5-氮杂-2′-脱氧胞苷和MS-275对非小细胞肺癌细胞株生长及DNMT1蛋白表达的影响

目的:探讨表观治疗对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞DNMT1蛋白表达的影响及生物学作用。方法:NSCLC细胞分组治疗,CCK-8、MTT检测表观药物对NSCLC细胞的影响,Western blot检测其对NSCLC细胞DNMT1蛋白表达的影响。结果:CCK-8和MTT结果显示,表观治疗可抑制NSCLC细胞的增殖及生长;Western blot结果显示,5-氮杂-2′-脱氧胞苷和MS-275的表观治疗可降低DNMT1蛋白的表达。结论:5-氮杂-2′-脱氧胞苷和MS-275的表观治疗能有效抑制NSCLC细胞中DNMT1蛋白的表达,并且对NSCLC细胞的增殖和生长有明显抑制作用。

DNMT1蛋白通过沉默MEG3基因促进视网膜母细胞瘤增殖

目的探讨DNMT1蛋白是否通过沉默MEG3基因诱导视网膜母细胞瘤增殖。方法通过转染pcDNA-DNMT1或si-DNMT1上调或干扰DNMT1的表达水平;通过转染pcDNA-MEG3或si-MEG3上调或干扰MEG3的表达水平;用Western blot检测视网膜母细胞瘤细胞系中DNMT1蛋白表达量;用CCK-8法及EdU法检测细胞的增殖能力;用实时荧光定量PCR技术检测转染后的视网膜母细胞瘤细胞中MEG3表达量的变化;干扰DNMT1表达后,用甲基化特异性PCR检测MEG3基因启动子DNA甲基化水平的变化。结果视网膜母细胞瘤SO-RB50及HXO-RB44细胞中DNMT1蛋白表达量显著升高(P<0.05)。转染了pcDNA-DNMT1的HXO-RB44细胞中DNMT1蛋白表达增加,细胞增殖能力增加,MEG3表达量降低;转染了siRNADNMT1的SO-RB50细胞DNMT1蛋白表达减少,细胞增殖能力降低,MEG3表达量增加(P<0.05)。干扰DNMT1蛋白表达后,MEG3基因启动子DNA甲基化水平降低(P<0.05)。逆转DNMT1蛋白对MEG3基因的调控后,DNMT1蛋白调控RB细胞增殖的能力减弱(P<0.05)。结论在视网膜母细胞瘤细胞中,DNMT1蛋白表达的上调,诱导了MEG3基因启动子DNA甲基化失活,最终导致细胞异常增殖。