钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复NHEJ通路相关蛋白的作用

目的研究钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙(VP-16)诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复NHEJ通路相关蛋白Ku80及DNApks的作用,以及对裸鼠体内成瘤的影响。方法高内涵分析仪检测空载的CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞中非同源重组NHEJ修复通路的特异性质粒EJ5-GFP的阳性率;检测空载的CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细胞在VP16诱导后Ku80的表达;实时荧光定量PCR检测空载的CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细胞的Ku80转录水平的变化;体内异种移植空载的CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞后观察VP-16对鼻咽癌肿瘤质量大小的影响及抑瘤率。结果高内涵分析显示下调Capn4的表达能够抑制CNE2细胞DNA损伤后NHEJ修复通路的GFP阳性率(P<0.01);下调Capn4表达后VP16诱导的CNE2细胞NHEJ通路相关蛋白Ku80、DNApks的表达下降(P<0.01);下调Capn4表达能下调裸鼠成瘤后肿瘤的体积与质量(P<0.01)。结论Capn4对NHEJ通路的抑制与通路相关蛋白Ku80、DNApks有关;下调Capn4的表达能够抑制鼻咽癌肿瘤生长、增加鼻咽癌对放化疗的敏感。