随机两种品系鼠间的平均相关机率为４１×１０－８。因此，认为此方法可用于不同品系近交系小鼠的亲缘关系鉴别和遗传监测。

癌细胞mtDNA限制性片段长度多态性分析

目的探讨人癌细胞ｍｔＤＮＡ与正常细胞ｍｔＤＮＡ一级结构的差异。方法采用一步法制备包括肺腺癌ＳＰＣ－Ａ－Ａ、ＰＬＡ－８０１Ｄ、Ａ５４９、Ａ５３１，肝细胞癌ＳＭＭＣ－７７２１，膀胱上皮癌ＥＪ共６个癌细胞系ｍｔＤＮＡ；用ＰｖｕⅡ、ＸｈｏⅠ、ＰｓｔⅠ、ＥｃｏＲⅠ、ＢｓｔＥⅡ、ＨｉｎｄⅢ、ＨｐａⅠ、Ｂｃ１Ⅰ、ＥｃｏＲⅤ、ＳｃａⅠ和ＸｂａⅠ共１１种限制性内切酶对所得ｍｔＤＮＡ进行ＲＦＬＰ分析；并用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法分析了癌细胞ｍｔＤＮＡ非编码区结构变化。结果６个癌细胞系其ｍｔＤＮＡ基因编码区的３２个酶切位点均无变异，而有３个癌细胞系在其ｍｔＤＮＡ非编码区第１６２７６位核苷酸处出现了ＥｃｏＲⅤ新的酶切位点。结论提示癌细胞ｍｔＤＮＡ基因编码区一级结构相当稳定，而主要的核苷酸变异可能位于其ｍｔＤＮＡ非编码区。

中国普通野生稻线粒体DNA的限制性片段长度多态性

用BamHI／H454、BamHI／pQT2-7-1、EcoRI／B376和EcoRI／pQT12四种酶／探针组合对85份普通野生稻、亚洲栽培稻和橹稻进行了线粒体DNA的限制性片段长度多态性的分析．共检测到16条多态性带，15种表型，组合成14种线粒体DNA变异类型．其中抽稻和粳稻的线粒体DNA已分化，培稻偏粳型，大部分普通野生稻属（或偏）拉型，但江西的东乡普通野生稻类型比较独特．中国普遍野生稻的线粒体DNA与地理分布相关，湖南的江永、茶陵和江西的东乡等不同的群体以地理位置相聚，随地理梯度遗传分化由少到多．

烟草根结线虫生防菌限制性片断长度多态性(RFLP)分析

利用PCR RFLP方法对烟草根结线虫生防菌单顶孢属进行了系统发育研究。以ITS1和ITS4 为引物对该属 12种14个菌株的核糖体DNA转录间区 (ITS)进行了PCR扩增 ,4种内切酶 (AluⅠ、HaeⅢ、HpaⅡ、TaqⅠ )酶切。结果表明 ,该属的ITS区长度没有明显差异 ,其长度范围在 60 8～ 675之间。酶切图谱能体现不同种间的多态性 ,根据 4种内切酶酶切结果 ,利用UPGMA法构建的单顶孢属分子系统树 ,基本体现了属内不同种间的亲缘关系 。

家畜线粒体DNA限制性片段长度多态性的研究与应用

在阐述线粒体DNA的特点及其限制性片段长度多态性的基础上,介绍了线粒体DAN多态性的研究现状及在家畜育种中的应用,并指出线粒体DNA限制性片段多态分析在家畜品种资源研究中的意义。

云南马关县矮马线粒体DNA的限制性片段长度多态性分析

云南马关县矮马线粒体ＤＮＡ的限制性片段长度多态性分析云南省畜牧兽医科学研究所解德文中科院昆明动物研究所刘爱华，林世英高等动物线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）是共价闭合环状的核外遗传物质，而核外遗传又是母体遗传，不发生重组，ｍｔＤＮＡ对于研究亲缘关系较近的群...

用M13噬菌体作探针进行人的DNA限制性片段长度多态性分析

用M13噬菌体作为探针,可以检测人和动物基因组DNA中高度可变的小卫星区域,其有效顺序是该噬菌体基因Ⅲ中的两组15bp的串联重复。本文介绍的是采用随机引物与PCR过程相结合的方法标记M13噬菌体,得到高比活性的探针,与经HinfⅠ消化的人DNA杂交,产生具有高度多态性的DNA图谱,并与33.15探针杂交的DNA图谱进行了比较,证明M13噬菌体是进行DNA多态性分析的一种非常有用的探针。

延吉市土壤中分离的棘阿米巴CJY/S3线粒体DNA限制性片段长度多态性

[目的]观察棘阿米巴土壤分离株CJY/S3的线粒体DNA限制性片段长度多态性.[方法]从棘阿米巴CJY/S3提取线粒体DNA,用EcoRI进行酶切,与广东地区土壤分离株CG/S1进行比较观察限制性片段长度多态性.[结果]延吉市土壤分离株CJY/S3与广东地区土壤分离株CG/S1具有相同的片段模式.[结论]延吉市棘阿米巴土壤分离株CJY/S3与CG/S1具有密切的亲缘关系,而线粒体DNA限制性片段长度多态性分析是棘阿米巴分类简便且有效的方法.

随机DNA探针与限制性片段长度多态性的研究进展

本文综述了随机ＤＮＡ探针的克隆分析及其在限制性片段长度多态性研究中的应用进展，包括高多态性序列与ＤＮＡ指纹图的研究和单拷贝片段的多态性研究成果。并提供了研究ＤＮＡ多样性的数学模式。

限制性片段长度多态性分析

不同个体在DNA结构上存在着差异,在不编码蛋白质的区域及没有重要调节功能的区域,DNA结构的个体差异更为明显。基因组中一个特定的基因座位(DNA序列)若存在两种或两种以上的状态(等位基因),而且其中任何一个等位基因在人群中的频率不低于1％,这一现象被称为多态性。DNA多态性本质上是染色体DNA中核苷酸数目或排列顺序的个体差异,这些差异多数为中性突变,不引起表型改变。DNA多态性可应用不同的方法进行检测,如DNA序列分析、PCR片段长度多态性(PCR-FLP),单链DNA构型多态性等。

限制性片段长度多态性（Restriction Fragment Length Polymorphism，RFLP）技术的优点

限制性片段长度多态性（RFLP）技术是最早开发成功、建立在Southern杂交技术上的DNA分子遗传标记技术。RFLP技术的优点：

人血红蛋白β-链基因AvaⅡ位点扩增片断长度多态性

目的：为了研究日本人群β-链基因AvaⅡ酶切位点的遗传多态性以及该位点等位基因频率的分布。方法：采用PCR- RFLP技术,对35例无血缘关系的健康日本大学生的70条染色体进行检测,然后用X^2检验进行统计学处理。结果：等位基因B_1频率为0．4715,等位基因B_2频率为0．5287,杂合度H=0．5429,期望杂合度h=0．4986,多态信息量PIC=0．7635；B_1、B_2的传递规律和理论上预计的完全符合,认为日本人群β-链基因AvaⅡ酶切位点也具有遗传多态性,表明β-链基因AvaⅡ酶切位点具有适合信息,并且与国外报道的无显著性差异。结论：这对遗传制图、基因分离、疾病的关联研究,法医学个体识别和双生子的卵性鉴定有一定的价值。

扩增片断长度多态性（Amplified fragment length polymorphism，AFLP）在水产动物研究中应用前景

扩增片断长度多态性（Amplified fragment lengthpolymorphism，AFLP）标记技术是一种新的DNA指纹技术主要用于检测DNA多态性。AFLP技术是根据基因组DNA水平的差异进行检测，不受组织和器官、发育阶段、生理条件等诸多因素影响，因此在水产动物中应用AFLP技术具有广阔的前景，可作为水产动物种质鉴定、亲缘关系及种质分类研究的理想标记。

四种方法获取DNA用于检测IL-1基因多态性的比较分析

目的 :寻求一种能方便、简捷、有效地获取患者DNA的方法 ,以用于检测患者基因多态性。方法 :采用 4种方法获取患者DNA ,即静脉血中用酚 -氯仿法抽提 ,指尖血血痕中用Chelex 10 0法抽提 ,颊粘膜拭子中用Chelex 10 0法抽提及直接用干燥血痕作为PCR扩增的DNA模板。对同一个体分别用 4种来源的DNA检测其IL 1基因多态性 ,比较结果的特异性和敏感性。结果 :颊粘膜拭子抽提DNA作基因多态性分析特异性高、敏感性强 ,优于静脉血酚 -氯仿法抽提DNA ,且取颊粘膜拭子无创、方便。Chelex 10 0法抽提DNA比酚 -氯仿法更简单、快速。结论 :颊粘膜拭子结合Chelex 10

我国六个地区银鲫种群线粒体DNA多态性的研究

本文用一对引物对我国６个地区的银鲫进行ｍｔＤＮＡ－ＮＤ５／６片段的ＰＣＲ扩增，扩增产物（约２．５Ｋｂ）用６种限制性内切酶进行限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析。共获得１１种图谱和７种限制性类型（基因型）。根据各群体间的遗传距离构建了ＵＰＧ聚类关系图。结果表明，６个银鲫种群中，云南群体与贵州群体的关系以及黑龙江与安徽群体之间的关系最近，它们分别归为一个群体；河南群体相对独立，它与黑龙江和安徽群体的遗传关系较近；江西群体与各群体间的亲缘关系最远。

DNA修复基因XRCC1的399位点多态性同肺癌易感性关系的Meta分析

目的：综合评价DNA修复基因XRCC1（X-ray cross-complementing group 1）的399位点多态性同肺癌易感性的关系。方法：检索中国生物医学数据库和Medline，获得有关XRCC1基因399位点多态性同肺癌易感性关系的研究结果，并进行Meta分析。所有文献均采用病例对照研究，以非条件Logistic回归校正年龄、性别和吸烟状况等混杂因素后的OR值为效应指标，对文献进行评价筛选、异质性检验。利用Meta分析软件Rev Man 4．2对各研究原始结果进行统计处理，并计算合并OR值及其95％可信区间。结果：本次Meta分析共纳入15项研究，累计病例6818例，对照7610例。Arg／Gln和Gln／Gln等位基因同Arg／Arg比较，OR值分别为0．99（95％ CI：0．91～1．06）和1．04（95％ CI：0．92～1．17），Z值分别为-0．37和0．67，对应的P值分别为0．71和0．50。结论：尚无足够证据证明DNA修复基因XRCC1的399位点多态性同肺癌易感性有关。

恒河猴与食蟹猴微卫星DNA多态性的比较分析

目的分析恒河猴和食蟹猴群体间的遗传多样性,确立一种对恒河猴和食蟹猴种群个体的遗传鉴别方法。方法利用聚合酶链反应(PCR)扩增技术采用15个多态性微卫星DNA位点对50只恒河猴和50只食蟹猴个体进行了DNA多态性的分析,对比两群体间等位基因数目差异。结果筛选的15个具有显著多态性的微卫星DNA位点对恒河猴和食蟹猴种群可以进行DNA多态性分析,其等位基因数目均在7个以上,且两群体间有11个位点的等位基因数存在一定的差异。结论利用这些多态性微卫星DNA位点建立一种有效鉴别恒河猴和食蟹猴种群遗传背景的方法具有一定的可行性。

碱裂解法快速提取口腔拭子DNA对CHRNA3基因多态性的研究

目的建立一种快速的从口腔拭子中提取DNA的方法,研究其在尼古丁乙酰胆碱受体α3(CHRNA3)基因多态性分析中的应用。方法以NaOH和乙二胺四乙酸(EDTA)配制碱裂解液,以三羟甲基氨基甲烷-EDTA(TE)为中和液,经加热裂解和中和两步提取口腔拭子DNA。以提取的DNA为模板,用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析对CHRNA3基因的rs6495309进行分型。对不同基因型的样本测序验证。结果 PCR扩增和酶切的靶带清晰,无非特异性条带。酶切结果与测序结果吻合。结论碱裂解法提取口腔拭子DNA具有快速、简便、经济、可靠的特点,可以用于CHRNA3基因多态性的分析。