DNase1L3分泌减少和相关抗体诱发散发性SLE患者NET降解障碍

目的 探讨DNA酶1(DNase1)和DNA酶1样分子3(DNase1L3)活性改变与散发性系统性红斑狼疮(SLE)患者人群中中性粒细胞胞外诱捕网(NET)降解受损相关性及发生机制。方法 募集46例散发性SLE患者和30名正常个体,采用ELISA检测DNase1、 DNase1L3及相应自身抗体,免疫沉淀法分离样本DNase1和DNase1L3,改进的免疫荧光法检测NET和酶降解活性,酶联免疫斑点实验(ELISPOT)、 Western blot法和反转录PCR分析外周血单个核细胞(PBMC)分泌DNase1L3能力。结果H3-dsDNA和Ela-dsDNA两种复合物在SLE人群中的水平显著升高;低密度中性粒细胞(LDG)在SLE人群中的水平显著高于正常人群,LDG与H3-dsDNA和Ela-dsDNA两种NET复合物具有显著正相关性。SLE患者血浆体外降解NET的能力显著低于正常人群;DNase1和DNase1L3不同比例的综合降解实验显示DNase1L3降低是影响NET残留升高的关键;SLE患者人群DNase1L3自身抗体也显著高于正常人群;SLE患者PBMC分泌DNase1L3的能力相对正常人群减退。结论 DNase1L3分泌减少和相关自身抗体的存在是SLE人群NET降解能力减退的主要因素,为SLE患者病情监测和治疗提供新的方向。

DNASE1L3基因变异致狼疮性肾炎的临床及遗传学分析——附1例病例报道及文献复习

目的:分析DNASE1L3基因缺陷导致狼疮性肾炎(LN)患者的临床病理表现及基因变异特征。方法:结合1例伴肺出血的LN患者全外显子测序分析结果,总结DNASE1L3基因缺陷致LN患者的临床特征及致病变异谱。结果:该患者为男性,23岁起病,肾脏表现为大量蛋白尿及镜下血尿,肾活检病理提示LN-Ⅴ+Ⅳ型,合并肺出血、重度贫血、荨麻疹样皮疹、关节炎等表现。全外显子测序检出DNASE1L3基因c.565_568del(p.D189Sfs*17)纯合致病变异,该变异此前未见报道。文献检索报道了25例DNASE1L3基因缺陷致LN病例,结合本病例,共发现9个DNASE1L3基因致病变异位点,53.8%患者为男性,78.6%有血液系统受累,71.4%关节受累,71.4%荨麻疹样皮疹,42.9%肺部受累,35.7%消化系统受累,21.4%眼部受累,21.4%心脏受累,57.7%伴抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)阳性,50%预后不佳。结论:DNASE1L3基因缺陷更常见于男性LN患者,易累及血液系统、关节、皮肤、肺和消化系统,可伴ANCA阳性。对于LN伴ANCA阳性或肺出血的患者,应仔细询问家族史,及时完善基因检测,考虑DNASE1L3基因缺陷可能性。

血清Dnase1L3、CAR联合MHR对失代偿期乙型肝炎肝硬化患者预后的评估价值

目的探讨血清脱氧核糖核酸酶1样蛋白3(Dnase1L3)、C反应蛋白/白蛋白比值(CAR)联合单核细胞与高密度脂蛋白胆固醇比值(MHR)对失代偿期乙型肝炎肝硬化患者预后的评估价值。方法前瞻性选择2020年1月至2021年12月秦皇岛市第三医院收治的236例失代偿期乙型肝炎肝硬化患者(肝病组)和185例门诊体检的健康志愿者(对照组)。检测两组血清Dnase1L3、CAR、MHR水平以及肝功能,Pearson分析Dnase1L3、CAR、MHR与肝功能的相关性。追踪患者住院30 d存活情况,多因素logistic回归方程分析影响失代偿期乙型肝炎肝硬化患者住院30 d死亡的危险因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析Dnase1L3、CAR、MHR预测失代偿期乙型肝炎肝硬化患者院内30 d死亡的价值。结果肝病组血清Dnase1L3、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBiL)水平及CAR、MHR高于对照组(均P<0.05),肝病组血清Dnase1L3、CAR、MHR与AST、ALT、TBiL均呈正相关(均P<0.05)。236例患者30 d内死亡32例,终末期肝病模型(MELD)评分>18分、高Dnase1L3、高CAR、高MHR是失代偿期乙型肝炎肝硬化患者住院30 d死亡的危险因素(均P<0.05)。Dnase1L3、CAR、MHR和MELD评分联合预测失代偿期乙型肝炎肝硬化患者住院30 d死亡的曲线下面积为0.904,高于单独指标预测的0.719、0.678、0.763、0.742。结论失代偿期乙型肝炎肝硬化患者血清Dnase1L3水平及CAR、MHR增高,且与肝功能损伤程度以及住院30 d内死亡相关,在失代偿期乙型肝炎肝硬化预后预测中具有较高价值。

基于生物信息学分析DNASE1L3在肝细胞癌中表达及对预后的影响

目的:探究DNASE1L3在肝细胞癌中的表达情况以及对患者预后的影响,并通过生物信息学方法探索其潜在的影响途径。方法:基于TCGA、GSE14520和HPA数据库肝细胞癌数据分析DNASE1L3在正常和肿瘤组织中的表达差异。通过单因素及多因素COX回归分析及Kaplan-Meier生存分析探究DNASE1L3对肝细胞癌预后影响。基于GSE6764数据分析DNASE1L3在肿瘤不同进展时期的表达变化。使用ESTIMATE算法分析DNASE1L3与免疫和基质细胞浸润及肿瘤纯度的关系。使用Limma包对GSVA富集结果进行差异分析,并通过GeneMINIA在线工具挖掘DNASE1L3共表达基因。结果:DNASE1L3在肿瘤组织中表达减低,并且与患者预后不良相关。DNASE1L3在较大的肿瘤、较高的甲胎蛋白(AFP)水平和较晚期的肿瘤组织中的表达水平减低,并且随着肿瘤进展逐步减低。DNASE1L3低表达肿瘤组织中的免疫基质细胞丰度较低,而肿瘤纯度较高,数种免疫检查点基因表达也会增高。富集差异分析及共表达基因富集发现DNASE1L3主要涉及肝细胞癌的DNA损伤修复、细胞周期、脂肪酸代谢、糖酵解等过程,并涉及了免疫细胞浸润的调节过程。结论:DNASE1L3在肝细胞癌组织中低表达,影响肿瘤进展和肿瘤免疫过程,是一种有前途的预后分子标志物及治疗靶点,需要进一步地探索和研究。

基于数据挖掘分析DNASE1L3在肾癌中的表达及临床意义

目的基于数据挖掘分析低表达脱氧核糖核酸酶1样分子3(DNASE1L3)在肾细胞癌(肾癌)组织与正常肾组织中的表达,并分析其表达与肾癌诊断、预后及免疫浸润的关系。方法应用TIMER2、GEPIA2、TNMplot数据库在线分析DNASE1L3基因在肾癌组织中的表达水平,使用受试者工作特征(ROC)曲线评估检测DNASE1L3对肾癌的诊断价值,GEPIA2分析DNASE1L3表达与患者预后的关系,通过TIMER2分析DNASE1L3表达与免疫浸润的相关性。结果DNASE1L3在肾癌组织中的表达水平明显低于正常肾组织;基于RNA-seq数据,检测DNASE1L3诊断总体肾癌、3种肾癌分型的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.944、0.929、0.984、0.903;基于基因芯片数据,检测DNASE1L3诊断肾癌的AUC为0.896;DNASE1L3低表达总体肾癌、3种肾癌分型患者总体生存时间、无病生存时间均明显短于高表达患者,DNASE1L3表达在肾透明细胞癌、乳头状细胞癌、嫌色细胞癌中均与CD8^(+)T淋巴细胞浸润呈正相关,与调节性T淋巴细胞浸润呈负相关。肾乳头状细胞癌DNASE1L3低表达并高CD8^(+)T淋巴细胞浸润患者总体生存期低于DNASE1L3低表达并低CD8^(+)T淋巴细胞浸润患者。DNASE1L3在肾乳头状细胞癌中的表达与CD8^(+)T淋巴细胞标记基因(CD8A和CD8B)呈正相关。结论DNASE1L3在肾癌组织中低表达,其表达与肾癌诊断、病理分期、不良预后、免疫浸润相关,有望成为诊治肾癌的潜在标志物。

系统性红斑狼疮患者血清IL-2Rα、OAS1、DNase1L3与疾病活动度和早期肾损伤的关系研究

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清白细胞介素-2受体α(IL-2Rα)、5’-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)、脱氧核糖核酸酶1Like3(DNase1L3)与疾病活动度和早期肾损伤的关系。方法:纳入我院2018年1月-2021年12月期间收治的113例SLE患者,根据SLE疾病活动度评分(SLEDAI)将患者分为轻度组(n=48,SLEDAI评分0~9分)、中度组(n=28,SLEDAI评分10~14分)、重度组(n=37,SLEDAI评分≥15分)。根据患者肾小球滤过率(eGFR)将患者分为肾功能正常组[n=48,eGFR>90 m L/(min·1.73 m_(2))]和早期肾功能损伤组[n=65,eGFR为60~90 m L/(min·1.73 m_(2))]。对比轻度组、中度组和重度组的血清IL-2Rα、OAS1、DNase1L3水平。采用单因素及多因素Logistic回归分析SLE患者早期肾损伤的影响因素。结果:重度组、中度组的IL-2Rα、OAS1高于轻度组,且重度组高于中度组(P<0.05)。重度组、中度组的DNase1L3低于轻度组,且重度组低于中度组(P<0.05)。单因素分析结果显示,SLE患者早期肾损伤与年龄、SLEDAI评分、病程、三酰甘油(TG)、血小板(PLT)、血红蛋白(Hb)、血白蛋白(ALB)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、C3、eGFR、血尿酸(UA)、β2微球蛋白(β2MG)、IL-2Rα、OAS1、DNase1L3有关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示年龄、Scr、UA、β2MG、IL-2Rα、OAS1均是SLE患者早期肾损伤的影响因素(P<0.05)。结论:IL-2Rα、OAS1、DNase1L3参与着SLE的疾病进展,其中IL-2Rα、OAS1可与年龄、Scr、UA、β2MG等因素共同辅助评估早期肾功能损伤。

脱氧核糖核酸酶1在肾细胞癌中的作用及机制研究

肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)患者在手术后对放疗、化疗和靶向治疗均不敏感。前期研究证明,在肝癌中,脱氧核糖核酸酶1(deoxyribonuclease 1-like 3,DNASE1L3)可以分解包膜内的单链和双链DNA,通过弱化糖酵解的限速酶,抑制细胞周期、增殖和代谢。然而,DNASE1L3在肾癌中的作用和相关机制尚不清楚。从癌症基因组图谱数据库(the Cancer Genome Atlas,TCGA)中下载并分析了肾癌RNA测序数据;使用(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库、人类蛋白质图谱数据库和免疫印迹验证DNASE1L3的表达水平;运用免疫相关数据库分析、划痕和侵袭实验,探究了DNASE1L3的作用和潜在机制。结果发现,在TCGA肾癌数据中,DNASE1L3表达量与患者的临床特征显著相关,且与患者生存期呈正相关;过表达DNASE1L3会抑制ACHN和786-O细胞的增殖和侵袭能力。结果表明,DNASE1L3可能成为肾癌患者诊断和治疗的潜在生物标志物。