牡蛎DPP-Ⅳ抑制肽的结构特征及其协同花色苷的活性增效作用研究

为探讨牡蛎肽对二肽基肽酶Ⅳ(dipeptidyl peptidaseⅣ,DPP-Ⅳ)的抑制活性及其协同花色苷的增效作用,通过酶解法制备牡蛎肽,对其结构进行表征,采用体外DPP-Ⅳ活性抑制模型与Compusyn协同计算模型分析牡蛎DPP-Ⅳ抑制肽协同花色苷抑制DPP-Ⅳ活性的增效作用。结果表明:牡蛎肽的分子质量主要集中在3 kDa以下(55.44%),其氨基酸组成中支链氨基酸(branched chain amino acids,BCAAs)和脯氨酸(Pro)占疏水性氨基酸总量的60.84%;肽谱分析显示牡蛎肽中主要的17条肽段N端富含BCAAs和Pro,具有显著的DPP-Ⅳ抑制肽结构特征。筛选合成的5条肽(FPVGR、APPNIT、IAPPERK、LDFYLDIP、LAIL)中FPVGR的DPP-Ⅳ抑制活性最强(P<0.05);6种常见的花色苷:芍药色素/矢车菊素/锦葵色素/飞燕草素/天竺葵色素/矮牵牛色素-3-O-葡萄糖苷(Pn3G,C3G,Mv3G,D3G,Pg3G,Pt3G)中Pn3G、C3G和Mv3G的DPP-Ⅳ抑制活性最强(P<0.05);协同作用研究显示FPVGR与Pn3G/C3G/Mv3G均具有协同抑制DPP-Ⅳ的作用(当抑制率为50%时,CI值分别为0.89、0.93、0.89)。该研究为进一步开展DPP-Ⅳ抑制肽和花色苷的活性增效研究提供了科学依据。

DPP-Ⅳ抑制肽联合运动对2型糖尿病的改善

糖尿病已成为严重的全球性公共卫生问题,目前临床应用的大多数降血糖药物,都伴有一定副作用,严重影响患者的生活质量。因此,迫切需要关注延缓糖尿病及其并发症的非药物干预策略,如营养摄入和运动干预。采用DPP-Ⅳ抑制肽联合运动进行早期干预,可以延长运动产生的内源性GLP-1活性,是预防糖尿病和改善其治疗的理想选择。综述DPP-Ⅳ抑制肽、运动改善糖尿病机制,为评估联合治疗策略的基本机制提供依据。

具有DPP-Ⅳ抑制活性的酪蛋白糖肽分离纯化及其序列鉴定

采用牛乳酪蛋白糖巨肽制备酪蛋白糖肽,并分析其对二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl peptidase-Ⅳ, DPP-Ⅳ)活性的抑制作用,筛选DPP-Ⅳ抑制活性最强的酪蛋白糖肽,并进行分离鉴定。结果表明:(1)酪蛋白糖肽的DPP-Ⅳ抑制率最高达54.55±3.65%;(2)经葡聚糖凝胶G-25(Sephadex G-25)分离得到两个组分,其中F1组分具有较强的DPP-Ⅳ抑制活性,抑制率达63.27±3.24%;(3)进一步利用反相高效液相色谱及液相色谱串联质谱从F1组分中分离并鉴定得到3条DPP-Ⅳ抑制肽,肽序列分别为MAIPPKKNQDKT、PPKKNQDKTEIPTI、SPEVIESPPEIN。研究结果表明酪蛋白糖巨肽经酶解获得的酪蛋白糖肽具有DPP-Ⅳ抑制活性,具备作为降糖活性功能性配料开发的潜在性。

DPP-Ⅳ抑制剂联合胰岛素强化降糖治疗对胰岛修复的影响

目的:考察DPP-Ⅳ抑制剂联合胰岛素强化降糖治疗对胰岛修复的影响。方法:选取90例初诊2型糖尿病患者随机分为观察组和对照组,每组45例。观察组患者给予预混型胰岛素早、晚餐前皮下注射治疗,设定靶血糖值(fasting blood glucose,FBG)<6.1 mmol/L,2h PG<7.8 mmol/L,沙格列汀起始剂量5 mg/次,1次/d。对照组给予胰岛素早预混型胰岛素早、晚餐前皮下注射治疗,设定靶血糖值FBG<6.1 mmol/L,2h PG<7.8 mmol/L,安慰剂1次/d。比较两组患者血糖水平、血脂水平、糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,Hb A1C)、胰岛β细胞功能(HOMA-β)和胰岛素抵抗指数(HOMAIR)差异。结果:治疗前两组患者各指标差异无统计学意义(P>0.05),治疗12周后,观察组患者血糖水平显著低于对照组患者(t=1.756,t=2.369,P<0.05),血脂水平与对照组患者比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者治疗后HOMA-β显著高于对照组,且Hb A1C、HOMA-IR水平显著低于对照组(t=2.219,t=1.896,t=1.934,P<0.05)。结论:DPP-Ⅳ抑制剂联合胰岛素强化降糖治疗可以更好地修复胰岛功能。

海洋生物源DPP-Ⅳ抑制肽的制备和构效关系的研究进展

糖尿病是一种血糖水平慢性增高的代谢性疾病,对人类的生命健康产生严重影响。长期的高血糖症会导致肥胖、高血压等并发症的发生。目前临床用于治疗糖尿病的药物如西他列汀、利格列汀等存在毒副作用较大等问题,开发高效、安全的天然降血糖活性物质成为了当前的研究热点。二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl peptidase-Ⅳ,DPP-Ⅳ)抑制肽是一类通过抑制DPP-Ⅳ活性从而达到降血糖作用的生物活性肽。天然食物来源的DPP-Ⅳ抑制肽具有安全性高、毒副作用小、可长期服用等优点,可应用于降血糖功能性食品。海洋生物资源丰富,是制备DPP-Ⅳ抑制肽的重要来源。对国内外海洋生物蛋白源DPP-Ⅳ抑制肽的来源、分离纯化、结构鉴定和功能活性评价进行综述,并对下一步研发应用提出建议,旨在为开发DPP-Ⅳ抑制肽功能性食品提供参考。

羊乳清蛋白ACE及DPP-Ⅳ抑制肽的分离纯化与鉴定

使用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶对羊乳清蛋白进行水解,分别在不同时间取样,体外测定其ACE抑制活性和DPP-Ⅳ抑制活性。通过中空纤维膜超滤、凝胶过滤层析和反向高效液相色谱(RP-HPLC)的手段对酶解产物进行逐步分离和纯化,评价各级分离产物的生物活性;通过液质联用(LC-MS/MS)的方法鉴定多肽的氨基酸组成,根据质谱结果合成多肽。结果表明:中性蛋白酶水解物具有一定的生物活性,双重活性多肽Pro-Pro-Ala-Ser-Glu-Val-Val-Lys-Pro对ACE和DPP-Ⅳ均有抑制作用,其IC50值分别是573.32±4.63和2 065.35±22.30μmol/L。Ile-Pro-Ala-Val-Phe-Lys-Ile-Asp具有较好的DPP-Ⅳ抑制活性,其IC50值为964.14±4.09μmol/L。羊乳清蛋白水解物可以作为食源性材料用于管理伴有高血压的Ⅱ型糖尿病患者的饮食。

DPP-Ⅳ抑制剂特力利汀的合成工艺改进

目的合成DPP-Ⅳ抑制剂特力利汀并进行工艺优化。方法以N-Boc哌嗪、双乙烯酮为原料,经过缩合、环化和脱保护得到中间体1-(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)哌嗪;以反式-4-羟基-L-脯氨酸为原料,经过Fmoc保护、氧化、缩合反应得到中间体3-[(2S)-1-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-4-氧代吡咯烷-2-基羰基]噻唑烷;这两个中间体经还原胺化、脱保护基制得抗糖尿病药特力利汀,总收率为47.2%(以反式-4-羟基-L-脯氨酸计),纯度为99.1%(HPLC法)。结果与结论特力利汀的结构经MS、IR、1H-NM R和13C-NM R谱确证,所确定的合成路线原料廉价易得,反应条件温和,后处理简单,收率较高,为中试放大生产奠定了基础。

口服降糖药二肽基肽酶Ⅳ(DPP-4)抑制剂的多器官保护作用

二肽基肽酶Ⅳ(DPP-4)抑制剂是近年来新上市的一种新型口服降糖药物。DPP-4抑制剂通过抑制DPP-4来抑制胰岛素多肽(GIP)和胰高血糖素样肽1(GLP-1)降解,发挥降低血糖的作用。DPP-4抑制剂不仅能双向控制血糖,且具有降糖外的胰腺、心血管、肾脏、肝脏等多器官保护作用和抗炎作用。本文对已有的DPP-4抑制剂及其多器官保护作用进行综述,总结其优势及进一步发展的趋势,为临床用药提供参考。

胰高血糖素样肽-2和二肽基肽酶Ⅳ抑制剂联合使用对断奶仔猪肠上皮细胞的影响

本试验旨在研究不同浓度的胰高血糖素样肽-2(Glucagon-like peptide 2,GLP-2)和二肽基肽酶Ⅳ(Dipeptidyl peptidase-Ⅳ,DPP-Ⅳ)抑制剂联合使用对体外原代培养的28日龄断奶仔猪肠上皮细胞增殖、代谢及相关酶活力的影响,初步探讨提高GLP-2作用效果的方法。试验首先采用单因子试验设计探讨不同浓度DPP-Ⅳ抑制剂(KR62436)对断奶仔猪肠黏膜上皮细胞增殖及代谢的影响;然后采用2×3因子设计,考察添加不同浓度的GLP-2(1×10-10、1×10-9、1×10-8 mol·L-1)和KR62436(0和1×10-11 mol·L-1)对细胞增殖、代谢及凋亡的影响。结果发现,培养液中单独添加1×10-11 mol·L-1 KR62436,细胞数量、MTT OD值、细胞沉积蛋白量、细胞总蛋白量、胞外LDH、CK和Na+,K+-ATP酶活均无显著变化(P>0.05);当KR62436浓度升高到1×10-10 mol·L-1,细胞MTT OD值显著低于对照组(P<0.05),胞外LDH和CK活力显著高于对照组(P<0.05)。培养液中同时添加GLP-2和低剂量的KR62436,随着培养液中GLP-2浓度的增加,细胞数量、MTT OD值、细胞蛋白沉积量、细胞总蛋白含量和Na+,K+-ATP酶活力显著增加(P<0.05),胞外LDH、CK活力显著降低(P<0.05)。KR62436显著提高了GLP-2的作用效果。结果表明,低剂量KR62436对细胞生长的影响不显著,高剂量的KR62436对细胞的代谢和完整性有负面效应;但低剂量的KR62436能够促进GLP-2对细胞增殖、代谢和细胞完整性的作用效果。

基于药物设计的二肽基肽酶-Ⅳ抑制剂研究

DPP-Ⅳ(二肽基肽酶-Ⅳ)抑制剂是目前研究最广泛深入的一类抗糖尿病药物。梳理DPP-Ⅳ的蛋白结构和功能,分析各类型上市或临床DPP-Ⅳ抑制剂的设计思想及关键基团作用模式,为通过基于结构的药物设计获得新型选择性DPP-Ⅳ抑制剂提供参考。

二肽基肽酶Ⅳ抑制剂降糖外的靶器官效应研究进展

二肽基肽酶Ⅳ(DPP-4)抑制剂是近年来出现的一种新型降糖药物,因其双重降糖的机制且无低血糖、胃肠道反应少等副作用而备受青睐。目前国内外大量的动物实验及临床研究表明其不仅可以良好的控制血糖,还对其靶器官有益。本文就DPP-4抑制剂对除降糖外的靶器官效应进行综述,阐述这一类新型降糖药物的益处及不足。

特异性二肽基肽酶-Ⅳ抑制剂维达列汀的合成与合成工艺优化

目的对特异性二肽基肽酶-Ⅳ(DPP-Ⅳ)抑制剂维达列汀合成工艺方法进行探索及优化。方法通过文献调研,分析报道路线的优缺点,进而确定合成工艺路线。通过对限速步骤中的主要中间体设计正交实验或单因素实验,确定关键工艺参数。结果目标化合物与中间体的结构均经过1H NMR、MS谱确证,反应总收率为38.5%。结论该合成工艺路线具有原料便宜易得、操作简单、条件温和等优点,并通过优化结晶溶剂提高了收率,更适合工业化生产。

鲟鱼皮二肽基肽酶-Ⅳ抑制肽咀嚼片的制备工艺优化

针对市场上含有鲟鱼皮二肽基肽酶-Ⅳ(Dipeptidyl peptidase Ⅳ,DPP-Ⅳ)抑制肽咀嚼片的相关产品较少的问题,采用湿法造粒技术和模糊数学法分析方法及单因素实验、响应面试验及正交试验,对咀嚼片配方及制备工艺进行优化。结果表明:咀嚼片最优配方为肽粉添加量46.52%,木糖醇添加量23.94%,CMC-Na添加量7.88%,硬脂酸镁添加量7.00%,奶粉及微晶纤维素添加量分别为10%与4.66%;在转台速度20 r/min,充填深度11 mm,充填压力28 kN,原料粒度350目的制备条件下,制得的咀嚼片硬度适中,表面光滑且色泽均匀,模糊数学分析法综合得分为69.75分。本研究通过辅助加料配合湿法造粒技术,对鲟鱼皮DPP-Ⅳ抑制肽咀嚼片的配方及制备工艺进行优化,旨在为咀嚼片产品的制备提供理论支持。

DPP-4抑制剂对2型糖尿病患者肾脏的保护作用

目的:观察二肽基肽酶Ⅳ(DPP-4)抑制剂西格列汀对2型糖尿病患者肾脏保护作用。方法:选取本院2014年1-12月收治的2型糖尿病肾病患者48例作为研究对象,随机分为对照组24例、试验组24例。试验组于早餐前加服磷酸西格列汀100 mg,1次/d,对照组继续原治疗方案,根据空腹血糖调整药物剂量。分别于治疗前和试验后6个月末测定患者的体重指数(BMI)、平均动脉压(MAP)及糖化血红蛋白(Hb A1c)、早晨空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PBG)、肌酐(Scr)、胱抑素C(Cystatin C,Cys C)及尿白蛋白-肌酐比值(ACR)。结果:两组治疗前后BMI、MAP比较差异均无统计学意义,治疗后FBG、2 h PBG、Hb A1c、ACR及Cys C较治疗前均明显下降,且试验组的Hb A1c、Cys C、ACR较对照组下降更显著,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:二肽基肽酶Ⅳ(DPP-4)抑制剂是一类具有多种作用机制的新型降血糖药物,不仅可以有效控制2型糖尿病患者的血糖水平,还有一定程度的肾脏保护作用。

二肽基肽酶-Ⅳ抑制剂的最新研究进展

二肽基肽酶(DPP-Ⅳ)抑制剂是最新一代抗糖尿病药物,该文针对DPP-Ⅳ抑制剂的最新进展进行综述,主要介绍了它们的作用机制、研究进展和结构类型等。

二肽基肽酶-Ⅳ的制备及其抑制剂体外筛选模型的优化

目的从分化的Caco-2细胞中提取二肽基肽酶-Ⅳ(DPP-Ⅳ),并建立和优化分子水平DPP-Ⅳ抑制剂的通量筛选模型。方法诱导Caco-2细胞分化并高表达DPP-Ⅳ,提取DPP-Ⅳ,探索酶的存放时间对酶活性的影响;以甘氨酰脯氨酸对硝基苯胺(Gly-Pro-PNA)为底物,采用发色底物法检测二肽基肽酶-Ⅳ活性,同时对反应体系的酶用量、底物浓度、反应温度和反应pH进行了优化。结果与结论 Caco-2细胞培养17 d时DPP-Ⅳ含量达峰值;在-80℃条件下,存放18个月对酶活性无明显影响;确定DPP-Ⅳ抑制剂筛选模型反应体系的最适反应条件为:反应酶用量为50μg/L蛋白、底物浓度为4 mmol/L、25℃、pH为7.6;通过该模型对所合成的靶向DPP-Ⅳ的抑制剂类化合物进行筛选,发现5个活性化合物。所述方法提取的DPP-Ⅳ酶及建立的DPP-Ⅳ抑制剂的筛选模型可用于DPP-Ⅳ抑制剂类的早期高通量筛选。

5,6,7,8-四氢-3-三氟甲基-1,2,4-三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐的合成

通过对目标产物四条合成路线的比较,选择了实验步骤简单,收率高,以三氟乙酸乙酯为合成起点的路线。反应由三氟乙酸乙酯与肼反应,经肼解、氯乙酰化,再与三氯氧磷反应,环合,再与乙二胺作用,开环、脱水、再环合;最后,在酸性环境下再成环得目标产物-西他列汀中间体。

磺脲类药物及DPP—Ⅳ抑制剂在临床应用中的对比分析

磺脲类药物是经典的促胰岛素分泌剂，而二肽基肽酶（DPP）-Ⅳ抑制剂为2型糖尿病患者提供了新的选择。磺脲类药物疗效好，能预防微血管并发症，但因其非葡萄糖依赖性的降糖方式易引发低血糖，且临床试验证实易增加体重，由于损耗β细胞功能存在继发失效，并不是最为理想的选择。DPP-Ⅳ抑制剂降糖效果不劣于磺脲类，低血糖发生率低，可减轻或不影响体重，保护胰岛细胞功能，但尚缺乏关于长期疗效及安全性的5年以上的研究。如何合理选用降糖药物应根据临床情况综合评估。