DON净化柱——高效液相色谱法检测粮谷中呕吐毒素

通过自制DON净化柱和高效液相色谱仪,建立了检测谷物中呕吐毒素的方法。样品经乙腈—水溶剂提取后,通过自制的DON净化柱净化,采用C18分离柱和紫外检测器测定。结果表明:样品通过乙腈—水(体积比V/V,84∶16)混合溶剂和超声20min的提取,可大幅度提高方法回收率;呕吐毒素在0.5mg/kg～8.0mg/kg内线性关系好,相关系数为0.999;在0.5、2.0和8.0mg/kg的加标水平下,回收率为95.1%～102.3%,相对标准偏差为1.8%～6.4%,检出限(信噪比)为50μg/kg。

粮食中DON-免疫亲和层析净化高效液相色谱法的回收率方法比较

用免疫亲和层析净化高效液相色谱法测定粮食中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇,且与GB/T 23503-2009《食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法》、Romer labs实验室推荐方法、实验室优化方法进行比较。本实验方法在前两种方法的基础上优化后,在0.5mg/kg^5mg/kg的加标水平下,回收率在90.3%~100.2%,RSD在1.2%~2.0%之间,最低检出限则为44μg/kg,定量限为146μg/kg,能够很好的满足实验室分析要求。

基于HPLC研究柏子仁中黄曲霉毒素的污染状况与风险分析

目的基于HPLC研究柏子仁中4种黄曲霉毒素的污染情况,并进行风险分析,评估柏子仁的用药安全。方法采用Agilent Eclipse Plus C 18(4.6×250 mm 5μm)为色谱柱,柱后光化学衍生法检测,以甲醇∶乙腈∶水(35∶10∶55)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1);柱温:40℃;荧光检测器检测。结果黄曲霉毒素B 1、B 2、G 1、G 2分别在0.35~20.8μg·L^(-1)、0.13~7.6μg·L^(-1)、0.36~21.6μg·L^(-1)、0.13~7.6μg·L^(-1)范围内呈良好的线性关系,黄曲霉毒素B 1、B 2、G 1、G 2平均回收率分别为90.6%、83.46%、87.84%、86.58%,相对偏差分别为2.9%、3.6%、3.6%、4.7%。23批柏子仁中有14批检出黄曲霉毒素B 1和总量,残留量分别在1~4μg·kg^(-1)和1~5μg·kg^(-1)之间,均符合规定,但检出率高达61%,存在安全隐患。结论该方法简单、准确、方便,能有效评价柏子仁中黄曲霉毒素的污染情况。警示柏子仁易受黄曲霉毒素的污染,需加强柏子仁监管力度和不定期的专项抽检,降低安全风险,以确保临床用药安全。

HPLC 法测定中药中黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2 的含量

目的:建立中药中的黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2的 HPLC 测定方法。方法:样品经有机溶剂提取、免疫亲和柱净化后,用高效液相色谱-柱后衍生-荧光检测器进行分析测定。结果:黄曲霉毒素 G2、B2在2.25-150pg 范围内线性关系良好,黄曲霉毒素 G1、B1在7.5-500pg 范围内线性关系良好,r>0.9999。回收率在60%-110%之间。结论:该方法快速简便,准确,可作为中药中黄曲霉毒素的含量测定方法。

免疫亲和柱HPLC荧光检测酒中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2

采用单克隆抗体免疫亲和技术作为直接从样品中分离提纯黄曲霉毒素的特效手段 ,提取液挥发干后 ,经衍生用 HPLC荧光检测器测定。本法在样品中添加 2 .5μg/ kg黄曲霉毒素时进行 10次测定 ,平均回收率分别为 G173.8%、B197.3%、G2 6 1.7%、B2 90 .5% ;2 .5μg / kg 10次测定的精密度分别为 :G14.50 %、B13.80 %、G2 3.6 8%、B2 4 .77% ,本方法在 2 5— 12 50 pg范围内呈线性 ,相关系数分别为 G1:r=0 .9990、B1:r=0 .9994、G2 :r=0 .9995、B2 :r=0 .9992。测定的最低检出限为 6 .2

运用免疫亲和柱和高效液相色谱(HPLC)检测啤酒大麦中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇

采用免疫亲和柱净化、高效液相色谱定量等方法对啤酒大麦中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)进行检测。向啤酒大麦中加入标准品,加标的范围在0.10～2.00μg/g,加标回收率为92.04%～97.29%,相对标准偏差是0.92%～2.67%。检出限是0.01μg/g。所测样品中DON的含量范围在0.0123～0.0926μg/g,其中江浙、云南和东北产区的啤酒大麦中DON含量较高。

免疫亲合柱净化HPLC柱后溴衍生化方法检测中药中黄曲霉毒素

目的采用免疫亲合柱净化,结合柱后衍生化的高效液相色谱荧光检测器检测常用中药材中的黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2。方法样品经甲醇水(7∶3)溶液超声提取后,通过免疫亲合柱净化洗脱,再经过溴化溴化吡啶柱后衍生,高效液相色谱分离定量。结果B2和G2的最低检出限为006μg·kg-1,B1和G1的最低检出限为020μg·kg-1。回收率实验添加两个水平的标样,回收率904%～997%,RSD3%～12%。结论采用此方法检测常用中药材中的黄曲霉毒素无干扰性杂峰,结果准确可靠。

HPLC法测定粮谷中的呕吐毒素

目的：建立粮谷中呕吐毒素的HPLC的检测方法。方法：样品经提取、过免疫亲和柱净化后，用高效液相色谱-紫外检测器进行分析。结果：呕吐毒素在2～100ng范围内线性关系良好，r〉0．999。回收率在80％-110％之间，定量限为2ng，检测限为0．5ng。结论：该方法快速、简便、准确，可作为粮谷中呕吐毒素定量测定的有效手段。

HPLC法测定常用食品中玉米赤霉烯酮

目的：建立了常用食品中玉米赤霉烯酮的HPLC检测方法。方法：样品经提取、过免疫亲和柱净化后，用高效液相色谱-荧光检测器进行分析。结果：玉米赤霉烯酮在5—100．g／ml范围内线性关系良好，r〉0．999。回收率在80％-110％之间，定量限为10μg／kg，检测限为2μg／kg。结论：该方法快速、简便、准确，可作为常用食品中玉米赤霉烯酮定量测定的有效手段。

免疫亲和柱净化—HPLC法测定植物油中玉米赤霉烯酮

建立了免疫亲和柱净化—高效液相色谱荧光法检测植物油中玉米赤霉烯酮的分析方法。方法的定量检出限为9.5μg/kg,相对标准偏差低于7.2%,回收率为89.2%～111.5%。该方法简便快速、灵敏准确、重现性好,可以用于植物油中玉米赤霉烯酮的定量检测。

免疫亲和柱净化-HPLC光化学柱后衍生法测定玉米中黄曲霉毒素B_(1)的含量

目的:建立免疫亲和柱净化-HPLC光化学柱后衍生法测定玉米中AFB_(1)的方法,检测玉米能力验证样品中AFB_(1)的含量。方法:采用免疫亲和柱净化,使用C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),在流动相为甲醇∶水(45∶55),流速为1.0 mL·min^(-1),荧光检测器激发波长360 nm,发射波长450 nm,柱温40℃,进样量10μL的色谱条件下经柱后光化学衍生对玉米中的AFB1含量进行测定。结果:AFB1在2.5~80.0 ng·mL^(-1)浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数r=0.9999,方法检出限为0.05μg·kg^(-1),加标回收率为88.5%~94.3%。结论:该方法具有操作简便、快速、稳定性好、回收率高等优点,适用于玉米中AFB_(1)含量的测定。

多功能柱净化-高效液相色谱法同时检测小麦中雪腐镰刀菌烯醇和脱氧雪腐镰刀菌烯醇

建立了小麦中雪腐镰刀菌烯醇（NIV）和脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）的高效液相色谱同时检测方法。样品采用乙腈-水（体积比85：15）混合溶剂进行提取．通过多功能净化柱（MFC）进行一次性净化，以C18柱为分离柱，水-乙腈-甲醇（体积比90：5：5）混合溶剂为流动相进行高效液相色谱分离和检测。在小麦样品中，本方法在0．2～5μg／g添加范围内的凹收率为87％～99％；相对标准偏差为1．5％～8．3％；DON和NIV的检出限分别为0．12和0、16μg／g（5／N=3）。

测定玉米中伏马毒素的免疫亲和层析净化高效液相色谱法

伏马毒素(Fumonisins)是串珠镰刀菌繁殖产生的一类真菌毒素。玉米在生长和储存过程中极易受到伏马毒素的侵染。流行病学研究结果表明,受到伏马毒素污染的玉米及其制品可导致马白脑软化症、猪肺水肿综合症,还可诱发人类食管癌和胎儿神经管畸形等疾病。本研究建立了应用免疫亲和柱净化高效液相色谱测定玉米中伏马毒素B1和B2的方法,同时,运用统计学方法对该法进行了准确性和再现性评价。结果表明,FB1和FB2线性范围分别为0.06～5.00μgmL1和0.04～2.50μgmL1,回收率分别为76.6%～93.8%和77.9%～93.4%,FB1和FB2方法定量限分别为0.09mgkg1和0.06mgkg1,实验室内重复性测定的变异系数均低于5%,实验室间再现性测定的变异系数低于6%。上述结果说明该方法的线性、准确度、精密度、灵敏度及同一实验室重复性和多家实验室的再现性评价结果优良,适合作为伏马毒素的测定方法。应用该方法对310份玉米进行了伏马毒素的测定,结果表明,大田、存储玉米伏马毒素总量范围分别为0.20～9.06mgkg1和0.21～6.10mgkg1,建议应加强玉米中伏马毒素污染水平监控,保证人畜健康。

免疫亲和柱高效液相色谱法快速测定牛奶和奶粉中黄曲霉毒素M_1、B_1、B_2、G_1、G_2

采用单克隆抗体免疫亲和技术作为直接从样品中分离提取黄曲霉毒素的特效手段,提取液挥干后,经衍生用HPLC荧光检测器测定。对鲜奶和高脂奶粉(脂肪含量25%)在0.01,0.05,0.1和0.1,0.5,1.0μg.L-1水平对黄曲霉毒素M1、B1、B2、G1、G2测定平均回收率(n=10)为66.0%~97.0%;相对标准偏差(n=10)为1.04%~14.0%。方法的检出限低于0.01μg.L-1(鲜奶),0.1μg.kg-1(奶粉)。

免疫亲和柱净化-高效液相色谱法同时检测鸡蛋中6种玉米赤霉醇类化合物残留量

建立了鸡蛋中6种玉米赤霉醇类化合物(α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮)残留量的免疫亲和柱净化-高效液相色谱检测方法。样品酶解后用叔丁基甲醚提取、氢氧化钠反萃取,经免疫亲和柱富集和净化后,采用高效液相色谱-紫外检测器进行测定。色谱柱:Agilent EclipseXDB-C18(150 mm×4.6 mm,3.5μm);流动相:甲醇-乙腈-水(50∶15∶35,v/v/v);流速:1.0 mL/min;检测波长:270nm。结果表明,6种目标物在0.01～0.2 mg/L范围内线性关系良好,相关系数(r)≥0.999 8,检出限(LOD,S/N≥3)为1.0μg/kg,平均回收率为73.2%～95.7%,相对标准偏差小于8%。该方法灵敏度高、重现性好,适用于鸡蛋样品中痕量玉米赤霉醇类药物残留的测定。

高效液相色谱快速测定玉米中黄曲霉毒素的研究

黄曲霉毒素（AFT）主要是由真菌产生的具有严重毒性的化学结构类似的次级代谢产物，玉米极易受其污染。通过考察不同激发波长（λEx）和发射波长（λEm）、不同流动相组成，免疫亲和柱（IAC）净化与未经净化的样品对AFT检测结果的影响。结果表明，入Ex为360nm，μEm为440nm，流动相组成为水-甲醇（65：35），玉米中AFr检测分离效果最好；且未经IAC净化的样品，虽有一些杂质干扰检测结果，但方法的线性范围（0．04～26ng）和检出限（0．1μg／kg）仍良好，方法加标回收率在81．7％-94．3％，标准偏差在3．6％～6．2％，日内、日间精密度分别为4．5％～5．1％和4．8％～5．5％。该方法具有快速、准确、重现性好、稳定性高、成本低的优点，适合大批次污染AFT的玉米检测。

脑立清丸等6种中成药中黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1的测定

目的:建立了脑立清丸等6种中成药中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的HPLC测定方法。方法:样品经70%甲醇提取、免疫亲和柱净化后,用高效液相色谱-柱后衍生-荧光检测器进行分析测定。结果:黄曲霉毒素G2、B2在1.5～60pg范围内线性关系良好,黄曲霉毒素G1、B1在5～200pg范围内线性关系良好,r>0.9999。回收率在60%～120%之间。结论:该方法快速简便,准确,可作为脑立清丸、人参养荣丸、人参健脾丸、三七片、金水宝胶囊和百令胶囊中黄曲霉毒素的含量测定方法。

免疫亲和柱-高效液相色谱法测定牛奶中氯霉素和玉米赤霉醇及其类似物

建立免疫亲和柱同时净化-高效液相色谱法测定牛奶中氯霉素和玉米赤霉醇及其类似物(α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮)残留量的方法。样品经免疫亲和柱净化与富集后,用高效液相色谱-紫外检测器检测。采用Cloversil-C18反相柱分离,流动相为乙腈-甲醇-水溶液,检测波长为265 nm。结果表明,牛奶中添加氯霉素和玉米赤霉醇及其类似物的回收率在74%~101%,且相对标准偏差均小于7%。氯霉素的检出限为0.02 μg/L,玉米赤霉醇及其类似物的检出限分别为α-玉米赤霉醇0.03 μg/L、β-玉米赤霉醇0.03 μg/L、α-玉米赤霉烯醇0.03 μg/L、β-玉米赤霉烯醇0.03 μg/L、玉米赤霉酮0.04 μg/L和玉米赤霉烯酮0.05 μg/L。该方法灵敏度高、重复性好,提高了检测速率,可满足牛奶样品中痕量氯霉素和玉米赤霉醇及其类似物残留的测定。

氯霉素免疫亲和柱的制备及在牛奶中痕量氯霉素残留分析中的应用

将氯霉素多克隆抗体与sepharose-4B偶联,制备了对氯霉素有特异性吸附的免疫亲和柱。采用紫外扫描鉴定偶联反应,利用直接竞争酶联免疫吸附法及高效液相色谱法对制备好的免疫亲合柱进行评价。通过纯化牛奶基质,对该免疫亲和柱的纯化能力进行了研究。结果表明,12.84mg抗体与sepharose-4B的联接率为91.06%。以2%甲醇/水溶液预洗涤杂质,80%甲醇/水溶液洗脱分析物,可以消除牛奶基质对高效液相色谱分析氯霉素的影响。在牛奶中添加1.5μg/L～5μg/L氯霉素标品,测得其回收率为95.2%～105.9%,相对标准偏差为1.19%～4.18%。该亲和柱可以明显消除基质影响,提高检测的灵敏度。

免疫亲和柱净化光化学衍生高效液相色谱-荧光检测法测定动物类药材中黄曲霉毒素

目的建立动物类药材中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的免疫亲和柱净化光化学衍生高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FLD)法。方法样品经甲醇-水(80∶20)提取后,通过免疫亲和柱净化、柱后光化学衍生、高效液相色谱-荧光检测器测定。结果在优化条件下,黄曲霉毒素G2,G1,B2,B1的检出限分别为0.15,0.25,0.1,0.2μg/kg,回收率为78.8%～106.7%,RSD均低于7.1%。结论所用方法简便快速、灵敏度高、重现性好,可满足动物类药材中黄曲霉毒素检测的需要。