HPLC-DPPH法评价雪松松针抗氧化活性成分

目的评价雪松松针抗氧化活性成分。方法以维生素C(VC)和没食子酸为阳性对照,采用高效液相色谱(HPLC)法测定1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)溶液加入雪松松针抗氧化活性成分后DPPH峰面积的衰减情况,并通过计算DPPH自由基的清除率和半数抑制浓度(IC_(50)),来评价雪松松针3种有效部位及8个单体成分的抗氧化活性。采用Agilent Eclipse Plus-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-水(62∶38,V/V)为流动相;检测波长为517 nm;流速为1.0 mL/min;柱温为25℃;进样量为20μL。结果雪松松针各有效部位清除DPPH自由基活性的能力大小依次为总黄酮>总多酚>总木脂素,IC_(50)分别为76.10、100.50、115.40μg/mL。与阳性对照比较,除山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷外,7个单体化合物清除DPPH自由基活性的能力大小依次为二氢杨梅素>金丝桃苷>原儿茶酸>没食子酸>阿魏酸>杨梅素>山柰酚-3-O-(6″-O-E-阿魏酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷>VC>异鼠李素,IC50分别为16.50、19.40、23.73、27.24、32.10、32.20、47.60、93.20、297.20μg/mL。结论建立了HPLC-DPPH法用于评价雪松松针抗氧化活性;雪松松针具有较强的抗氧化活性,其中有效部位总黄酮、总多酚及单体成分二氢杨梅素、金丝桃苷等是具有开发前景的纯天然抗氧化剂。

白秃马勃菌油化学成分分析与DPPH自由基清除活性研究

为了分析白秃马勃菌油化学成分并评价其1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH自由基)清除活性,利用乙醚为萃取剂,通过连续回流渗漉提取法从白秃马勃中得到粗脂肪,粗脂肪经硅胶短柱进一步纯化后得到菌油。运用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对白秃马勃菌油的化学成分进行分析,采用体外DPPH自由基清除实验评价菌油的抗氧化活性。结果显示,白秃马勃粗脂肪得率为9.49%,菌油得率为0.28%。经GC-MS分析,白秃马勃菌油中共鉴定出49个化合物,相对含量占总菌油的73.562%,其主要特征化学成分为6种脂肪酸及其酯类衍生物,其中不饱和脂肪酸及其酯类有4个,分别是反亚油酸甲酯、油酸甲酯、顺式-13-十八碳烯酸和亚油酸乙酯,总相对含量为51.06%,饱和脂肪酸及其酯类有2个,分别是棕榈酸乙酯和棕榈酸甲酯,总相对含量为12.55%。自由基清除实验结果表明,菌油具有有效的DPPH自由基清除活性,半数清除浓度(EC50)为26.1362±0.6435 mg/mL。

毛蜂窝菌菌油化学成分分析与DPPH自由基清除活性

目的分析毛蜂窝菌菌油的化学成分并评价其1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)自由基清除活性。方法以乙醚为提取剂,采用连续回流渗漉法提取毛蜂窝菌菌油,通过硅胶柱层析对菌油进行精制。毛蜂窝菌菌油化学成分经过气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析,采用面积归一法测定菌油中各组分的相对含量,再用分光光度法评价其DPPH自由基清除活性。结果经GC-MS分析,毛蜂窝菌菌油中一共分离出了223个峰,鉴定出了44种化合物,占菌油的45.067%。相对含量最高的为(E,E)-亚油酸甲酯(5.362%),其次是甘油三亚油酸酯(4.147%),亚油酸甲酯(4.098%),相对含量均超过了4%。菌油DPPH自由基消除活性实验结果显示,一半DPPH自由基被清除时,菌油样品浓度为4.3540 mg/mL。结论毛蜂窝菌菌油的化学成分丰富多样,含有烷烃类化合物12种,脂类化合物12种,烯烃类化合物4种,酸类化合物5种,醇类化合物2种,醚类化合物3种,以及醛、胺等化合物。且该菌油具有有效的DPPH自由基清除活性。

含喹啉杂环席夫碱的合成及清除DPPH自由基活性研究

以水杨醛及衍生物(水杨醛、5-甲基水杨醛、5-甲氧基水杨醛)和2-肼基喹啉为原料,合成了3种含喹啉杂环的腙类希夫碱(L1=水杨醛缩-2-肼基喹啉、L2=5-甲基水杨醛-缩-2-肼基喹啉、L3=5-甲氧基水杨醛-缩-2-肼基喹啉),并用红外、紫外可见-吸收光谱、质谱和核磁共振谱等手段表征其结构,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基法测试了它们的抗氧化活性,并考察了溶剂、温度、光照对清除DPPH自由基活性的影响。结果表明:以乙醇为溶剂,3种含喹啉杂环的希夫碱对DPPH自由基均具有较好的清除能力,温度、光照对其清除效果影响都较小。

紫娟茶花色苷单体清除DPPH自由基能力的研究

采用HPLC法检测紫娟茶花色苷的6种单体对DPPH自由基的清除能力。结果表明:花色苷不同单体对DPPH自由基均具有不同程度的清除能力。飞燕草素-3-O-(6-(Z)对香豆酸)吡喃半乳苷对DPPH自由基的清除率为59.07%,飞燕草素-3-O-(6-(E)对香豆酸)吡喃半乳糖苷对DPPH自由基的清除率为45.84%,飞燕草素-3-O-半乳糖苷对DPPH自由基的清除率为38.68%,矢车菊素-3-O-(6-(E)对香豆酸)吡喃半乳糖苷对DPPH自由基的清除率为38.03%,矢车菊素-3-O-(6-(Z)对香豆酸)吡喃半乳糖苷对DPPH自由基的清除率为19.87%,矢车菊素-3-O-半乳糖苷对DPPH自由基的清除率为10.67%。

用清除有机自由基DPPH法评价植物抗氧化能力

几种抗氧化剂的浓度与其清除 1,1 二苯基苦基苯肼 (DPPH)能力呈显著的线性相关 .不同抗氧化剂清除DPPH能力差异明显 .抗坏血酸与DPPH反应的灵敏性高于其抑制肾上腺素氧化的能力 .用DPPH法和亚油酸氧化法同时测定了生长在不同光强下植物叶片抗氧化能力的变化 ,两种方法所得结论相一致 .结果表明清除有机自由基法是一种快速、简便。

单丛茶水提物清除DPPH和ABTS自由基的光谱学研究

研究了白叶和凤凰两种单丛茶水提物清除DPPH和ABTS自由基的能力及其光谱学特征。采用分光光度法测定单丛茶水提物清除ABTS自由基的测定波长为734 nm,体系稳定时间为6 min;清除DPPH自由基的测定波长为515 nm,体系稳定时间为30 min。单丛茶水提物具有良好的抗氧化活性,能有效、快速地抑制溶液中DPPH和ABTS自由基的形成及其特征吸收峰。在选定的反应体系中,白叶单丛茶(Ⅰ,Ⅱ)、凤凰单丛茶(Ⅲ,Ⅳ)和标准抗氧化剂Trolox对ABTS自由基的半数抑制浓度(IC50)分别为26.9,25.5,28.0,31.7和85.2μg.mL-1,说明单丛茶水提物的总抗氧化活性明显优于Trolox。对于DPPH自由基,4种单丛茶的IC50值分别为49.8,41.6,47.3和64.5μg.mL-1。实验结果显示,单丛茶水提物具有优良的抗氧化活性,且对水溶性自由基的抑制率明显高于脂溶性自由基,作为功能食品具有广阔的开发和应用前景。

DPPH法评价抗氧化活性研究进展

植物化合物或植物提取物的抗氧化活性的体外评价是研究功能因子的一个重要方面。1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)法常用于评价化合物或植物提取物的抗氧化活性,但由于没有一个标准化的方法,因而不同实验的结果难于相互比较。本文从DPPH法的原理、测定方法、检测波长、DPPH初浓度、反应时间、清除率计算公式、结果表达、评价指标等几个方面对DPPH法做归纳总结,分析几种外界因素对DPPH法的影响,有助于研究者提高认识,从而准确的开展研究工作。

DPPH自由基清除活性评价方法在抗氧化剂筛选中的研究进展

1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-Diphenyl-2-picryl-hydrazyl,DPPH)自由基是合成的以氮为中心的稳定自由基,结构简单,反应容易控制,已广泛应用于各种物质提取物或纯化合物的抗氧化活性的评价和筛选。论文详述了目前国内外DPPH自由基应用于抗氧化剂的抗氧化活性评价的测定方法(分光光度法、电子顺磁共振法、电化学法和反相高效液相液色谱法)、原理,以及应用特性。

硒杂环化合物SPO清除DPPH和ABTS自由基的光谱学研究

研究了一种新型硒杂环化合物1,2,5-硒二唑并[3,4-d]嘧啶-5,7-(4H,6H)-二酮(SPO)清除DPPH和ABTS自由基的能力及其光谱学特征。采用分光光度法进行检测,DPPH自由基体系的测定波长为515nm,稳定时间为30 min,而ABTS自由基的测定波长为734 nm,体系在6 min内达到稳定。SPO具有良好的抗氧化活性,能有效、快速地抑制溶液中DPPH和ABTS自由基的形成及其特征吸收峰。在优化的反应体系中,SPO对DPPH和ABTS自由基的半数抑制浓度(IC50)分别为85.2和36.5μmol.L-1,该活性可与标准抗氧化剂Trolox相比拟,且明显优于作为阳性对照的BHA和BHT。实验的结果显示硒杂环化合物在抗氧化方面的广阔应用前景和潜力。

DPPH和FRAP法测定41种中草药抗氧化活性

为了测定41种抗衰老中草药的抗氧化活性,筛选了抗氧化作用强的中草药。实验采用70%的乙醇作溶剂,超声细胞破碎仪对药物进行提取,抗氧化能力的测定使用分光光度计,应用DPPH和FRAP进行测定。通过测定41种中草药乙醇提取液对DPPH自由基的清除能力和FRAP值,表征其抗氧化能力。结果表明:何首乌、大黄、淫羊藿、山楂、白芍、山茱萸等在10 mg/mL的浓度下,对DPPH自由基的清除率超过70%,总抗氧化能力的FRAP值>200,抗氧化能力较强;其他药物也有不同程度的抗氧化活性,但作用较弱。

不同叶菜型甘薯品种茎尖绿原酸含量及清除DPPH·能力

【目的】研究叶菜型甘薯茎尖绿原酸的含量及其清除DPPH·能力,为叶菜型甘薯的品种筛选、栽培及产业化提供理论依据。【方法】在6个不同生长期分别采收广菜薯2号、莆薯53和福薯7-6的茎尖,测定并分析茎尖叶片、叶柄和茎绿原酸含量及其与DPPH·清除能力之间的相关性。【结果】(1)6次采收期的不同甘薯品种茎尖绿原酸平均含量大小为:广菜薯2号(0.2920%fb)>莆薯53(0.2750%fb)>福薯7-6(0.1638%fb),其中叶片(0.3539%fb)>茎(0.1444%fb)>叶柄(0.1173%fb),叶片含量是叶柄和茎平均值的2.70倍;广菜薯2号、莆薯53和福薯7-6茎尖前3个采收时期绿原酸的平均含量分别是后3个时期的2.22、2.68和2.41倍,其中叶片、叶柄和茎前3次采收期绿原酸含量的平均值分别是后3次采收期的2.49,2.53和2.20倍。差异均达到显著水平。(2)根据3个品种6次采收期的平均值计算,叶片对茎尖绿原酸含量的贡献率为73.64%,叶柄为11.96%,茎为14.41%。(3)茎尖6次采收期的DPPH·清除能力平均大小为:广菜薯2号(34.99%)>莆薯53(31.05%)>福薯7-6(18.83%),其中叶片(32.52%)>茎(23.64%)>叶柄(17.91%);前3个采收时期的茎尖、叶片、茎和叶柄的DPPH·平均清除能力分别是后3个时期的1.91、2.02、1.69和1.99倍。【结论】叶菜型甘薯茎尖绿原酸含量在品种、部位和采收期间有显著差异;DPPH·清除能力与绿原酸含量具有显著或极显著正相关。因此,在叶菜型甘薯品种选育、栽培和产业化过程中要充分考虑茎尖绿原酸含量的变化特点。

光皮木瓜多酚类的提取和清除DPPH的抗氧化活性

目的:从光皮木瓜中提取多酚类物质,分析其成分含量并测定其多酚的抗氧化活性。方法:将光皮木瓜分为水提物和醇提物两部分,采用纤维素酶解方法处理原料,进行对比实验。在实验中以分光光度法测定其总多酚、单宁和黄酮类含量;薄层色谱定性分析其单体成分;DPPH自由基清除实验测定其抗氧化性能。结果:光皮木瓜提取物中的总多酚为1801mg/100gFW,其中单宁935mg/100gFW,黄酮类294mg/100gFW,酶解有助于多酚含量的提高(P<0.05);薄层色谱的定性分析显示含有儿茶素单体和绿原酸;DPPH自由基清除效应实验结果指出水提物清除自由基的活性较醇提物强,而且酶解后各部分的活性均增强。结论:光皮木瓜提取物中的多酚类物质含量较高并有较强的抗氧化活性。

干白葡萄酒清除DPPH自由基的能力及其与总酚含量的关系

利用电子自旋共振(ESR)技术对不同品种的干白葡萄酒抗氧化特性进行研究,并分析干白葡萄酒总酚含量与清除DPPH自由基能力的相关性。结果表明,选择ESR测定条件为:干白葡萄酒稀释倍数为30倍,反应时间10min;运用Origin 8.0绘图和数据分析软件对电子自旋共振波谱图进行积分,得到不同品种干白葡萄酒对DPPH自由基的清除率,用Folin-ciocalteus比色法测定总酚含量,长相思葡萄酒清除自由基的能力最强可达到68%,其总酚含量为311mg/L;清除DPPH自由基的能力与总酚含量呈正相关。

桑椹醋提取物对二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)的清除作用

用DPPH法测定了桑椹醋的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯提取物的抗氧化活性,并与叔丁基对苯二酚(TBHQ)进行比较。结果表明,4种提取物对DPPH·自由基均有较强的清除作用,清除能力均高于TBHQ,其大小顺序依次为甲醇提取物>乙醇提取物>丙酮提取物>乙酸乙酯提取物》TBHQ。

DPPH法测定葡萄籽原花青素清除自由基的能力

通过DPPH法测定葡萄籽原花青素抗氧化、清除自由基能力,实验表明:随着葡萄籽原花青素纯化程度的提高,其抗氧化、清除自由基的能力也相应地提高。葡萄籽原花青素纯化物的抗氧化、清除自由基能力大于VC和芦丁,葡萄籽粗提物的抗氧化、清除自由基能力略低于VC,但高于芦丁。GSP、GSPP1、GSPP2、GSPP3、GSPP3-SP、VC、芦丁清除DPPH自由基的半抑制量分别为118,93,88,86,63,110,170 g/kg,其自由基清除能力AE分别为0.84×10-2、1.08×10-2、1.14×10-2、1.16×10-2、1.58×10-2、0.59×10-2、0.59×10-2。

不同甘薯品种苗期茎尖醇溶提取物清除DPPH·的行为特征差异

【目的】通过对65个甘薯品种苗期茎尖醇溶提取物清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH.)反应过程中相关指标的研究,探索其清除DPPH.的行为特征差异。【方法】测定65个品种苗期茎尖醇溶提取物在0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、2.0 mg.mL-16个浓度下清除DPPH.反应的0—210 min中19个时间点的DPPH.清除率,计算反应速率及其变化、各品种的EC50和各浓度下清除率达到50%与80%所需时间,并根据这些指标对65个品种进行聚类分析。【结果】甘薯苗期茎尖醇溶提取物的清除DPPH.行为在65个品种间虽然表现为连续性,但聚类分析能将其分为5种行为类型,并以类型Ⅱ、Ⅲ为主。类型Ⅰ包含1个品种,0—1 min和1—3 min的反应速率、210 min的清除率均显著小于其它类型,醇溶提取物浓度达2.0 mg.mL-1时清除率仍不能达到50%。类型Ⅱ包含44个品种,平均抗氧化能力显著优于类型Ⅰ,次于其它3种类型。醇溶提取物浓度达到0.8 mg.mL-1时有24个品种能达到50%清除能力,平均需时83.89 min,但无品种能达到80%;而2.0 mg.mL-1时有37个品种能达到80%清除率,平均需时59.23 min。④类型Ⅲ包含17个品种,其清除率曲线变化趋势、210 min的清除率、EC50、反应速率以及清除率达到50%和80%的品种比例及所需时间均介于类型Ⅱ与类型Ⅳ之间,并偏向类型Ⅳ。⑤类型Ⅳ包括一个品种,类型Ⅴ包括2个品种。两者的EC50低于前3种类型,均在0.4 mg.mL-1时就能达到50%,在0.8 mg.mL-1就能达到80%,且所需时间显著低于其它类型。而两者主要区别体现在反应速率的变化方面。【结论】在利用DPPH.清除法评定甘薯苗期茎尖醇溶提取物抗氧化能力过程中需要综合考虑清除率随反应时间、醇溶提取物浓度的变化趋势、阶段反应速率、反应消耗时间、EC50多项抗氧化反应行为特征指标。

花生红衣中多酚类物质清除DPPH自由基能力和抑菌性能的研究

研究了花生红衣多酚类物质对DPPH自由基的清除能力及抑菌性能。将花生红衣多酚粗提和纯化后的物质与没食子酸标准品、单宁酸标准品及抗坏血酸的EC50值作比较,得到花生红衣多酚粗提物EC50(0.194mg/L)<纯化花生红衣多酚EC50(0.705mg/L)<没食子酸EC50(0.760mg/L)<单宁酸的EC50(5.409mg/L)<抗坏血酸的EC50(3.745mg/L)。纯化后花生红衣多酚对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、青霉、黑曲霉和毛霉均有抑菌性能,最低抑菌浓度为250mg/L。

老陈醋生产过程中总多酚、总黄酮含量及清除DPPH自由基能力的分析

研究山西老陈醋生产过程中酚类、黄酮类化合物含量及DPPH·清除能力的变化,并分析它们之间的相关性。结果表明:熏醅阶段总酚、总黄酮含量显著增加;总酚含量和总黄酮含量均与DPPH·清除率呈正相关,相关系数分别为0.9340和0.9005;三者之间的多元线性回归方程(生产线2)为:Y=29.061+50.472X1+13.138X2,相关系数为0.954;总黄酮与总多酚含量之间也呈现较高的正相关性,其中生产线3的相关系数为0.881。

采用DPPH法测定26种植物的抗氧化活性

抗氧化剂在预防疾病和延缓衰老等方面的作用,已广泛引起人们的关注,寻找更好更高效的抗氧化剂更为重要。文中采用DPPH法研究了26种植物的抗氧化活性,测定了它们的提取液对DPPH自由基的清除能力。实验结果表明:植物的抗氧化活性成分存在于醇溶液中而非水溶液中;在所选26种植物中,地瑜、鸡血藤、赤芍、虎杖4种植物的抗氧化活性较高,其中地瑜的抗氧化活性最高,其IC50为8.89μg/mL。