非洲猪瘟病毒DP71L蛋白原核表达及其多克隆抗体制备

为深入研究非洲猪瘟病毒(ASFV)DP71L蛋白的生物学功能,根据非洲猪瘟病毒ASFVCN/GS/2018DP71L基因序列设计特异性引物,通过扩增DP71L基因并克隆到原核表达载体pET28a(+)后转入大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,通过SDS-PAGE、Western-blot进行鉴定,并以纯化出的重组DP71L蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,间接ELISA测定多克隆抗体效价,Western-blot鉴定多克隆抗体的特异性。结果显示,重组DP71L蛋白以可溶物和包涵体两种形式表达;间接ELISA测得多克隆抗体血清效价为1∶64000;Western-blot结果显示,该抗体能特异性识别DP71L蛋白。结论:成功地表达了DP71L重组蛋白,制备了多克隆抗体,为深入研究DP71L蛋白生物学功能奠定了基础。