DR-nm23基因及其蛋白在大肠癌组织中的表达研究

目的探讨DR-nm23基因及其蛋白在大肠癌组织中的表达及意义。方法应用核酸原位杂交和SP免疫组化方法,从mRNA和蛋白两个水平上检测98例大肠癌、57例大肠腺瘤及42例正常大肠黏膜组织中DR-nm23的表达情况。结果 DR-nm23 mRNA在正常组、大肠癌组和腺瘤组中的表达水平逐渐下降,3组间比较差异显著(P<0.01);腺瘤组中,高级别上皮内肿瘤其表达率低于低级别上皮内肿瘤,但表达差异不显著(P>0.05);DR-nm23 mRNA表达与淋巴结转移呈负相关(P<0.01),与肿瘤病理分级相关(P<0.01),但与组织学分型无关(P>0.05)。DR-nm23蛋白在正常组、腺瘤组和大肠癌组中的表达水平逐渐下降3,组间表达差异显著(P<0.01);腺瘤组中,高级别上皮内肿瘤其表达率低于低级别上皮内肿瘤(P<0.01);DR-nm23蛋白表达不仅与淋巴结转移呈负相关(P<0.05),而且与肿瘤病理分级及组织学分型相关(P<0.01)。原发癌与淋巴结转移癌中DR-nm23基因及其蛋白表达差异均无显著性(P>0.05)。结论 DR-nm23参与大肠癌细胞的分化,其表达下调与大肠癌发生发展密切相关,可作为判断大肠癌生物学行为及其预后的潜在重要指标。

DR-nm23在大肠癌组织中的蛋白表达及意义

目的:探讨DR-nm23蛋白在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌发生发展和转移的关系.方法:应用SP免疫组织化学法检测98例大肠癌、57例大肠腺瘤及42例正常大肠黏膜组织中DR-nm23蛋白的表达,统计学分析比较DR-nm23蛋白表达差异与大肠癌的发生、进展、淋巴结转移以及大肠癌组织学分型、病理分级的相关性.结果:DR-nm23蛋白在正常组、腺瘤组和大肠癌组的表达逐渐下调,3组间表达差异具有显著性(71.4%vs38.6%,35.7%,均P<0.01).腺瘤组中,高级别上皮内肿瘤的表达率低于低级别上皮内肿瘤(25.7%vs59.1%,P<0.05);大肠癌无淋巴结转移组表达率高于淋巴结转移组,表达与淋巴结转移呈负相关(44.1%vs23.1%,P<0.05);DR-nm23表达与组织学分型(χ2=13.731,P<0.01)及病理分级(χ2=12.198,P<0.01)均有相关性.转移组中,淋巴结转移癌DR-nm23蛋白表达率较原发癌高,但二者差异无显著性(P>0.05).结论:DR-nm23参与大肠癌细胞的分化,其表达下调与大肠癌发生发展转移密切相关,可作为反映大肠癌生物学行为和判断预后的潜在重要指征.

DR-NM23在浸润性乳腺癌中的表达及与临床病理参数的关系

目的:探讨DR-NM23蛋白在浸润性乳腺癌组织及癌旁组织中的表达及与临床病理参数的关系。方法:选取82例乳腺癌组织,应用免疫组织化学法检测癌组织中DR-NM23蛋白的表达,并分析与临床病理参数的关系;再利用多因素Logistic回归分析进一步确认。利用Western blot检测分析DR-NM23在25例新鲜冰冻的浸润性乳腺癌组织与其对应癌旁组织中的表达。结果:82例乳腺癌组织免疫组化显示DR-NM23蛋白在癌组织及其癌旁组织中阳性表达率分别为25. 61%和85. 37%。乳腺癌组织中DR-NM23蛋白与组织学分级、淋巴转移、TNM分期及雌激素受体表达呈负相关(P <0. 05)。此外,DR-NM23蛋白与年龄、肿瘤大小、PR受体、Her-2受体无明显相关性(P> 0. 05)。利用Western blot法检测显示DR-NM23在癌组织中的平均相对表达量(0. 135 4±0. 024),癌旁组织相对表达量(0. 710 6±0. 091),癌组织中DR-NM23蛋白表达水平明显低于癌旁(P <0. 001)。结论:浸润性乳腺癌组织中DR-NM23蛋白表达明显低于癌旁,且其与组织学分级、淋巴转移、TNM分期及雌激素受体表达呈负相关,提示其在乳癌进展中起到了重要作用,为探索乳癌新靶点提供理论依据。

上调DR-nm23表达对人结直肠癌细胞SW620生物学特性的影响

目的:探讨DR-nm23基因对人结直肠癌细胞SW620生物学特性的影响.方法:以无内源性DR-nm23表达组SW620、空白对照组SW620/mock和p GC-FU-DRnm23-GFP慢病毒转染组SW620/DR-nm23为实验对象,应用细胞体外实验及体内转移瘤模型检测分析DR-nm23转染前后对结直肠癌细胞增殖、运动、侵袭及转移能力的影响.结果:DR-nm23转染后能抑制SW620细胞的体外增殖能力,通过6 d连续比较,SW620/DRnm23、SW620/mock和SW620 3组细胞体外生长曲线(F=15.657,P=0.002)及平板克隆实验(F=45.476,P=0.003)差异有统计学意义.Transwell体外运动小室24 h穿过细胞数分别为SW620/DR-nm23组14.00±1.85,SW620/mock组18.00±2.01,SW620组17.00±1.98,3组差异有统计学意义(F=10.746,P=0.006).Boyden侵袭小室3组差异不显著.SW620/DRnm23组皮下成瘤能力(F=5.579,P=0.008)及肝转移能力较SW620/mock组及SW620组显著减弱.结论:外源性DR-nm23基因高表达具有抑制结直肠癌细胞SW620增殖、侵袭及转移的能力,因此可作为判断结直肠癌患者预后的潜在指标.

卵巢癌组织中DR-NM23的表达及对细胞增殖和转移的影响

目的探究DR-NM23在卵巢癌组织中的表达及对细胞增殖和转移的影响。方法收集卵巢癌肿瘤组织和癌旁组织各68例,通过免疫组化染色检测DR-NM23表达水平,分析绝经、肿瘤大小、分化程度、局部浸润、淋巴转移和远端转移与DR-NM23表达水平的相关性。在SKOV3细胞系中过表达、沉默DR-NM23,分别得到DR-NM23组和SiDRNM23组,与对照组(NC组)相比,评估各组增殖、迁移和侵袭能力,以评估DR-NM23在卵巢癌组织中的作用机制。结果卵巢癌组织中DR-NM23平均染色强度为2.68±0.75,低于癌旁组织7.05±2.05,差异具有统计学意义(P<0.05)。卵巢癌组织中DR-NM23表达水平与是否绝经、肿瘤大小以及局部浸润无相关性,差异均无统计学意义(χ^(2)=0.418,0.864,2.915,均P>0.05)。低分化、出现淋巴转移和远端转移的组织中DR-NM23表达水平相对较低,差异均具有统计学意义(χ^(2)=6.678,6.845,8.215,均P<0.05)。SiDR-NM23组细胞的CCK-8吸光度(1.16±0.18)、迁移距离百分比(88.58%±5.48%)和侵袭细胞数(207.26±13.52个)高于NC组(0.68±0.11,62.34%±2.15%,125.54±8.15个),而DR-NM23组(0.47±0.07,45.12%±3.76%,59.57±5.02个)均低于NC组,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论DR-NM23在卵巢癌组织中低表达,可能具有抑制肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭的作用。

DR-nm23基因慢病毒表达载体的构建及其在人结直肠癌SW620细胞中的表达

目的:构建DR-nm23基因慢病毒表达载体及建立DR-nm23基因稳定表达的人结直肠癌SW620细胞系,为DR-nm23基因功能研究奠定基础.方法:应用逆转录聚合酶链反应方法筛选无内源性DR-nm23基因表达的人结直肠癌细胞系.通过AgeⅠ酶切获得DR-nm23cDNA片段,并将其交换连接到慢病毒表达载体pGC-FU中.慢病毒表达质粒pGC-FU-DR-nm23-GFP和包装质粒共转染293T细胞,孔稀释法测定慢病毒滴度.获得重组的慢病毒,感染人结直肠癌SW620细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白及Westernblot检测DR-nm23在SW620细胞中的表达.结果:低转移性结直肠癌SW480、HT29细胞DR-nm23基因高表达,而高转移性SW620细胞不表达.重组慢病毒质粒pGC-FU-DR-nm23-GFP酶切鉴定结果与目的基因条带吻合,克隆测序结果与NCBI收录的DR-nm23基因序列(NM_002510)完全一致.重组慢病毒质粒可高效转染293T细胞,慢病毒滴度为2E+9TU/mL.收集慢病毒上清液感染SW620细胞,荧光显微镜下观察85%细胞表达绿色荧光.感染后SW620细胞DR-nm23稳定高表达.结论:成功构建了携带DR-nm23与GFP融合基因的慢病毒表达载体pGC-FU-DR-nm23-GFP,获得了DR-nm23基因稳定表达的结直肠癌SW620细胞系.该细胞系可作为研究DR-nm23基因功能研究的可靠细胞模型.

DR-NM23在浸润性乳腺癌中的表达及与临床病理参数的关系分析

目的分析DR-NM23在浸润性乳腺癌中的表达及与临床病理参数的关系。方法该院于2016年2月—2019年6月方便择选研究病例共50例,均是浸润性乳腺癌病患,收集整体临床资料,取病理癌组织,以免疫组织化学法对所取癌组织中所含DR-NM23情况进行检测,同时分析该基因在癌症中的表达以及其和临床病理参数之间的关系,以期能为疾病的治疗提供相应的参考依据。结果经检测发现,50例患者中有13例DR-NM23在癌组织中呈阳性状态,即阳性表达率为26.0%;另外经免疫组织检测发现,有43例患者DR-NM23在癌旁组织中呈阳性,其表达率为86.0%。通过多因素Logistic回归分析可知,浸润性乳腺癌组织中所含DR-NM23蛋白和雌激素受体表达、组织学分级、TNM分期和淋巴转移表达之间为负相关状态,差异有统计学意义(P<0.05)。DR-NM23和患者年龄、Her-25受体、肿瘤体积大小以及PR受体之间存在的关系不明显(P>0.05)。通过统计学软件的比较检验发现,癌组织中DR-NM23表达水平较癌旁组织DR-NM23表达水平而言,明显要低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在浸润型乳腺癌的临床诊疗中对患者癌组织中DR-NM23进行检测,可为了解疾病的发生和发展提供相应的参考资料,为治疗方案的明确提供更为合理的理论依据,使疾病的诊疗更为科学、准确。