VEGF、MMP-7、MMP-9、DPEP1在结肠癌并发肾功能障碍中的检测意义

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)、MMP-9及二肽酶1(DPEP1)在结肠癌并发肾功能障碍中的检测意义。方法选择60例结肠癌患者为研究对象,应用免疫组化SP法检测其癌组织及癌旁组织中VEGF、MMP-7、MMP-9及DPEP1阳性率,另选取同期接受体格检查的60例健康个体为对照组,对比3组患者VEGF、MMP-7、MMP-9及DPEP1阳性率差异,分析上述因子与结肠癌病理学指标的关系,将60例结肠癌患者按照是否存在肾功能障碍区分为障碍组(21例)和非障碍组(39例),对比两组患者上述因子阳性率差异。结果癌组织中VEGF、MMP-7、MMP-9及DPEP1阳性率高于癌旁组织(P<0.05),癌旁组织上述因子阳性率高于对照组(P<0.05);中低分化、淋巴结转移、临床晚期结肠癌患者VEGF、MMP-7、MMP-9及DPEP1阳性率明显升高(P<0.05);存在肾功能障碍的结肠癌患者VEGF、MMP-7、MMP-9及DPEP1阳性率明显高于非障碍患者(P<0.05)。结论VEGF、MMP-7、MMP-9及DPEP1在检测结肠癌病情中具有一定应用价值,其水平与结肠癌分化程度、组织浸润深度、淋巴结转移有关,同时并发肾功能障碍患者上述因子阳性率明显上升,可通过对上述因子的监测来调整治疗方案。

DPEP1基因过表达BT549细胞株的建立和鉴定

目的探讨二肽酶1(dehydropeptidase-1,DPEP1)基因表达载体的构建及DPEP1蛋白在肿瘤细胞中的过表达情况及其影响。方法将DPEP1全长基因PCR扩增,EcoR Ⅴ和Nhe Ⅰ双酶切后克隆入带有同样双酶切pcDNA5/FRT/TO表达载体,并获取pcDNA5/FRT/T0/DPEP1,筛选阳性克隆,Sanger测序确证。扩增pcDNA5/FRT/T0/DPEP1质粒并将其转染入BT549细胞系,获得DPEP1过表达,借助Western blot、CCK-8等实验技术分析其表达及影响作用。结果成功构建了DPEP1的过表达载体,转染肿瘤细胞株,并获得DPEP1过表达蛋白,目的蛋白表达明显升高,其过表达的条带灰度约为阴性对照的20倍。结论研究的成功实施为将来阐明DPEP1基因在肿瘤中的作用及机制奠定了实验基础。

肾二肽酶基因mRNA在左右半结肠腺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究肾二肽酶基因(Dipeptidase 1,DPEP1)mRNA在左右半结肠癌组织中的表达及其临床意义。方法选取接受结肠癌切除术的腺癌患者80例,以结肠脾曲为界,分为右半结肠癌(right-sided colon cancer,RSCC)和左半结肠癌(left-sided colon cancer,LSCC)组。收集每个患者的肿瘤和自身正常结肠组织标本80对,使用RT-q PCR技术分析DPEP1 mRNA在两组中的表达并分析其临床意义。结果 DPEP1 mRNA在肿瘤组织中表达显著高于正常组织(P<0.001);DPEP1 mRNA在LSCC中的表达显著高于RSCC(P表达指数=0.018);DPEP1 mRNA高表达病人更多见于LSCC(P=0.025);高表达者低分化病人的比例显著高于高分化病人(P=0.009);高表达病人癌相关死亡率显著高于低表达者(P=0.010);DPEP1 mRNA与肿瘤浸润深度T4临界显著相关(P=0.051)。LSCC中DPEP1 mRNA低表达者的中位生存显著优于高表达者(62.8 mo vs.42.0 mo,P=0.010),RSCC高和低表达者之间生存无显著差异(P=0.159)。多因素分析显示,T4侵犯和脉管癌栓是RSCC的独立不良预后因子,T4侵犯、淋巴结转移和脉管癌栓是LSCC的独立不良预后因子,DPEP1高表达与LSCC病人不良预后临界显著相关(P=0.052)。结论 DPEP1 mRNA在LSCC的表达显著高于RSCC,且对两者具有不同的预后意义,其高表达仅对LSCC具有不良预后影响。