基于电子鼻技术的小麦籽粒DON含量检测

为探究利用电子鼻技术对小麦籽粒中DON含量定量检测的可行性,本研究在25℃和40℃平衡温度下对DON含量不同的80个小麦籽粒样品的顶空气体进行电子鼻检测,并结合由UPLC-MS/MS测得的各样品DON含量进行统计分析,结果发现,除4号和5号传感器外,其余8个传感器的响应值均与样品DON含量具有显著或极显著的相关性,其中1号传感器的响应值及其参数与样品DON含量的相关性最强,表明1号传感器可以作为检测小麦籽粒样品DON含量的关键气体传感器。以1号传感器的参数为主,分别建立了在两平衡温度下样品DON含量的回归模型。对各模型的拟合效果分析发现,在40℃平衡温度下基于X_(17)(1号传感器21~60 s响应值的和)所建一元回归模型最好;在25℃平衡温度下,基于X_(1)(1号传感器20~40 s响应值的平均值)和X_(12)(8号传感器1~5 s响应值的和)所建二元回归模型拟合效果最好,其次为基于X_(1)所建的一元回归模型。该研究可为电子鼻技术在小麦籽粒中DON含量检测中的应用提供理论依据和技术支撑。

山东省肉鸡全价料及饲料原料中AFB_1、FUMB_1、DON和ZEN污染情况调查报告

应用HPLC-MS/MS对山东省肉鸡全价料及原料中黄曲霉毒素B1(AFB1)、伏马毒素B1(FUMB1)、呕吐毒素(DON)和玉米赤霉烯酮(ZEN)的含量进行检测。结果发现,324份样品中AFB1、FUMB1、DON和ZEN检出率分别为89.81%、77.16%、63.58%和97.22%,平均浓度分别为38.24、1 259.61、681.15μg/kg和889.34μg/kg,说明山东地区肉鸡全价料及原料霉菌毒素污染比较普遍;在全价料及原料中,全价料、花生粕、棉籽粕和DDGS中ZEN和AFB1污染较严重,玉米中ZEN和FUMB1污染较严重,麸皮中ZEN和DON污染较严重,玉米蛋白粉中4种霉菌毒素污染均较重。

芒果畸形病与DON和ZEN的关系初析

运用酶联免疫吸附法,对芒果畸形病组织中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和玉米赤霉烯酮(ZEN)含量进行检测。结果显示:病组织中,DON含量达6296.77ng/mL,ZEN含量达278.80ng/mL;健康芒果组织中,二者含量分别为2327.27ng/mL和134.49ng/mL。说明高浓度毒素可能导致芒果植株叶芽大量畸形增生而不发育,花序畸形,花胚退化等症状。

2017年山东地区鸡饲料及原料中AFB_1、DON和ZEN污染情况调查

应用高效液相色谱串联质谱法对山东地区肉鸡和蛋鸡配合饲料及玉米、麸皮、豆粕、花生粕、棉籽粕、DDGS和玉米蛋白粉中黄曲霉毒素B1(AFB1)、呕吐毒素(DON)和玉米赤霉烯酮(ZEN)的含量进行检测。结果发现:434份样品中AFB1、DON和ZEN检出率分别为55.30%、81.57%和92.17%,超标率分别为14.98%、1.38%和2.30%,平均含量分别是32.72μg/kg、575.55μg/kg和122.81μg/kg。说明2017年山东地区鸡饲料及原料中霉菌毒素污染存在广泛性、水平较高和超标较严重的特点,其中AFB1超标严重,DON和ZEN污染率高。

杀菌剂施药时期和次数对小麦赤霉病的防效和DON、ZEN毒素的影响

为探求对小麦赤霉病防效好且对镰刀菌毒素控制较好的药剂,笔者用7种杀菌剂,分别在穗期开展防治1遍和2遍试验。结果表明,用25%氰烯菌酯SC 1800 mL/hm^(2)、600 g/L戊唑·百菌清SC 600 g/hm^(2)、50%叶菌唑WDG 240 g/hm^(2)、48%丙硫菌唑SC 600 mL/hm^(2)防治2遍,对小麦赤霉病和DON(脱氧雪腐镰刀菌烯)、ZEN(玉米赤霉烯酮)毒素的控制均能达到较好的效果。

不同药剂对小麦赤霉病DON毒素及田间防效的影响

为了研究小麦赤霉病的防效及毒素残留,选用氰烯菌酯·戊唑醇等8种药剂对试验田块喷施,分析不同药剂、不同施药次数对DON毒素的影响。结果表明,喷施药剂的次数和时间并不影响DON毒素的含量;在毒素测定试验中,氰烯菌酯·戊唑醇能有效降低DON毒素含量,其次是氰烯菌酯,且具有持效性,但随着用药时间的推移,防效逐渐下降;最后推荐使用烯菌酯·戊唑醇在扬花初期及灌浆初期喷施2次用药。

DON毒素和硒对软骨聚集蛋白聚糖硫酸化修饰的影响

目的研究大骨节病(Kashin-Beck disease,KBD)可疑致病因子脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)和补硒对软骨细胞外基质聚集蛋白聚糖(aggrecan)硫酸化修饰的影响。方法应用体外单层培养C28/I2人软骨细胞,采用MTT法测定不同浓度DON和不同作用时间下的细胞增殖活性,通过Real-time PCR和Western-blot法分别检测加DON毒素或补硒后软骨细胞的aggrecan、PAPS合成酶2(PAPS synthetase 2,PAPSS2)、PAPS转运体1(PAPS transporter 1,PAPST1)、N-乙酰氨基半乳糖胺-4,6-硫酸转移酶[carbohydrate(N-acetylgalactosamine 4-sulfate 6-O)sulfotransferases 15,CHST15]以及芳基硫酸酯酶B(arylsulfatase B,ARSB)mRNA和蛋白的表达水平。结果 DON毒素可抑制C28/I2软骨细胞系的增殖活性,在DON毒素作用下aggrecan、PAPSS2、PAPST1和CHST15的mRNA和蛋白质表达水平降低,ARSB mRNA和蛋白质表达水平升高,加硒可在一定程度上改善这种状况。结论 DON毒素对软骨细胞的增殖有明显的抑制作用,细胞对毒素有一浓度和时间的依赖性;DON毒素可通过改变aggrecan硫酸化修饰相关酶类的表达水平影响软骨蛋白聚糖的硫酸化。

DON毒素和小麦互作对小麦幼穗细胞可溶性蛋白的影响

本研究经小麦幼穗细胞和DON毒素混合处理，研究抗赤霉病程度不同的苏麦3号（R）、望水白（R）、延冈坊主（R）、Alondra's（S）、安徽11（S）和仪宁小麦（S）的可溶性蛋白谱带的变化。用3μg／ml的脱氧雪腐镰刀菌烯酸（DON）与小麦幼穗细胞混和处理2、8、24、30h，分别提取可溶性蛋白，进行PAGE测定。结果显示，感病品种有多条谱带消失，如仪宁小麦、安徽11、Alondra's在处理2h后Rf0．13的条带消失，处理8h后Rf0．02条带消失，感病品种Alondra’s和安徽11在处理24h后Rf0．05的条带消失。抗病品种的电泳谱带没有变化，如苏麦3号、望水白在毒素处理后蛋白条带没有发生变化，抗病品种延冈坊主在处理24h后RfO．OS、O．11的蛋白带仅有变浅的趋势。研究还表明抗病品种苏麦3号、望水白、延冈坊主具有感病品种没有的Rf0．3的蛋白带，且在毒素处理前后保持一致。

氟唑菌酰羟胺不同施药时间对小麦赤霉病防效及DON毒素控制研究

为明确新型杀菌剂氟唑菌酰羟胺对小麦赤霉病防治适期、防治效果及对籽粒中DON(脱氧雪腐镰刀菌烯醇)毒素的控制效果。采用田间试验的方法研究了氟唑菌酰羟胺对小麦赤霉病的防效,并采用液相色谱质谱法检测不同处理小麦籽粒中DON毒素的含量。试验结果表明,喷雾1次,20%氟唑菌酰羟胺悬浮剂防治小麦赤霉病最佳施药时间是小麦扬花30%~50%时,此时施药对小麦籽粒中DON毒素控制效果达97.48%。20%氟唑菌酰羟胺悬浮剂作为防治小麦赤霉病的理想药剂将具有良好的应用和推广前景。

组合分选方法对减除小麦中DON毒素的效果探究

小麦经粒径分选和重力分选后,得到不同千粒重的样品,应用超高液相色谱串联质谱法对分选后样品的DON毒素含量进行分析.结果表明：30个样品的DON含量之间差异显著（P＜0.001）;在同一粒径区间,小麦的DON含量与千粒重呈显著负相关,在2.2～2.4、2.4～2.6、3.0～3.2和＞3.2 mm粒径区间,小麦DON含量随千粒重的增加呈线性函数减少;在2.6～2.8和2.8～3.0mm粒径区间,小麦DON含量随千粒重的增加呈幂函数减少.去除13.03％废弃物和DON含量较高的颗粒,得到的86.97％小麦中DON总量低于原样68.94％.

氨基酸态氮对禾谷镰刀菌生长及DON毒素产生的影响

为阐明土壤不同氮素形态尤其是有机氮形态与土壤有害生物种群发生、发展的关系,以禾谷镰刀菌供试菌株,初步研究了5种氨基酸态氮对其生长及DON毒素产生的影响。结果表明:0.20%氮源添加量下的100 ml液体培养基中,各培养基中菌丝干质量差异显著,培养基中菌丝干质量从大到小的顺序为赖氨酸培养基(1.27 g)>硝酸钠培养基(0.88 g)>谷氨酸培养基(0.84 g)>酪氨酸培养基(0.52 g)>缬氨酸培养基(0.45 g)>蛋氨酸培养基(0.36 g)。赖氨酸培养基发酵液中DON毒素含量最高,达到2951μg/L,其他不同氮源培养基发酵液中DON毒素含量大小顺序为酪氨酸(1418μg/L)>谷氨酸(240μg/L)>硝酸钠(224μg/L)>缬氨酸(214μg/L)>蛋氨酸(50μg/L),毒素含量与氮源添加量呈正相关关系。生物测定结果显示,赖氨酸液体培养基发酵液的抑制效果最为明显,种子萌发抑制率、胚根抑制率、胚芽抑制率分别达到了63.0%、60.9%、63.0%,其次为酪氨酸(41.0%、34.4%、34.8%)、谷氨酸(26.0%、18.8%、23.9%)、硝酸钠(25.0%、15.6%、21.7%)、缬氨酸(25.0%、14.1%、21.7%)和蛋氨酸(7.0%、9.4%、17.4%)。对比5种氨基酸,当赖氨酸作为唯一氮源时,对禾谷镰刀菌的生长和产毒作用显著,可提高病原菌的侵染、定殖寄主植物的能力,从而诱导茎腐病的发生。

氰烯·戊唑醇不同用药时间和次数对小麦赤霉病及DON毒素的管控效果

扬花初期是防控小麦赤霉病的最佳时期,为了探索错过扬花初期用药补防对小麦赤霉病和毒素的管控效果,本试验选择姜堰地区存在的13个小麦品种,用48%氰烯·戊唑醇SC进行赤霉病防控,通过扬花初期漏防6天后补防1次和扬花初期用药1次、扬花初期用药2次3种方式,对各品种小麦赤霉病防效和DON毒素控减效果进行比较。结果表明:错过扬花初期6天后用48%氰烯·戊唑醇补防1次,对各品种赤霉病的平均病穗率和病指防效、DON毒素控减效果比扬花初期防治1次分别低15.87%、21.25%、35.48%,比扬花初期用药2次分别低39.79%、44.87%、66.84%。赤霉病最适首次防治时间是扬花初期,扬花初期漏防6天后补防1次,对赤霉病和DON毒素的管控效果较差,坚持扬花初期+6天后两次用药效果最好,在各个品种中该趋势表现一致。

不同组合用药处理对小麦赤霉病及DON毒素影响

通过不同杀菌剂组合对小麦赤霉病防治效果、小麦产量及DON毒素控制效果的试验研究,明确不同杀菌剂组合在小麦赤霉病与毒素控制中的价值。结果表明,在小麦扬花初期使用200 g/L氟唑菌酰羟胺SC 60 mL+25%丙环唑SC 40 mL,8 d后又使用200 g/L氟唑菌酰羟胺SC 60 mL+25%丙环唑SC 40 mL的处理和扬花初期使用200 g/L氟唑菌酰羟胺SC 50 mL+25%丙环唑SC 32.5 mL,8 d后再使用48%氰烯菌酯·戊唑醇SC 50 mL的处理对小麦赤霉病及DON毒素的总体控制效果良好,2个处理对赤霉病的防效分别为94.59%、93.76%,对DON毒素的控制效果分别为91.76%、94.41%.,并对小麦都有一定的增产效果,小麦容重增幅达4.57%、3.74%,千粒重增幅为18.41%、16.14%,单位面积产量增幅为38.61%、33.09%。综合抗药性治理和科学用药等因素分析,在小麦抽穗扬花初期先使用200 g/L氟唑菌酰羟胺SC 50 mL+25%丙环唑SC 32.5 mL,8 d后再使用48%氰烯菌酯·戊唑醇SC 50 mL配方是有效控制小麦赤霉病、降低DON毒素的良好用药方式,保障小麦产量和质量安全。

家禽饲料中主要霉菌毒素含量与家禽肉、内脏、鸡蛋霉菌毒素含量的相关性分析

试验旨在研究家禽饲料中的主要霉菌毒素与家禽肉、内脏和鸡蛋霉菌毒素含量的相关性。本试验对山东省各地市分别取有代表性的16个肉鸡养殖场(每场采集饲料1份和3只肉鸡的胸肉、腿肉、心脏、肝脏)和14个蛋鸡养殖场(每场采集4枚鸡蛋和1份饲料)进行霉菌毒素检测。结果表明:肉鸡配合饲料中黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤酶烯酮(ZEN)和脱氧血腐镰刀菌烯醇(DON)的检出率分别为93.75%、100%和87.5%,1份AFB1超标饲料中含量为15.02μg/kg时,肉鸡肝脏中AFB1毒素残留量仅为0.012μg/kg。肉鸡饲料中ZEN为502、558、672.5μg/kg时,肝脏ZEN含量分别为0.25、0.354、0.405μg/kg,在其他组织中未发现ZEN毒素残留。肉鸡饲料AFB1、ZEN和DON不超标,肌肉和脏器中没有检出AFB1、ZEN和DON。蛋鸡配合饲料AFB1、ZEN和DON的检出率分别为100%、100%和93.75%,且含量均低于限量标准,3种毒素在鸡蛋中均未检出。饲料中AFB1、ZEN和DON含量低于限量标准时,在肌肉、脏器和鸡蛋中未能检出。饲料中AFB1、ZEN含量高于限量标准,肝脏可检出AFB1、ZEN。肝脏是毒素的主要存留器官,肝脏ZEN含量与饲料中ZEN含量呈显著相关性(R2=0.8558)。由以上结果可知,肉鸡饲料AFB1、ZEN含量超标,肝脏可检出相关毒素,其他脏器未检出;肝脏ZEN含量与饲料中ZEN含量呈显著相关性;饲料中AFB1、ZEN和DON含量低于限量标准时,3种毒素在肌肉、脏器和鸡蛋中未能检出。

禾谷镰刀菌DON毒素生物合成调控研究进展

禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)是农作物赤霉病的主要病原真菌,其产生的真菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)广泛分布于小麦、玉米及其制品中,影响食品的安全性。从物理因素、化学因素及生物因素等方面对禾谷镰刀菌DON毒素的生物合成调控机理和研究进展进行综述,为禾谷镰刀菌DON毒素的防控提供参考。

小麦赤霉病穗组织中黄色镰刀菌和DON毒素的定量分析

为阐明小麦赤霉病穗组织中黄色镰刀菌Fusarium culmorum(简称Fc)与毒素产生之间的关系,分别用TaqMan探针实时定量PCR和ELISA法,对接种4天后的17个小麦品系穗组织中的FcDNA和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)含量进行了测定。在Fc DNA定量检测中,TaqMan探针实时PCR技术具有高度的稳定性和可重复性。不同小麦品系的Fc DNA含量差异显著,感病品种比抗病品种高100倍左右;DON含量也不相同,Fc生物量的增加伴随着DON产量的提高,两者之间存在对数关系(y=19758lnx-111230)。菌量较低时,DON含量相对较大;而菌量较高时,DON含量相对偏低。

降解多种真菌毒素的芽孢杆菌的筛选鉴定及其发酵饲料应用

粮食作物在生长及其收获储存过程中,极易被有害真菌感染导致存在黄曲霉毒素(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、呕吐毒素(DON)这3种真菌毒素污染,严重危害人和动物的健康。研究旨在筛选一种可以同时降解饲料原料中这3种真菌毒素的菌株,首次使用亚甲基蓝褪色作为降解真菌毒素筛选方法,再以过氧化物酶复筛最终获得一株蜡样芽孢杆菌BL-17,该菌株对AFB1、ZEN、DON 3种毒素同时存在的降解率分别达74.38%、98.31%和39.66%。后续将BL-17与两株乳酸菌混合对饲料原料进行发酵,在有氧条件下大幅度降解了饲料中这3种有毒物质,对AFB1、ZEN和DON的降解率分别高达86.72%、100%和43.19%。菌株BL-17不仅提高了发酵饲料的安全性,同时也可增加对非常规饲料原料的利用,具有很好的应用前景。

Aflatoxin B1, zearalenone and deoxynivalenol in feed ingredients and complete feed from different Province in China

Background： The current study was carried out to provide a reference for monitory of aflatoxin B_1（AFB_1）,zearalenone（ZEN） and deoxynivalenol（DON） contamination in feed ingredients and complete feeds were collected from different Province in China from 2013 to 2015.Methods： A total of 443 feed ingredients, including 220 corn, 24 wheat, 24 domestic distillers dried grains with soluble（DDGS）, 55 bran, 20 wheat shorts and red dog, 37 imported DDGS, 34 corn germ meal and 29 soybean meal as well as 127 complete feeds including 25 pig complete feed（powder）, 90 pig complete feed（pellet）, six duck complete feed and six cattle complete feed were randomly collected from different Province in China,respectively, by high-performance chromatography in combined with UV or fluorescence analysis.Results： The incidence rates of AFB_1, ZEN and DON contamination of feed ingredients and complete feeds were80.8, 92.3 and 93.9 %, respectively. The percentage of positive samples for DON ranged from 66.7 to 100 %.Domestic DDGS and imported DDGS presented the most serious contamination AFB_1, ZEN and DON contamination levels of feeds ranged from 61.5 to 100 %, indicated that serious contamination over the studied 3-year period.Conclusion： The current data provide clear evidence that AFB_1, ZEN and DON contamination of feed ingredients and complete feeds in different Province in China is serious and differs over past 3-year. The use of corn, domestic DDGS, imported DDGS and corn germ meal, which may be contaminated with these three mycotoxins, as animal feed may triggered a health risk for animal. Feeds are most contaminated with DON followed by ZEN and AFB_1.Mycotoxins contamination in feed ingredients and complete feeds should be monitored routinely in China.

2022年中国饲料和原料中霉菌毒素污染调查报告

随机抽取了国内16个省市使用的玉米、玉米副产物、小麦及麸皮、杂粕和全价饲料等1160个饲料原料及配合饲料样品,并采用免疫亲和柱-高效液相色谱法测定了样品中黄曲霉毒素(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)的含量,以了解中国饲料原料和配合饲料中霉菌毒素污染情况。结果表明:玉米、玉米副产物(玉米DDGS、玉米胚芽粕、玉米蛋白粉、玉米皮等)、小麦及麸皮、杂粕(棉籽粕、棕榈粕、菜籽粕、花生粕、葵花籽粕等)和全价料(乳猪料、保育料、仔猪料、中大猪料、母猪料、肉鸡料、肉鸭料、蛋鸡料和蛋鸭料等)中AFB1检出率分别为98.22%、100.00%、100.00%、98.84%和94.24%,超标率分别为12.81%、5.00%、8.07%、20.93%和11.82%;ZEN的检出率分别为93.24%、100.00%、100.00%、95.35%和100.00%,超标率分别达到9.25%、22.50%、14.35%、5.81%和18.18%;DON的检出率分别为97.15%、100.00%、100.00%、88.23%和100.00%,超标率分别达到6.05%、17.50%、17.49%、0和28.18%。综上所述,玉米副产物及全价料中ZEN和DON污染均比较严重,应是霉菌毒素污染防控的主要关注对象。

解“毒”呕吐毒素

呕吐毒素是镰刀菌群侵染谷物后产生的一种天然毒素,严重威胁粮食安全、食品安全和人类健康。本文借用拟人的手法,介绍了呕吐毒素的发现研究史、家族(单端孢霉烯族化合物)及典型成员、生物脱毒前沿研究,让读者以生动活泼的方式了解这种危险的毒素,尤其是对高等农业和医学类院校的师生有很好的参考价值。