人胃癌组织中PDCD4与DNMT1表达及初步研究

目的通过检测PDCD4和DNMTI在胃癌组织、癌旁组织、正常组织中的表达,研究其临床意义。方法选取2012年6月至2013年3月9个月间在我院进行治疗的胃癌患者,采用免疫组织化学SP法检测60例胃癌组织、60例癌旁组织、60例正常胃黏膜组织。收集三组患者PDCD4和DNMTI的表达水平、阳性率,用RT-PCR法检测PDCD4和DNMTIm RNA的表达,研究其病理学参数关系,并对收集的数据进行统计学分析。结果 DNMTI在胃癌组织、癌旁组织、正常组织中阳性含量为71.67%、61.67%、36.67%,PDCD4在胃癌组织、癌旁组织、正常组织中阳性含量为30%、50%、70%,表现出相反的趋势,经表达相关性分析成负相关关系。胃癌组织与癌旁组织比较数据差异不明显,不具有统计学意义(P>0.05)。而胃癌组织、癌旁组织与正常组织相比较数据差异明显,具有统计学意义(P<0.05)。PDCD4和DNMTI的表达都与病理分型存在显著相关性(P<0.05)。结论 PDCD4和DNMTI的表达出现异常与胃癌的发生、发展存在密切联系,两者表达成负相关关系。

DNA甲基转移酶抑制剂抗肿瘤的免疫机制及其在肿瘤免疫治疗中的应用

DNA甲基化是一种重要的表观遗传修饰方式,在基因转录、染色质重塑以及基因组不稳定性的调节过程中扮演重要角色。DNA甲基转移酶(DNMT)是催化DNA甲基化的重要表观遗传分子,能够诱导多种肿瘤的发生发展。DNMT抑制剂(DNMTi)在肿瘤免疫治疗领域日益受到重视,已被批准用于急性髓细胞性白血病的治疗并被广泛应用于肿瘤免疫治疗的临床试验中。DNMTi能够促进抑癌基因的再活化、提高肿瘤的免疫原性及刺激自然杀伤(NK)细胞和CD8+T细胞发挥细胞毒作用。我们主要总结了DNMTi抗肿瘤的免疫机制及其在免疫治疗领域的研究进展,展现了DNMTi巨大的开发潜能和临床应用价值。

重组杆状病毒介导的DNMT1 siRNA对人胰腺癌细胞增殖影响的研究

目的:研究利用重组杆状病毒介导的DNMT1siRNA对人胰腺癌细胞增殖的影响。方法:培养人胰腺癌细胞并分组如下:空白对照组、阴性对照组、病毒r-Bac-si-DNMT1-D1组(D1组)、r-Bac-si-DNMT1-D2组(D2组)、r-Bac-siDNMT1-D3组(D3组)。空白对照组仅加10%胎牛血清和DMEM培养基培养,阴性对照组、D1组、D2组、D3组加血清和DMEM培养基培养24h后依次加入空白载体r-Bac-CMV-EGFP和r-Bac-si-DNMT1-D1病毒、r-Bac-si-DNMT1-D2病毒、r-Bac-si-DNMT1-D3病毒150μl/孔,72h后分别收集各组细胞用MTT法测肿瘤细胞增殖的变化。结果:重组杆状病毒介导的DNMT1siRNA感染的细胞存活率较空白对照组和阴性对照组明显降低(P<0.05)。结论:杆状病毒介导的DNMT1siRNA感染人胰腺癌细胞后能通过降低细胞存活率,从而影响胰腺癌细胞的增殖。

骨髓增生异常综合征中的表观遗传学变化及相关药物治疗的新进展

骨髓增生异常综合征(MDS)是一组异质性克隆性恶性疾病。多数研究表明,表观遗传学异常是其重要发病机制之一,针对骨髓增生异常综合征的异常表观遗传学改变,目前在临床上应用去甲基化药物治疗且取得一定疗效,本文就MDS的异常表观遗传学发展及其去甲基化药物的应用进展做一综述。

RNA干扰DNA甲基转移酶1对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖和凋亡的影响

目的观察以DNA甲基转移酶1（DNA methy transferas 1，DNMT1）基因为靶基因的RNA干扰对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖及凋亡的影响。方法设计、合成针对DNMT1基因的siRNA和阴性对照siRNA（N—siRNA）。实验分为空白对照组、脂质体组（仅予脂质体）、N—siRNA组（转染30 nmol N-siRNA）、siRNA组（转染30 nmol siRNA）。siRNA转染48h后，实时PCR法检测DNMT1 mRNA水平；WST-8法检测细胞增殖；流式细胞技术检测细胞凋亡。结果siRNA组DNMT1mRNA的抑制率为（86．0±4．3）％，明显高于N—siRNA组的（40．1±2．2）％和空白对照组的0（P〈0．01）；细胞存活率为（47．6±5．6）％，明显低于N—siRNA组的（68．1±4．1）％和空白对照组的100％（P〈0．01）；细胞凋亡率为（14．94±2．89）％，明显高于空白对照组的（7．51±1．12）％、脂质体组的（7．06±0．39）％、N—siRNA组的（8．84±1．44）％（均P〈0．01）。结论siRNA能特异、有效地抑制人胰腺癌PaTu8988细胞DNMT1 mRNA的表达，同时抑制细胞增殖、促进细胞凋亡。