结合网络药理学和分子对接探讨小儿消积止咳口服液治疗支原体肺炎的物质基础和潜在机制

目的用网络药理学和分子对接的分析方法,探讨小儿消积止咳口服液治疗小儿支原体肺炎的功效网络与作用机制。方法通过化学成分分析文献,获取小儿消积止咳口服液的主要有效成分,通过SwissTargetPrediction数据库预测活性成分的潜在靶点。支原体肺炎相关靶点来自GeneCards和Disgenet数据库。筛选出疾病和成分的交集靶点,通过STRING和Cytoscape软件分析了共享靶点之间的蛋白质相互作用关系。利用DAVID数据库进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体论(GO)功能富集分析。通过分子对接技术,评估活性成分与核心靶点的结合活性。结果共筛选得到小儿消积止咳口服液活性成分101个和813个成分的靶点,与306个支原体肺炎相关的靶点取交集,得到67个靶点。GO富集分析显示,相关靶点参与细胞凋亡、炎症、外来刺激等生物学过程发挥作用。KEGG富集分析显示,小儿消积止咳口服液治疗支原体肺炎的机制可能与肿瘤坏死因子(TNF)、磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)、乙型肝炎、细胞凋亡等信号通路有关。通过蛋白质相互作用(PPI)网络筛选出8个核心靶点,其中,小儿消积止咳口服液活性成分对TNF、环加氧酶2(PTGS2)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的结合能力最强。结论小儿消积止咳口服液治疗支原体肺炎具有多成分、多靶点、多通路的特点,其作用机制复杂,可能主要通过抑制炎症反应发挥作用。

东贝止咳液止咳、祛痰、平喘作用研究

【目的】观察东贝止咳液的止咳、祛痰、平喘作用。【方法】将实验动物随机分为5组,即模型对照组,东贝止咳液高、中、低剂量组和阳性对照组;采用氨水引咳法观察中药对小鼠的镇咳作用;采用枸橼酸引咳法观察中药对豚鼠的镇咳作用;采用酚红祛痰法观察中药对大、小鼠的祛痰作用;采用药物引喘法观察中药对豚鼠的平喘作用。【结果】东贝止咳液可增加引起半数小鼠咳嗽所需时间(tED50),其中中剂量组p(tED50,给药组/tED50,model)>130%,并可减少豚鼠的咳嗽次数;高、中剂量组可使大、小鼠酚红排出量增加,豚鼠的引喘潜伏期延长。【结论】东贝止咳液具有一定的止咳、祛痰、平喘作用。

清热止咳口服液质量标准及药效学研究

[目的]建立清热止咳口服液的定性、定量测定方法,并建立质量标准。对清热止咳口服液进行药效学观察。[方法]采用薄层色谱法（TLC）对处方中瓜蒌皮、苦杏仁进行薄层鉴别;采用高效液相色谱法（HPLC）对处方中前胡中的白花前胡甲素、白花前胡乙素同时进行含量测定。采用氨水引咳法观察小鼠的咳嗽潜伏期和咳嗽次数。[结果]清热止咳口服液中瓜蒌皮、苦杏仁薄层色谱鉴别特征明显,专属性强;白花前胡甲素、白花前胡乙素分别在10.2～102.00 mg/L,3.96～39.60 mg/L范围内,呈良好的线性关系。白花前胡甲素、白花前胡乙素平均回收率分别为98.94%（RSD 1.39%）、99.74%（RSD 1.75%）。清热止咳口服液可以明显延长浓氨水引起的咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数（P〈0.05）。[结论]该质量控制方法简便、准确、专属性强、重现性好,可用于清热止咳口服液质量控制。清热止咳口服液具有显著的止咳作用。

基于“肺与大肠相表里”的小儿消积止咳口服液功效网络分析与作用机制探讨

目的运用网络药理学的分析方法,探讨小儿消积止咳口服液(Pediatric Xiaoji Zhike Oral Liquid,PXZOL)治疗小儿食积咳嗽的功效网络与作用机制。方法通过Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform(TCMSP)、Traditional Chinese Medicine Information Database(TCM-ID)等数据库并结合文献,分别搜集PXZOL中药味的主要成分及其作用靶点。利用Comparative Toxicogenomics Database(CTD)、PubMed、Drugbank等数据库并结合文献搜集功能性便秘相关靶点。通过Cytoscape 3.6.0软件构建PXZOL的药味-成分-靶点网络和药物-靶点-疾病的蛋白相互作用(protein-protein interaction network,PPI)网络。通过对PPI网络中靶点进行筛选,构建核心靶点网络。运用ClueGO插件对核心靶点网络进行Gene Ontology(GO)分析和Pathway分析。利用BioGPS数据库对核心靶点进行器官定位。结果GO分析结果显示,PXZOL发挥止咳作用主要是通过调节核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)信号传导来实现。而发挥消积作用主要是通过相关蛋白质的合成和调节对刺激反应来实现。Pathway分析结果显示,PXZOL发挥止咳作用主要通过丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase,MAPK)信号通路、视黄酸(维甲酸)诱导基因蛋白Ⅰ(retinoic acid-inducible gene-Ⅰ,RIG-Ⅰ)样受体信号通路、白细胞介素17(interleukin 17,IL17)信号通路、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TNF receptor associated factor 6,TRAF6)介导NF-κB激活等通路。发挥消积作用主要通过多种免疫和炎症信号传导通路来实现。器官定位方面,止咳作用靶点、消积作用靶点以及其共同靶点均有近50%靶点在肺和大肠上有较多表达。结论PXZOL是基于中医"肺与大肠相表里"的理论而组方潜药,现代药理学研究表明发挥"消积止咳"作用多集中在免疫和炎症方面,网络药理学研究发现止咳和消积的作用靶点以及其共同靶点在肺和大肠上有较多表达的数量近50%,从主治疾病和作用网络上提示,PXZOL的疗效发挥是通过黏膜免疫与炎症介导路径来体现中医"肺与大肠相表里"理论的科学性,也为后续在小儿食积咳嗽模型和临床进一步深入研究和验证奠定基础。