应用荧光原位杂交技术产前诊断Down综合征

目的：应用荧光原位杂交（fluorescent in situ hybridization,FISH）技术对Down综合征进行产前诊断.方法：收集产前筛查中染色体异常的高危孕妇（孕8～10周或孕16～20周） 绒毛或羊水间期细胞或染色体标本各20例,应用21号染色体特异性DNA探针对间期和中期细胞进行FISH检测,同时通过脐血淋巴细胞和外周血淋巴细胞及流产后绒毛细胞染色体的检测分析以证实产前诊断准确性.结果：全部标本杂交成功,信号强,背景低.经FISH检测的总共40例绒毛和羊水细胞中,发现21三体综合征3例,其中羊水细胞2例,绒毛细胞1例,所有产前诊断结果与追踪检查结果一致.结论：FISH技术简便、快速、特异性强、易掌握,适用于染色体异常的快速产前诊断.

Down综合征对先天性心脏病外科治疗的影响

目的：评估Down综合征对先天性心脏病手术治疗的影响。方法：回顾性分析于2004年至2009年行心脏手术治疗的35例合并先天性心脏病的Down综合征患儿的临床资料，总结此类患儿的手术死亡率、并发症和随访结果。结果：所有患儿均接受一期手术修复。术后早期死亡1例（2．9％）；低心排出量综合征2例（5．7％）；肺部并发症15例（42．9％）。术后早期Ⅲ°房室传导阻滞4例（11．4％）。对30例随访10个月-6年[（3．8±1．1）年]，无远期死亡和再次手术病例，存活者心功能为NYHAI或Ⅱ级。结论：Down综合征增加了先天．陛心脏病手术的早期风险陛，但不增加死亡率，术后中期生存状态良好。

红细胞压积对干血片法Down综合征产前筛查结果的影响

目的探讨红细胞压积变化对干血片法Down综合征产前筛查结果的影响。方法用同一份全血,通过改变血浆与红细胞比例,制备一系列不同红细胞压积的全血标本并进行甲胎蛋白(AFP)及人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)检测,计算全血浓度/血浆浓度值并与血浆体积/全血体积值比较,分析AFP及β-hCG在血浆和红细胞中的分布情况;通过制备不同红细胞压积的标准全血和滤纸干血片,分析红细胞压积对AFP及β-hCG浓度的影响;根据红细胞压积不同将1 155例孕妇分为三组,对各组滤纸干血片中AFP及β-hCG的浓度进行比较;对1 320例孕妇同时进行血清和滤纸干血片Down综合征筛查,比较筛查结果。结果不同红细胞压积的全血标本中,AFP及β-hCG全血浓度/血浆浓度值与血浆体积/全血体积值无统计学差异,即AFP及β-hCG在红细胞中无分布;不同红细胞压积的滤纸干血片标本中AFP及β-hCG浓度值无统计学差异,而全血标本中AFP及β-hCG浓度值随着红细胞压积的变化而变化。1 320例孕妇滤纸干血片法Down综合征产前筛查结果与血清法符合率为98.6%。结论红细胞压积对Down综合征滤纸干血片产前筛查结果无明显影响,滤纸干血片标本可以替代血清标本。

产前行妊娠相关血浆蛋白A筛查联合FISH诊断Down综合征

目的 :应用单项妊娠相关血浆蛋白A(PAPP A)筛查与羊水间期荧光原位杂交 (FISH)产前诊断相结合预防妊娠Down综合征胎儿。方法 :采用酶联免疫方法 (ELISA)对孕周分别为 6～ 2 7周的 1839例孕妇进行母血PAPP A单项筛查 ,以低于同一孕周的中位数时视为可能妊娠Down综合征胎儿的高风险孕妇。取高风险孕妇羊水细胞直接进行间期FISH产前诊断并同时用部分羊水细胞遗传学检查作对照。结果 :检出 1例孕 7周孕妇其PAPP A值为 0 0 5 1U/L ,低于同一孕周中位数 2 0多倍。羊水细胞间期FISH结果显示 ,含 5个杂交信号的核占所有杂交核的 38 5 % ,与细胞遗传学分析的 2 1三体核型完全一致。结论 :单项PAPP A筛查与羊水间期细胞FISH相结合是早期防治妊娠Down综合征有效可行的方法。

用DSCR Cosm id DNA探针产前基因诊断Down综合征

Ｄｏｗｎ综合征是一种最常见的染色体病，由于２１三体或易位引起２１ｑ２２－ｔｅｒ部分三体所致。目前临床采用常规染色体显带分析虽可对绝大多数孕妇做出产前诊断，但所需时间长，并且对微小及复杂的畸变不易做出准确诊断。８０年代后期建立的荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）...

MTHFR基因C677T多态性与Down综合征发生的相关研究

目的研究亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性与Down综合征关系。方法采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法对32例DS患儿母亲,70例未生育DS患儿女性MTHFR的C677T进行基因分析。比较上述各组基因型和等位基因频率分布有无差异。结果MTHFR基因C677T突变型等位基因(T)频率在实验组和对照组中有显著性差异,CC、TT基因型频率分布差异有显著性(P<0.05)。CT基因型比CC基因型生育DS患儿风险高2.84倍,TT基因型比CC基因型生育DS患儿风险高9.26倍。结论MTHFRC677T基因多态性与Down综合征发生相关,TT基因型增加了Down综合征的发生风险,CC基因型是降低Down综合征发生的保护性因素。

孕早期妇女血清学与超声学联合筛查Down综合征

目的 探讨孕早期妇女血清学与超声学联合应用于Down综合征产前筛查的可行性。方法 ELISA方法检测妊娠8～14w1128例妇女血清中妊娠相关蛋白A（PAPP-A）、游离β-hCG（f-β-hCG）水平；超声测量妊娠10～14w胎儿颈项透明厚度（NT）；结合孕妇年龄、体重，预测Down综合征疾病的风险，并随访其妊娠结局。结果 在筛查的1128例早孕妇女中，84例为Down综合征高风险，染色体核型确诊1例Down综合征。随访1025例，22例为异常妊娠结局，19例稽留流产，2例胎死宫内，1例为先天性心脏病。结论 检测孕妇血清中PAPP-A、f-β-hCG含量和超声测量NT应用于筛查Down综合征，可以降低缺陷儿的出生，适合大范围的产前筛查。

Down综合征产前筛查新方法的原理与应用──孕妇血清标记物孕中期AFP、HCG、UE3与孕早期二聚体抑制素A产前筛查Down综合征的原理、方法及评价

Ｄｏｗｎ综合征产前筛查新方法的原理与应用──孕妇血清标记物孕中期ＡＦＰ、ＨＣＧ、ＵＥ３与孕早期二聚体抑制素Ａ产前筛查Ｄｏｗｎ综合征的原理、方法及评价苏州医学院医学遗传研究室（２１５００７）高锦声，姜海燕，董秋明，李以明，郭，汪琦美国阿拉巴马大学伯明翰...

应用FQ-PCR方法快速产前诊断Down综合征

目的为探讨FQ-PCR方法快速、准确的应用于产前诊断Down综合征。方法分别提取46例外周血(包括16例确诊为Down综合征患儿和30例正常对照)和40例唐氏筛查高风险羊水细胞基因组DNA,FQ-PCR方法扩增基因D21S11、S100β(位于21号染色体)及基因UFD1L(位于22号染色体)。结果正常人羊水基因定量R1(D21S11/UFD1L)=1.095±0.213,R2(S100β/UFD1L)=1.087±0.146,Down综合征R1、R2分别为1.597±0.156、1.604±0.235,经t检验两组差异都有统计学意义。结论该方法无须细胞培养、操作简单,是一种快速准确产前诊断Down综合征的良好方法。

应用同源基因定量PCR方法快速检测Down综合征

本文设计一对引物 ,用聚合酶链反应同时扩增位于 2 1号染色体的人肝型磷酸果糖激酶基因 (PFKL -CH2 1)以及与其高度同源的位于 1号染色体上人肌型磷酸果糖激酶基因 (PFKM -CH1) ,然后同光密度扫描进行定量比较分析 ,结果显示 ,在 31例正常人这两个同源基因的扩增产量比值 0 .939± 0 .16 1;而 16例Down综合征患者的比值约为 1.5 89± 0 .16 4,两组相比有高度显著性差异 (P <0 .0 0 1) ,正常组与异常组的比值分布不存在重叠区 ,阴阳性结果易于判断 ,因此这种同源基因定量聚合酶联反应有可能发展成一种新的快速诊断Down综合征的方法。

应用分子生物学技术产前诊断Down综合征

目的 探讨应用PCR分子生物学方法产前诊断Down综合征 (Downsyndrome,DS)。方法 取产前诊断病例 :羊水 1 0 0例 ,绒毛 1 6例。提取DNA ,PCR扩增 2 1号染色体的 6个多态位点 ,电泳 ,膜转移 ,等位基因位点分析 ,诊断。结果 正常人为两种带型 :杂合型显示两条带 ,纯合型一条带。Down综合征患者为三种带型 :完全杂合型显示三条带 ,半杂合型两条带 (信号增强的 2 :1带 ) ,纯合型一条带。 1 0 0例羊水中 2例阳性 ,1 6例绒毛标本中 1例阳性 ,3例患者 ,至少有 2个位点检出三个等位基因 ,患者为 2个位点时 ,表现 2 :1带型 ;无一例正常检出三个等位基因。所有结果均与细胞染色体核型检查相符。结论 本分子生物学方法产前诊断DS简便、快速、可行 。

叶酸代谢异常与Down综合征的风险因素

Down综合征是最常见的常染色体数目异常疾病 ,由 2 1号染色体减数分裂时不分离造成。母亲年龄≥ 35岁是发生Down综合征患儿的主要风险因素 ,但大部分的 Down综合征患儿出生时其母亲 <35岁 ,因此应寻找更多的风险因素以提高诊断水平。叶酸是人体必需的水溶性维生素之一 ,其活性形式四氢叶酸构成一碳单位转移酶的辅酶 ,影响 DNA的合成和DNA的甲基化。影响叶酸代谢的亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)、甲硫氨酸合成酶 (MS)、甲硫氨酸合成酶还原酶 (MSR)和β-胱硫醚合成酶 (CBS)等基因的多态性可能是 DNA低甲基化造成染色体不分离的风险因素 ,遗传 (基因 )和环境 (营养 )两方面的因素均可导致染色体不分离而产生 2

叶酸代谢异常与Down综合征发生研究进展

Down综合征是最常见的常染色体疾病,主要原因是21号染色体在减数分裂时发生不分离。妊娠妇女的年龄≥35岁是发生Down综合征患儿的主要因素。但目前研究表明叶酸代谢异常是另一个危险因素。叶酸是一种人体必需的维生素。在DNA合成、甲基化中起很重要的作用,影响叶酸代谢的亚甲基四氢叶酸还原酶(MTFHR)、甲硫氨酸合成酶(MTR)、甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)、胱硫醚-β-合成酶(CBS)等的基因多肽性可能是导致DNA甲基化异常从而导致染色体不分离的重要危险因素。

妊娠早期筛查Down综合征胎儿颈部半透明组织厚度的作用

Down综合征一直是产前遗传筛查的重点,其产前诊断必须依靠侵入性诊断。20世纪80年代中期后欧美等国逐渐将孕母血清学及超声标记用于Down综合征胎儿诊断前筛查,胎儿颈部半透明组织厚度(NT)是重要的超声标记,国外学者对其进行大量研究。复习妊娠早期筛查Down综合征胎儿NT的作用认为,在建立良好的质控并结合考虑妊娠周、妊娠年龄基础上,NT将成为妊娠早期有效、必选的Down综合征筛查标记。

Down综合征的产前诊断研究进展

系统介绍Down综合征的产前筛查及产前诊断研究进展。产前筛查包括妊娠妇女年龄筛查、血清标记物筛查、尿标记物筛查以及超声筛查相互弥补,大大提高阳性检出率,降低假阳性及假阴性率。产前诊断标本由传统的羊水、绒毛到胎血、胎儿有核红细胞、胚外体腔细胞及受精卵细胞或囊胚细胞;产前诊断技术传统细胞遗传学与现代分子遗传学相结合,使得产前诊断时间范围更宽,诊断结果更为准确、可靠。

Down综合征产前筛查的研究进展

Down综合征(DS)的产前筛查方法较多,目前临床主要采用母血清标记物和遗传学超声标记物进行筛查。母血清标记物主要有PAPP-A、AFP、INH-A、μE3、β-hCG等,遗传学超声标记物主要有双顶径测量、头臀径测量、胫骨长度测量、尺骨长度测量、肠回声增强等。单项标记物应用筛查率较低,而多项标记物联合应用则可以提高筛查率。本文就近年来DS筛查方法的研究进展及其临床应用进行了综述。

荧光原位杂交技术在Down综合征基因诊断中的应用

本文对10例正常人和46例Down综合征患者外周血,12例正常绒毛(孕6～11周)及8例羊水细胞(孕16～20周)分别进行常规细胞培养G显带核型分析,应用地高辛标记的21号染色体特异性 DSCR Cosmid DNA探针对外周血、未经培养的绒毛及羊水细胞进行原位杂交,探讨该技术对Down综合征进行临床及产前诊断的应用价值。结果,外周血和绒毛细胞的杂交率达89％以上,羊水细胞杂交率较低(平均21％),FISH分析与常规G显带结果一致。提示应用荧光原杂交技术可在24 小时内对Down综合征做出快速而准确的临床及产前基因诊断。