DNAM-1在系统性红斑狼疮患者T淋巴细胞的表达研究

目的 :研究DNAM 1在SLE患者外周血T淋巴细胞亚群上的表达 ,以阐明DNAM 1抗原在SLE患者体内活化作用以及与SLE发病的关系。方法 :31例SLE患者和 30例健康志愿者外周血单个核细胞 ,在PHA刺激培养 72小时后 ,三色荧光标记的单克隆抗体染色 ,利用流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群膜表面DNAM 1抗原的表达。同时检测SLE患者抗dsDNA抗体、C3和C4 补体 ,疾病活动性用SLEDAI记分。结果 :SLE患者CD+4、CD+8淋巴细胞上DNAM 1表达率均高于正常对照组 (P<0 0 1) ;活动期SLE组CD+ 4、CD+ 8细胞上DNAM 1表达均高于正常对照组和静止期SLE组 (P <0 0 1) ,而静止期SLE组与正常对照组无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;SLE患者CD+8细胞DNAM 1表达与SLEDAI、抗dsDNA抗体之间呈显著正相关 (P <0 0 1) ,与C3和C4 补体水平呈明显负相关 (P <0 0 5 ) ,CD+4细胞DNAM 1表达与SLEDAI、抗dsDNA抗体、C3和C4 补体之间无明显相关性 (P >0 0 5 )。结论 :SLE患者体内存在T细胞亚群异常活化 ;活动期SLE患者T淋巴细胞亚群DNA 1表达增高 ;SLE患者CD+8细胞DNAM 1表达异常与SLEDAI、抗dsDNA抗体、C3和C4 补体之间有明显相关 ,CD+8细胞活化程度可能与SLE疾病严重程度有关 ,故DNAM 1可能参与了SLE的免疫发病机理。

DNAM-1在肝纤维化大鼠肝组织中的表达及阴行草水煎液的干预作用

目的研究DNAM-1在CCL4诱导肝纤维化大鼠肝组织中的表达情况,以及阴行草水煎液对其干预作用。方法 120只健康SD大鼠随机分为6组:空白对照组、模型组、阴行草组、丹参组、虎杖组及易善复组,每组20只。CCL4皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型。同时,空白对照组、模型组予生理盐水灌胃,其余4组大鼠分别予阴行草、丹参、虎杖水煎液及易善复灌胃干预。10周后处死大鼠,光镜下观察其肝脏病理组织学改变,进行肝纤维化分期。利用免疫组化SP法检测各组大鼠肝组织中DNAM-1表达水平,应用计算机图像分析技术对免疫组化结果进行定量分析。结果与模型组相比,阴行草组可明显降低CCL4诱导的肝纤维化程度(P<0.05);阴行草组大鼠肝组织中DNAM-1高于空白对照组,低于模型组(P<0.01)。结论 DNAM-1在肝纤维化大鼠肝脏组织中过表达;阴行草水煎液对CCL4诱导肝纤维化大鼠肝纤维化有明显的防治作用,其主要机制可能是抑制了DNAM-1的表达。

DNAM-1通过IL-2/STAT-5通路调节Ⅰ型调节性T细胞的增殖和功能

目的探讨DNAM-1对Ⅰ型调节性T细胞(Tr1细胞)活化、增殖和功能的影响及相关分子机制。方法利用anti-CD3/CD28激活小鼠T细胞,采用流式细胞术分别检测静息和激活状态下CD4+T细胞和Tr1细胞DNAM-1分子表达变化;分离DNAM-1基因敲除小鼠(KO小鼠)脾脏初始CD4+T细胞并体外诱导Tr1细胞,流式细胞术检测CD25和CD69活化分子表达水平,CFSE标记后检测增殖能力,IL-2刺激前后检测KO小鼠Tr1细胞分泌IL-10和转录激活蛋白(p-STAT5)水平变化。结果流式细胞术结果显示:与静息状态下相比较,激活状态的CD4+T细胞和Tr1细胞表达DNAM-1分子均增高(P<0.05);敲除DNAM-1不影响小鼠脾脏Tr1细胞的数量和比例,但KO小鼠Tr1细胞表达细胞激活分子CD25和CD69均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与WT小鼠比较,KO小鼠诱导型Tr1细胞体外增殖能力降低(P<0.05);与WT组Tr1细胞比较,KO小鼠Tr1细胞分泌抑制性细胞因子IL-10水平降低(P<0.05),给予IL-2刺激后仍无法逆转,表达Il-10 mRNA和Gzmb mRNA水平降低(P<0.05);给予不同剂量IL-2刺激Tr1细胞后,KO小鼠Tr1细胞表达p-STAT5水平相比较WT组均降低(P<0.05)。结论DNAM-1参与Tr1细胞的活化和增殖,并通过IL-2/STAT5信号通路影响Tr1细胞抑制功能。

靶向CD155及其受体的药物研究进展

分化簇155(CD155)是一种单次跨膜的细胞表面蛋白,在正常组织中表达量很少或不表达,但在包括胰腺癌、胆管癌、结直肠癌、非小细胞肺癌、膀胱癌、乳腺癌的多种恶性肿瘤中高表达,使其能够成为抗肿瘤药物的理想靶点。CD155作为细胞黏附分子参与肿瘤细胞的黏附、迁移和极化,还作为免疫调节分子与T细胞或NK细胞上的包括TIGIT、DNAM-1、CD96的共刺激或共抑制受体相互作用,发挥免疫调节作用,影响免疫微环境。目前靶向CD155及其受体的药物研发火热,其高亲和力受体TITIG有多种药物进入Ⅲ期临床,直接靶向CD155及其受体DNAM-1和CD96的肿瘤治疗也逐渐增加。通过对靶向CD155及其受体的药物研究进展进行综述,以期为后续的药物研发提供依据。

NK和NKT细胞对急性髓系白血病患者的临床影响

目的探讨急性髓系白血病(AML)患者中NK和NKT细胞的数量和功能及其与临床生物学特征和预后的关系。方法回顾性收集2018年1月至2020年1月山西医科大学第二医院血液科血液病研究所初诊的172例成年AML患者,同期体检中心健康人105例作为做对照,采用流式细胞术检测外周血NK和NKT细胞的百分比,并分析其与AML患者临床生物学特征、预后的关系,荧光定量PCR和Western Blot检测NK和NKT细胞激活受体DNAM-1和抑制受体TIGIT、TACTILE的mRNA和相应分子的表达,分析其与AML患者病理特征的关系。结果和健康者相比,AML患者的NK和NKT细胞中位百分比较低8.77%vs 10.93%(P=0.006),0.55%vs 1.15%(P=0.003);NK细胞百分比与骨髓中原始细胞比例成负相关性(r=-0.313,P=0.044);NK和NKT细胞的中位百分比越大其危险度分层越低(P<0.05);NKT细胞的百分比较高的AML患者有较好的OS和DFS(P<0.05);NK细胞的百分比与AML患者的OS和DFS的关系无显著统计学意义(P>0.05);NK和NKT细胞的激活受体DNAM-1mRNA和蛋白表达较低(P<0.05),而抑制受体TIGIT和TACTILE的mRNA和蛋白表达较高(P<0.05);诱导治疗缓解、部分缓解和难治患者NK和NKT细胞中位百分比分别为10.32%、11.04%与10.56%,0.37%、0.41%和0.34%,差别无统计学意义(P>0.05)。结论AML患者的NK和NKT细胞百分比降低具有特异性临床特点和预后相关,同时其激活受体DNAM-1表达较低而抑制受体TIGIT、TACTILE的表达较高,这可能限制其细胞毒性并促进了AML的免疫逃逸;NK和NKT细胞的百分比可以作为预后评价,甚至有望成为治疗AML的潜在靶标。