siRNA干扰DNALI1基因对HEK-293细胞增殖与迁移的影响

文章探讨了siRNA干扰DNALI1基因对HEK-293细胞增殖、迁移的影响。通过培养HEK-293细胞株,分别转染siRNA DNALI1组(DNALI1-homo-66组、DNALI1-homo-426组与DNALI1-homo-777组)和对照组。siRNA DNALI1组细胞中DNALI1 mRNA表达量均低于对照组,三个干扰组中DNALI1-homo-66组干扰效率最高,差异均具有统计学意义(P<0.05);与阳性对照组和阴性对照组相比,siRNA DNALI1组细胞转染24-48h细胞增殖能力明显减弱,差异均具有统计学意义(P<0.05)。在细胞水平可通过RNA干扰特异性抑制DNALI1基因来抑制细胞的增殖和迁移能力,为研究DNALI1基因在细胞中的作用机制奠定了基础。

过表达DNALI1抑制低氧环境中鼻咽癌细胞株CNE-2z侵袭与迁移

目的探讨模拟肿瘤内低氧微环境下,动力蛋白轴突轻链中间体1(DNALI1)对鼻咽癌细胞株CNE-2z增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法R语言软件分析GEO数据库中鼻咽癌组织的3个数据集,分析其差异基因(DEGs)。低氧是肿瘤微环境基本特征,体外细胞研究均在低氧工作站(1﹪O_(2))中进行,以模拟体内低氧微环境。将DNALI1过表达质粒和空载体质粒包装成慢病毒后感染CNE-2z细胞,构建DNALI1基因稳定过表达的CNE-2z细胞株。将CNE-2z细胞分别进行正常培养(空白对照,BC),感染空载体慢病毒(阴性对照,NC)和感染过表达DNALI1慢病毒(过表达DNALI1,DNALI1-OE)。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和Western blot检测DNALI1 mRNA和蛋白表达水平;集落形成实验检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡水平。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果生物信息学分析发现,与健康人鼻咽组织相比,鼻咽癌组织中DNALI1基因低表达。在低氧环境中,BC组与NC组细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭比较,差异均无统计学意义;与BC组和NC组比较,DNALI1-OE组细胞增殖能力和凋亡水平比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。与BC组和NC组比较,DNALI1-OE组细胞迁移能力[(198.67±3.22),(199.00±3.00)比(75.00±7.55)个]和侵袭能力[(240.67±16.01),(259.67±3.06)比(83.33±9.50)个]降低,差异具有统计学意义(P均<0.001)。结论低氧环境中,DNALI1过表达可抑制CNE-2z细胞侵袭与迁移能力,但对细胞增殖、凋亡无明显影响。