HPLC-DPPH法评价雪松松针抗氧化活性成分

目的评价雪松松针抗氧化活性成分。方法以维生素C(VC)和没食子酸为阳性对照,采用高效液相色谱(HPLC)法测定1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)溶液加入雪松松针抗氧化活性成分后DPPH峰面积的衰减情况,并通过计算DPPH自由基的清除率和半数抑制浓度(IC_(50)),来评价雪松松针3种有效部位及8个单体成分的抗氧化活性。采用Agilent Eclipse Plus-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-水(62∶38,V/V)为流动相;检测波长为517 nm;流速为1.0 mL/min;柱温为25℃;进样量为20μL。结果雪松松针各有效部位清除DPPH自由基活性的能力大小依次为总黄酮>总多酚>总木脂素,IC_(50)分别为76.10、100.50、115.40μg/mL。与阳性对照比较,除山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷外,7个单体化合物清除DPPH自由基活性的能力大小依次为二氢杨梅素>金丝桃苷>原儿茶酸>没食子酸>阿魏酸>杨梅素>山柰酚-3-O-(6″-O-E-阿魏酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷>VC>异鼠李素,IC50分别为16.50、19.40、23.73、27.24、32.10、32.20、47.60、93.20、297.20μg/mL。结论建立了HPLC-DPPH法用于评价雪松松针抗氧化活性;雪松松针具有较强的抗氧化活性,其中有效部位总黄酮、总多酚及单体成分二氢杨梅素、金丝桃苷等是具有开发前景的纯天然抗氧化剂。

白秃马勃菌油化学成分分析与DPPH自由基清除活性研究

为了分析白秃马勃菌油化学成分并评价其1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH自由基)清除活性,利用乙醚为萃取剂,通过连续回流渗漉提取法从白秃马勃中得到粗脂肪,粗脂肪经硅胶短柱进一步纯化后得到菌油。运用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对白秃马勃菌油的化学成分进行分析,采用体外DPPH自由基清除实验评价菌油的抗氧化活性。结果显示,白秃马勃粗脂肪得率为9.49%,菌油得率为0.28%。经GC-MS分析,白秃马勃菌油中共鉴定出49个化合物,相对含量占总菌油的73.562%,其主要特征化学成分为6种脂肪酸及其酯类衍生物,其中不饱和脂肪酸及其酯类有4个,分别是反亚油酸甲酯、油酸甲酯、顺式-13-十八碳烯酸和亚油酸乙酯,总相对含量为51.06%,饱和脂肪酸及其酯类有2个,分别是棕榈酸乙酯和棕榈酸甲酯,总相对含量为12.55%。自由基清除实验结果表明,菌油具有有效的DPPH自由基清除活性,半数清除浓度(EC50)为26.1362±0.6435 mg/mL。

毛蜂窝菌菌油化学成分分析与DPPH自由基清除活性

目的分析毛蜂窝菌菌油的化学成分并评价其1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)自由基清除活性。方法以乙醚为提取剂,采用连续回流渗漉法提取毛蜂窝菌菌油,通过硅胶柱层析对菌油进行精制。毛蜂窝菌菌油化学成分经过气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析,采用面积归一法测定菌油中各组分的相对含量,再用分光光度法评价其DPPH自由基清除活性。结果经GC-MS分析,毛蜂窝菌菌油中一共分离出了223个峰,鉴定出了44种化合物,占菌油的45.067%。相对含量最高的为(E,E)-亚油酸甲酯(5.362%),其次是甘油三亚油酸酯(4.147%),亚油酸甲酯(4.098%),相对含量均超过了4%。菌油DPPH自由基消除活性实验结果显示,一半DPPH自由基被清除时,菌油样品浓度为4.3540 mg/mL。结论毛蜂窝菌菌油的化学成分丰富多样,含有烷烃类化合物12种,脂类化合物12种,烯烃类化合物4种,酸类化合物5种,醇类化合物2种,醚类化合物3种,以及醛、胺等化合物。且该菌油具有有效的DPPH自由基清除活性。

含喹啉杂环席夫碱的合成及清除DPPH自由基活性研究

以水杨醛及衍生物(水杨醛、5-甲基水杨醛、5-甲氧基水杨醛)和2-肼基喹啉为原料,合成了3种含喹啉杂环的腙类希夫碱(L1=水杨醛缩-2-肼基喹啉、L2=5-甲基水杨醛-缩-2-肼基喹啉、L3=5-甲氧基水杨醛-缩-2-肼基喹啉),并用红外、紫外可见-吸收光谱、质谱和核磁共振谱等手段表征其结构,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基法测试了它们的抗氧化活性,并考察了溶剂、温度、光照对清除DPPH自由基活性的影响。结果表明:以乙醇为溶剂,3种含喹啉杂环的希夫碱对DPPH自由基均具有较好的清除能力,温度、光照对其清除效果影响都较小。

紫娟茶花色苷单体清除DPPH自由基能力的研究

采用HPLC法检测紫娟茶花色苷的6种单体对DPPH自由基的清除能力。结果表明:花色苷不同单体对DPPH自由基均具有不同程度的清除能力。飞燕草素-3-O-(6-(Z)对香豆酸)吡喃半乳苷对DPPH自由基的清除率为59.07%,飞燕草素-3-O-(6-(E)对香豆酸)吡喃半乳糖苷对DPPH自由基的清除率为45.84%,飞燕草素-3-O-半乳糖苷对DPPH自由基的清除率为38.68%,矢车菊素-3-O-(6-(E)对香豆酸)吡喃半乳糖苷对DPPH自由基的清除率为38.03%,矢车菊素-3-O-(6-(Z)对香豆酸)吡喃半乳糖苷对DPPH自由基的清除率为19.87%,矢车菊素-3-O-半乳糖苷对DPPH自由基的清除率为10.67%。

ABTS法和DPPH法测定锁阳多糖抗氧化活性的适用性

以开发锁阳多糖工业化生产工艺过程中的锁阳多糖粗提物为原料,比较了ABTS法和DPPH法进行抗氧化活性检测的适用性,结合化学成分分析和红外光谱法表征,结果表明:DPPH法易被锁阳多糖粗提物中蛋白、多酚及其复合物等成分影响,测定结果不准确;而ABTS法不受杂质成分干扰,实验结果更可靠,可作为锁阳多糖粗提物体外抗氧化活性检测方法之一;且锁阳多糖粗提物比纯化锁阳多糖具有更强的抗氧化能力,可为抗氧化剂产品开发提供原料。

HPLC-DPPH法在线分析远志抗氧化活性成分研究

建立了远志抗氧活性成分的在线快速分析方法,为其药效物质筛选研究提供了支持。采用HPLC-DPPH在线分析方法,结合对照品保留值对照与活性测定,确定了活性成分,采用抗氧化阳性样品对照分析了活性成分的抗氧化活性强度。结果表明,远志中,3,6’—二芥子酰基蔗糖、西伯利亚远志糖酯A6为主要抗氧化活性成分。在线快速分析方法简捷、高效,适用于中药远志的抗氧化活性成分的快速筛选。

红外与微波预处理油茶籽对其原油DPPH自由基清除能力的影响

为了研究油茶籽油氧化稳定性机制,了解不同预处理方式对油茶籽油抗氧化能力的影响,以DPPH自由基清除能力为指标,对油茶籽分别经红外与微波预处理后得到的油茶籽原油及其极性组分和非极性组分抗氧化能力进行分析。结果表明:油茶籽分别经红外和微波预处理后,得到的油茶籽原油及其极性、非极性组分DPPH自由基清除能力变化显著;红外预处理的油茶籽所制油茶籽原油及其非极性组分的DPPH自由基清除能力高于相应微波预处理,其最大值分别高3.53μg/g和6.47μg/g;微波预处理的油茶籽所制油茶籽原油中极性组分的DPPH自由基清除能力最大值比相应红外预处理的高38.77μg/g。油茶籽原油对DPPH自由基的清除能力主要来自其极性组分,非极性组分的DPPH自由基清除能力弱于极性组分。

赖氨酸+蔗糖美拉德反应产物DPPH·清除率及其反应条件的优化

本实验以赖氨酸+蔗糖构建的美拉德反应模拟体系为研究对象,以DPPH·清除率为指标,在单因素实验基础上,通过正交实验优化了该模拟体系的制备工艺条件。结果表明,影响美拉德反应产物自由基清除能力的因素大小顺序为赖氨酸和蔗糖的物质的量比>反应时间>初始pH值>反应温度,最佳的美拉德反应产物制备工艺条件为赖氨酸和蔗糖的物质的量比1.5∶1.0、初始pH值11.5、反应时间55 min、反应温度110℃。该反应条件下的DPPH·清除率达到了51.25%。

山西酸枣嫩叶醇提物清除DPPH自由基及对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究

以山西酸枣嫩叶为试验材料,测定其醇提物各萃取组分清除自由基的能力,并将其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用进行初步研究。方法:将山西酸枣幼嫩叶片醇提物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,各萃取组分都配制成相当于原药材1 g/mL的萃取物水溶液,通过DPPH法测定清除DPPH的能力,并计算各萃取组分的IC50。参照王贺研究方法、结合96微孔板法,然后以阿卡波糖为阳性对照,以PNPG为底物的酶-抑制剂筛选模型稍作改动,测定山西酸枣嫩叶醇提物各组分对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。结果表明:醇提物各组分清除DPPH自由基能力的强弱顺序是乙酸乙酯层>正丁醇层>萃后水层>石油醚层,其IC50分别为0.73,3.13,3.46,55.37 mg/mL。山西酸枣叶醇提物各组分对α-葡萄糖苷酶均有抑制作用,在试验浓度范围内,随着浓度升高,抑制效果增强,表现出明显的剂量依赖关系。阿卡波糖的抑制率最强,然后依次是乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、萃后水层萃取物、石油醚萃取物。

桑葚果实、桑葚干酒和桑葚利口酒中酚类化合物的高效液相色谱串联电喷雾二级质谱分析及其抗氧化活性比较

为了解桑葚果酒和桑葚果实在酚类化合物的种类、含量及抗氧化活性之间的差异,该研究以桑葚果实、桑葚干酒和桑葚利口酒为试材,采用高效液相色谱串联电喷雾二级质谱(high performance liquid chromatography-electron spray ionization-mass spectrometry/mass spectrometry,HPLC-ESI-MS/MS)对酚类化合物进行定性定量分析。HPLC-ESI-MS/MS分析结果表明,在桑葚果实、桑葚干酒和桑葚利口酒中均检测到花青素-3-葡萄糖苷和花青素-3-芸香糖苷,而花葵素-3-芸香糖苷和4-丙酮酸-花青素-3-葡萄糖苷分别只在桑葚干酒和桑葚利口酒中被检测到。同时,桑葚干酒和桑葚利口酒中花青素-3-葡萄糖苷和花青素-3-芸香糖苷的含量均显著低于桑葚果实。此外,在桑葚果实中鉴定的8种非花色苷多酚中,仅有4种存在于桑葚干酒和桑葚利口酒中。相较于桑葚果实,桑葚干酒和利口酒中原儿茶素、二氢槲皮素和槲皮素的含量显著升高。桑葚果实DPPH自由基清除能力介于桑葚干酒和利口酒之间。综上,桑葚果酒和桑葚果实中酚类化合物的种类、含量及抗氧化活性之间差异显著。

1-MCP协同活性炭处理抑制鲜切胡萝卜木质化形成研究

鲜切胡萝卜在贮藏过程易发生木质化,导致品质下降。为探究1-MCP协同活性炭处理对鲜切胡萝卜木质化抑制保鲜效果,文章分析了乙烯利、活性炭、1-MCP和1-MCP协同活性炭等4种处理方式对鲜切胡萝卜硬度、总酚、抗氧化性、PPO、POD、PAL和木质素含量的影响。结果表明:1-MCP协同活性炭处理显著延缓了胡萝卜硬度下降;在贮藏第10 d总酚含量达0.20 mg GAE·g^(−1),显著高于其他处理组(P<0.05);抗氧化性也保持最高水平;DPPH自由基清除活性为0.90μmol TE·g^(−1);PPO、POD活性分别为0.23 U·g^(−1)和61.08 U·g^(−1),显著低于对照组(P<0.05);PAL活性和木质素含量分别为81.67 U·g^(−1)和65.88 mg·g^(−1),也显著低于对照组(P<0.05)。可见,1-MCP协同活性炭处理可有效抑制鲜切胡萝卜木质化,提升其贮藏品质。

八角莲中两对新的双黄酮对应异构体

采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和制备型高效液相色谱法,从八角莲乙醇提取物中分离得到5个双黄酮类化合物。通过波谱数据分析(MS、UV、IR、NMR)与电子圆二色谱(ECD)技术,分别鉴定为(+)-八角莲双黄酮H(1a)、(-)-八角莲双黄酮H(1b)、(+)-八角莲双黄酮I(2a)、(-)-八角莲双黄酮I(2b)、podoverine F(3),其中,1a与1b、2a与2b为2对新的双黄酮对应异构体。DPPH自由基清除实验结果显示,化合物2、2a、2b对DPPH自由基具有较强的清除能力,IC 50值分别为8.87、10.18、11.35μmol/L,且强于阳性药trolox(14.95μmol/L)。化合物2、2a、2b对DPPH自由基的清除能力分别强于化合物1、1a、1b,进一步的构效关系研究表明,B环上邻二酚羟基是黄酮类化合物具有DPPH自由基清除活性的必需结构基团。

不同贮存年份的大别山区野生花椒精油成分分析及抗氧化活性测定

为了分析不同贮存年份的大别山区野生花椒精油成分,并测定不同贮存年份花椒所提取精油的抗氧化能力,采用顶空气相色谱-质谱联用(HS-GC-MS)技术对其挥发性成分进行分析;采用DPPH法测定花椒精油的抗氧化活性。结果表明,当年、贮存1年和贮存2年的花椒精油提取率分别为(2.3±0.17)、(2.0±0.14)、(1.8±0.25)mL/100 g;当年、贮存1年和贮存2年的花椒精油中分离有效成分分别为23、15和12种;花椒精油浓度为16%时对DPPH的清除率最高,当年、贮存1年和贮存2年的花椒精油清除率分别达77.3%、64.7%和52.5%。因此,不同贮存年份的大别山区野生花椒精油均具有抗氧化能力,抗氧化能力随着贮存年份的延长而降低。在食品、保健品和香料香精等行业中使用花椒精油时,尽量使用当年采收的花椒。

薄层生物自显影技术评价生脉饮抗氧化活性

目的研究生脉饮(党参方和红参方)的抗氧化活性,建立生脉饮生物活性质量控制标准。方法采用薄层生物自显影技术测定生脉饮中各药味的DPPH自由基清除能力,将筛选得到抗氧化活性药味进行物质基础分析,选择抗氧化活性较强成分作为质量控制指标。采用紫外分光光度法验证薄层生物自显影的可靠性。结果生脉饮(红参方和党参方)具有较强DPPH自由基清除能力,方中五味子清除能力最强,其含有抗氧化活性较强的内消旋二氢愈创木脂酸和安五脂素。紫外分光光度法测定结果与薄层生物自显影结果基本一致。结论该方法可行、专属性好,可用于五味子中抗氧化成分的质量控制。

基于均匀试验设计的3种浆果花色苷体外协同抗氧化研究

本研究旨在探究3种浆果花色苷的协同抗氧化活性,以DPPH自由基清除率为评价指标,采用均匀试验设计法优化3种浆果花色苷协同抗氧化组合。经过统计分析和数学回归模型拟合得到最优组合:笃斯越橘花色苷(DP)、黑加仑花色苷(HP)、蓝靛果花色苷(LP)最佳浓度分别为0.08 mg/mL、0.14 mg/mL和0.18 mg/mL,对DPPH自由基的实际清除率为(97.67±0.51)%,接近理论期望值100%,说明模型优选的组合具有可行性。通过协同效应分析,优选组合清除DPPH自由基和羟自由基的协同效应指数CI值分别为0.297和0.651,进一步说明DP、HP、LP3种浆果花色苷具有显著协同抗氧化效果。研究成果可为天然抗氧剂及小浆果功能产品研发提供依据。

牛马藤多糖的提取工艺优化及抗氧化活性研究

为明确牛马藤多糖的提取工艺条件及其抗氧化活性,为牛马藤多糖的开发利用提供参考。采用了苯酚-硫酸法测定牛马藤多糖的含量,通过单因素试验(以提取温度、液固比、提取时间、提取次数为参考因素),正交试验对牛马藤多糖的提取工艺进行优化,DPPH法和ABTS法测定牛马藤多糖的抗氧化活性。所优化的牛马藤多糖提取工艺稳定可行,提取率高,牛马藤多糖具有一定的抗氧化活性。

苦荞叶提取物对油脂的抗氧化能力研究

以DPPH自由基清除率为指标,采用响应面法优化微波提取苦荞叶中抗氧化物质的工艺,并以特丁基对苯二酚(TBHQ)为对照,探究苦荞叶提取物对菜籽油和猪油的抗氧化能力。结果表明:最佳提取工艺条件为提取溶剂为蒸馏水、微波功率400 W、微波时间110 s、微波温度47℃、液料比23∶1(mL/g),在此条件下苦荞叶提取物对DPPH自由基的清除率为80.71%±0.11%。抗氧化试验结果表明,苦荞叶提取物对菜籽油和猪油均具有较好的抗氧化能力。

多酚、黄酮功能性成分导向的草果种质资源评价

草果是一种富含多酚和黄酮的药食同源作物。功能性草果资源的研究评价是育种利用和产业化开发的核心。本研究旨在草果资源的通便活性成分多酚、黄酮含量及抗氧化活性差异分析,进行草果种质资源的筛选评价,探讨成分积累的可能因素。对来自老挝、缅甸,我国四川、广西、云南的57份草果资源,采用福林酚法、NaNO_(2)-Al(NO_(3))_(3)-NaOH比色法分别测定草果水提物的多酚、黄酮含量和DPPH自由基清除能力,分析多酚和黄酮含量与DPPH自由基清除能力、地理因子之间的相关性。结果表明:采用广靶代谢组学检测草果水提物的组分构成,检测出草果水提物中含量最高的为黄酮(46.34%)和多酚(15.98%);通过小肠墨汁推进实验验证草果水提物具有润肠通便功效;纺锤形草果资源的多酚和黄酮含量高于椭圆形果和圆形果,国外和我国云南怒江的草果资源的黄酮含量高于其他地区种质;草果多酚、黄酮含量与DPPH自由基清除能力、海拔高度呈显著正相关(P<0.05),与经度(P<0.05)、纬度(P>0.05)呈负相关,因此推测草果多酚和黄酮的积累可能与温度、光照、紫外线、土壤水分有关。以多酚和黄酮含量作为评价指标,将草果资源分为3个等级,利用该方法筛选到优良草果资源为我国云南怒江种质GS-3、GS-10和国外种质MDL-1、MGK-2。研究结果可为草果质量等级评价体系的建立提供分析方法,不但可以指导草果资源的考察和收集,而且可为草果资源的育种研究和新产品开发利用提供科学依据。

杜仲叶多糖的提取、结构及抗氧化活性研究

【目的】探究微波辅助提取杜仲叶多糖的最佳条件,分析杜仲叶多糖的结构组成及抗氧化活性,为杜仲叶综合利用提供依据。【方法】采用微波辅助提取法,以杜仲叶多糖得率为指标,m(杜仲叶粉/g)∶V(H_(2)O/mL)(以下简称质量体积比)、微波时间、水浴温度、微波功率为影响因素设计单因素试验,在此基础上采用正交试验优化得到杜仲叶多糖最佳提取条件。根据该条件提取6个品种杜仲叶(华仲1号、华仲5号、华仲12号、华仲13号、华仲15号、华仲24号)多糖,使用气相色谱-质谱联用仪及红外光谱仪测定杜仲叶多糖结构组成,并通过电子顺磁共振波谱法测定杜仲叶多糖1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical,DPPH)自由基清除率表征其抗氧化活性。【结果】杜仲叶多糖的最佳提取条件是质量体积比1∶30,微波时间1.5 min,水浴温度40℃,微波功率230 W。在该条件下6个品种杜仲叶得率分别为华仲1号6.90%±0.04%、华仲5号6.47%±0.13%、华仲12号6.68%±0.11%、华仲13号6.53%±0.07%、华仲15号7.21%±0.02%和华仲24号7.64%±0.05%。在结构组成方面,单糖组成结果显示,6个品种杜仲叶多糖均由L-鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和D-半乳糖组成,其中D-葡萄糖和D-半乳糖含量最高,但其单糖组成比例存在差异;多糖红外光谱显示,不同杜仲叶多糖具有相似的多糖特征吸收峰。在抗氧化活性方面,6个品种杜仲叶多糖DPPH自由基清除能力顺序为华仲1号>华仲13号>华仲12号>华仲24号>华仲5号>华仲15号。【结论】微波辅助提取可以提高杜仲叶多糖得率,不同杜仲叶多糖均有良好的抗氧化活性,且以华仲1号的DPPH自由基清除能力最强。