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重组人胰岛素样生长因子1的制备 被引量:9
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作者 梁东春 左爱军 +2 位作者 吴亚锋 郭刚 张镜宇 《天津医药》 CAS 北大核心 2005年第7期434-436,共3页
目的:建立人胰岛素样生长因子1(IGF-1)基因大肠杆菌高效表达系统及rhIGF-1的初步纯化方法。方法:将人IGF-1基因克隆入原核表达质粒载体pBV220,重组质粒转化大肠杆菌DH5α,温度诱导表达,WesternBlot对表达产物进行鉴定。超滤离心纯化rhIG... 目的:建立人胰岛素样生长因子1(IGF-1)基因大肠杆菌高效表达系统及rhIGF-1的初步纯化方法。方法:将人IGF-1基因克隆入原核表达质粒载体pBV220,重组质粒转化大肠杆菌DH5α,温度诱导表达,WesternBlot对表达产物进行鉴定。超滤离心纯化rhIGF-1,纯化产物行高效液相色谱分析。H3-TdR掺入法测定所制备rhIGF-1的促细胞增殖活性。结果:成功构建了重组质粒pBV-IGF-1,聚丙烯酰胺凝胶电泳可见与预期7.5ku大小相符的蛋白条带,WesternBlot证实该条带即为rhIGF-1。超滤离心一步纯化后rhIGF-1纯度即可达95%以上。H3-TdR结果显示,所制备的rhIGF-1可促进体外培养成肌细胞增殖。结论:成功建立了rhIGF-1的制备及纯化方法,表达产物经体外试验证实具有促细胞增殖的生物活性。 展开更多
关键词 人胰岛素样生长因子1 制备 Western rhIGF-1 聚丙烯酰胺凝胶电泳 高效液相色谱分析 PBV220 温度诱导表达 细胞增殖活性 成肌细胞增殖 纯化方法 大肠杆菌 表达产物 BLOT 表达系统 质粒载体 原核表达 DH5Α 质粒转化 纯化产物
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