DTaP-Hib联合疫苗中Hib-TT免疫原性研究

考查DTaP-Hib联合疫苗中Hib-TT的免疫原性，对其剂量、免疫持久性和抗原相容性进行分析。将不同剂量的Hib-TT、DTaP-Hib联合疫苗分别免疫小鼠，设单价的Hib-TT结合疫苗为对照，末次免疫后1、2、4、6、8、10w分别采集血清测定血清中Hib多糖抗体滴度。结果显示，不同剂量的Hib-TT和DTaP疫苗联合后均具有较好的免疫原性，血清中Hib多糖抗体阳转率达100％，并具有剂量效应和较好的免疫持久性。2．5μg剂量Hib-TT的DTaP—Hib联合疫苗免疫小鼠后1～2w诱导产生的Hib多糖抗体水平显著性地低于单价Hib-TT（P〈0．05），4～10w，二者的Hib多糖抗体水平无显著性差异（P〉0．05）。5μg剂量Hib-TT的DTaP-Hib联合疫苗在免疫小鼠后1w诱导产生的Hib多糖抗体水平与单价2．5μg剂量Hib-TT无显著性差异（P〉0．05），免后2—10w则显著性地高于单价2．5μg剂量Hib-TT（P〈0．001）。Hib-TT和DTaP疫苗联合后，仍然具有较好的免疫原性、剂量效应和免疫持久性；其抗原性干扰只是暂时的。

呼吸道感染细菌联合疫苗制备及其免疫效果评价

目的探讨呼吸道感染细菌联合疫苗对免疫效果的影响。方法分离培养6种呼吸道感染细菌(溶血性链球菌、流感嗜血杆菌B型、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌及肺炎克雷伯菌),制成联合疫苗。根据联合疫苗质量浓度分为对照组(生理盐水)、低水平组(0.1 g/L疫苗)、中水平组(0.3 g/L疫苗)及高水平组(0.5 g/L疫苗)。各组疫苗作用于人外周血单个核细胞,检测外周血单个核细胞增殖活性、淋巴细胞表型的变化及细胞因子水平。各组疫苗作用于SPF级小鼠,测定各组小鼠迟发型超敏反应、脾脏指数、胸腺指数、巨噬细胞吞噬指数及血清溶血素含量。结果人外周血各组单个核细胞增殖活性、γ干扰素、白细胞介素-2水平均随时间延长而升高,且在相同时间,联合疫苗质量浓度越高,各指标水平越高(P<0.05)。与对照组比较,低、中、高水平组单个核细胞CD4+、CD19+水平升高,CD8+水平降低,且随着联合疫苗质量浓度越高,各指标水平变化越明显(P<0.05)。与对照组小鼠比较,低、中、高水平组小鼠迟发型超敏反应、脾脏指数、胸腺指数、吞噬指数、溶血素水平升高,且随着联合疫苗质量浓度越高,各指标水平越高(P<0.05)。结论呼吸道感染细菌联合疫苗有利于提高细胞及体液免疫能力,且联合疫苗质量浓度为0.5 g/L时,可获得的免疫效果最佳。

2016—2022年武汉市0~6岁儿童出生队列DTaP-IPV/Hib联合疫苗接种情况动态分析

目的:分析2016—2022年武汉市0~6岁儿童无细胞百白破疫苗、脊髓灰质炎灭活疫苗、b型流感嗜血杆菌疫苗联合疫苗(DTaP-IPV/Hib联合疫苗,简称五联疫苗)的接种情况和其对脊髓灰质炎疫苗(Poliovirus Vaccine,PV)的替代情况。方法:通过湖北省免疫规划信息系统儿童接种数据建立武汉市2016—2022年0~6岁出生队列,进行五联疫苗接种率和PV替代率的流行病学分析。结果:截至2022年12月31日,武汉市0~6岁儿童出生队列五联疫苗1~4剂累计接种率分别为22.87%、21.46%、20.54%和14.28%,五联疫苗覆盖率在6.94%~34.67%之间。随着出生年份的后移五联疫苗各剂次接种率均呈上升趋势,各出生队列五联疫苗1~4剂接种率逐渐降低。武汉市各辖区之间五联疫苗1~4剂接种率差异较大。五联疫苗1~4剂对PV的替代率分别为25.57%、22.45%、22.80%和14.62%,各剂次替代率随出生年份后移均逐年上升。结论:武汉市五联疫苗接种率呈逐年缓慢上升趋势,但不同辖区间分布不平衡,其对PV的替代率在合理范围,建议通过强化疫苗接种健康宣教、增加政府投入、加强疫苗管理等措施进一步提升五联疫苗全程接种率。

高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法测定吸附无细胞百(三组分)白破灭活脊髓灰质炎和b型流感嗜血杆菌(结合)联合疫苗的多糖含量

目的 采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法测定吸附无细胞百(三组分)白破灭活脊髓灰质炎和b型流感嗜血杆菌(结合)联合疫苗(以下简称DTac P-s IPV-Hib)中多糖含量,并对方法进行验证。方法 在1 ml样品中加入0.02 g柠檬酸钠,振荡混匀后,置于37℃保温24 h,4000×g离心5 min收集上清液,稀释后加入6 mol/L盐酸,100℃下加热2 h,冰浴10 min后加入0.8 ml氢氧化钠(1 mol/L)溶液用于终止酸水解。采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法根据检测信号峰面积计算对应水解荚膜多糖(PRP)含量,通过PRP占多糖含量干重的41.3%计算出总的多糖含量。结果 核糖醇参考品浓度在0.1~1.5μg/ml范围内标准曲线r2>0.99,检测下限可达10ng/ml。核糖醇加标回收率均在95%~105%;对高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法检测多糖的重复性和中间精密度进行验证,相对标准偏差(RSD)均小于5%,方法专属性和耐用性良好。结论 使用柠檬酸钠作为解吸附剂,与高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法相结合可用于DTac P-s IPV-Hib中Hib多糖的含量检测,为产品的质量控制和稳定性研究提供参考。

2020—2022年广西无细胞百白破联合疫苗疑似预防接种异常反应监测

目的分析2020—2022年广西无细胞百白破联合疫苗(Diphtheria,tetanus and acellular pertussis combined vaccine,DTaP)疑似预防接种异常反应(Adverse Events Following Immunization,AEFI)的发生特征。方法通过中国疾病预防控制信息系统收集2020—2022年广西DTaP AEFI个案和接种数据,描述性分析AEFI分布特征和报告发生率。结果2020—2022年广西共报告DTaP AEFI 1568例,年均报告发生率为24.56/10万剂次,2020年、2021年和2022年的报告发生率分别为32.06/10万剂次、16.41/10万剂次和23.31/10万剂次,不同年份间报告发生率差异有统计学意义(χ^(2)=44.14,P<0.05)。一般反应、异常反应、偶合症报告发生率分别为22.46/10万剂次、1.79/10万剂次、0.31/10万剂次。男女性别比为1.57∶1,AEFI报告主要集中在18~<25月龄。报告月份主要分布在4~6月;广西各市DTaP AEFI报告发生率高低不一致。不良反应主要发生在接种后1 d内,异常反应的临床诊断以过敏性皮疹为主,第4剂次不良反应高于其它剂次。结论2020—2022年广西DTaP安全性总体较好,各地应该继续加强AEFI监测处置工作,提高AEFI因果评估能力。

潍坊市2017—2021年无细胞百白破联合疫苗预防接种安全性评价

目的分析潍坊市2017—2021年无细胞百白破联合疫苗(DTaP)疑似预防接种异常反应(AEFI)的发生特征,评价DTaP预防接种的安全性。方法通过全民健康保障疾控信息系统-免疫规划信息系统,收集潍坊市2017—2021年报告DTaP引起的AEFI个案和接种数据,进行描述性流行病学分析。结果①此期间共报告DTaP引起的AEFI有2100例,报告发生率为93.00/10万剂;其中一般反应2095例(99.76%,92.78/10万剂),异常反应2例(0.10%,0.09/10万剂),偶合症3例(0.14%,0.13/10万剂);没有发现疫苗质量和接种单位违反操作规程引发的接种事故。②年龄分布中,DTaP引起的AEFI均在0~9岁,其中<1岁占43.52%,这部分人群以3~<8月龄为主,占<1岁病例数的82.60%。③每月均有DTaP引起的AEFI个案报告,以4—7月份较多,共1054例,占50.19%。④接种疫苗后以≤1天发生反应为主,占86.86%。⑤接种DTaP4的AEFI报告发生率最高,为172.97/10万,后依次为DTaP3(104.83/10万)、DTaP2(42.10/10万)、DTaP1(39.54/10万)。⑥一般反应中,发热、红肿、硬结报告发生率分别为55.89/10万剂(1262/2258044)、43.31/10万剂(978/2258044)、19.62/10万剂(443/2258044)。结论潍坊市2017—2021年DTaP引起的AEFI报告病例主要为一般反应,疫苗安全性良好。

联合疫苗研发关键技术

目前国内外已上市的各种联合疫苗有几十种,其主要目标是简化免疫程序、提高疫苗接种的便利性和依从性,从而提高疫苗接种率,为人类提供更全面更及时的保护。联合疫苗按照所含抗原种类分为细菌蛋白组成的联合疫苗、细菌多糖组成的联合疫苗、病毒组成的联合疫苗以及不同类别成分组成的联合疫苗,如蛋白-多糖成分组合、蛋白-病毒成分组合、蛋白-多糖-病毒成分组合等。本文从联合疫苗开发的基本原则、研发关键技术路线及研发所面临的挑战几个方面进行综述,为我国新型联合疫苗的研发策略提供技术参考。

2018—2021年扬州市无细胞百白破联合疫苗预防接种安全性评价

目的:分析扬州市无细胞百白破联合疫苗(DTap)接种后出现疑似预防接种异常反应(AEFI)的发生特征及分布情况,为进一步评价DTaP疫苗预防接种的安全性提供依据。方法:通过中国免疫规划信息管理系统的AEFI监测系统收集2018年1月1日—2021年12月31日扬州市报告的DTaP疫苗相关AEFI个案数据,采用描述流行病学方法进行分析。结果:2018—2021年扬州市共接种DTaP疫苗365215剂次,共报告DTaP疫苗相关AEFI个案1055例,年均报告发生率为288.87/10万剂次,其中,一般反应1015例,占96.21%,报告发生率为277.92/10万剂次,临床表现主要为发热、红肿、硬结;异常反应38例,占3.60%,报告发生率为10.40/10万剂次,主要为过敏性皮疹和荨麻疹;偶合症最少,共2例,占0.19%,报告发生率为0.55/10万剂次,均为热性惊厥;无心因性反应、疫苗质量事故及预防接种事故发生。9个县(市、区)各年度均有DTaP疫苗相关AEFI个案报告,其中,报告发生例数最多的为江都区,为232例;各月份均有DTaP疫苗相关AEFI个案报告,其中5、6、7月份报告例数较多。1055例AEFI个案中,男性621例,女性434例,男女性别比为1.43∶1;年龄分布主要以0岁组(271例)和1岁组(731例)病例为主;97.91%的病例随访结果为好转或痊愈。结论:扬州市DTap疫苗预防接种安全性较好,监测系统敏感性较高。

吸附无细胞百白破灭活脊髓灰质炎和b型流感嗜血杆菌联合疫苗的安全性和免疫原性

研究吸附无细胞百白破灭活脊髓灰质炎和b型流感嗜血杆菌联合疫苗(DTaP-IPV/Hib)的安全性和免疫原性。方法 运用随机数字表法将2021.1-2022.12我院疫苗接种婴儿(n=200)分为联合疫苗组、非联合疫苗组,每组各100例,前者接种五联疫苗(DTaP-IPV/Hib),后者同时在不同部位分别接种吸附无细胞百白破联合疫苗(DTaP)、脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)、b型流感嗜血杆菌结合疫苗(Hib)。比较各组免疫原性及安全性。结果 联合疫苗组所有婴儿对百日咳、白喉、破伤风、各型脊髓灰质炎、b型流感嗜血杆菌均产生血清学保护浓度抗体;两组抗白喉抗体、抗破伤风抗体、抗脊髓灰质炎抗体、抗b型流感嗜血杆菌荚膜多糖抗体、抗百日咳抗体滴度血清学保护浓度抗体相似;而联合疫苗组抗丝状血凝素抗体滴度98.06%显著高于非联合疫苗组89.15%。联合疫苗组不良反应发生率14.39%显著低于非联合疫苗组27.68%(P<0.05)。结论 对3月龄-18月龄婴幼儿采用(DTaP-IPV/Hib)联合疫苗,可确保免疫原性的同时保障接种安全性。

成人乙型肝炎疫苗多次免疫无应答者再接种甲乙型肝炎联合疫苗的免疫效果

目的探讨成人乙型肝炎疫苗免疫对策。方法对多次免疫后抗-HBs仍为阴性的228名研究对象接种甲乙型肝炎联合疫苗,按0、1、6个月20μg×3免疫程序进行免疫,于210d抽血,采用放射免疫法进行抗-HBs检测。结果228名乙型肝炎疫苗多次免疫无应答者,接种甲乙型肝炎联合疫苗后,抗-HBs阳性172名,阳转率75.44%,抗体几何平均滴度(GMT)为197.20m IU/ml。结论对成人乙型肝炎疫苗多次免疫无应答者,增加接种剂量或接种甲乙型肝炎联合疫苗,可提高抗-HBs阳转率。

乙型肝炎疫苗-卡介苗联合疫苗细胞免疫的研究

目的评价乙型肝炎疫苗-卡介苗联合疫苗对小鼠细胞免疫的影响。方法采用BALB/c小鼠,试验组分为联合疫苗组、卡介苗组、乙肝疫苗组,对照组分为空白组和保护剂组,各组小鼠分别于接种后1个月及2个月,取脾进行淋巴细胞转化试验以及细胞因子和T淋巴细胞表面标记检测。结果联合疫苗组淋巴细胞转化刺激指数、IL-2含量均明显高于卡介苗组和乙肝疫苗组;CD4+/CD8+值高于单价乙肝疫苗组,而与卡介苗组差异无显著意义。结论乙型肝炎疫苗-卡介苗联合疫苗能有效地诱导细胞免疫。

麻疹-流行性腮腺炎-风疹联合疫苗中病毒滴定方法的改进

目的 为改进ＭＭＲ（麻疹－腮腺炎－风疹）和ＭＲｕ（麻疹－风疹）联合疫苗中麻疹病毒的滴定方法。方 法 在滴定ＭＭＲ中麻疹病毒时，将中和腮腺炎、风疹病毒改为只中和腮腺炎病毒；在滴定ＭＲ中的麻疹病毒时，不 中和风疹病毒，直接滴定。结果 中和与不中和风疹病毒对滴定联合疫苗中的麻疹病毒滴度无明显影响。结论 简化了滴定方法，并解决了无合用的风疹抗体的困难。

冻干甲乙型肝炎联合疫苗组分相容性的研究

目的研究冻干甲乙型肝炎联合疫苗组分的相容性。方法将所制备的联合疫苗与同批单价甲型肝炎减毒活疫苗及重组乙型肝炎疫苗进行甲肝病毒滴度和乙肝疫苗效力检测,同时分别以联合疫苗与甲型肝炎减毒活疫苗及重组乙型肝炎疫苗接种恒河猴,检测甲肝抗体和HBsAb阳转率。结果该联合疫苗与同批单价疫苗的甲肝病毒滴度和乙肝疫苗效力及诱导猴体的甲肝抗体和HBsAb阳转率差异均无显著意义。结论冻干甲乙型肝炎联合疫苗组分间无拮抗作用,具有相容性。

吸附无细胞百白破灭活脊髓灰质炎和b型流感嗜血杆菌(结合)联合疫苗的安全性和免疫原性的meta分析

目的评价吸附无细胞百白破灭活脊髓灰质炎和b型流感嗜血杆菌(结合)(DTaP-IPV/Hib)五联疫苗与吸附无细胞百白破联合(DTaP)疫苗、b型流感嗜血杆菌结合疫苗(Hib)疫苗、灭活脊髓灰质炎(IPV)疫苗的免疫原性和安全性。方法检索国内外发表的有关DTaP-IPV/Hib联合疫苗与DTaP、Hib、IPV疫苗的随机对照试验(RCTs)文献,采用meta分析方法,利用RevMan 5.0软件评价DTaP-IPV/Hib联合疫苗的安全性和免疫原性。结果最终纳入6篇英文RCTs。DTaP-IPV/Hib五联疫苗对百日咳类毒素(PT)产生较高的血清保护性抗体水平(RR=0.26,95%CI:0.14~0.48)。抗百日咳抗体WMD=21.11,95%CI:9.36~32.86,抗1型脊髓灰质炎抗体WMD=59.15,95%CI:2.81~115.48和抗3型脊髓灰质炎抗体WMD=169.82,95%CI:75.33~264.30的抗体滴度水平在DTaP-IPV/Hib联合疫苗中均高于单种疫苗。但是抗b型流感嗜血杆菌荚膜多糖抗体的水平WMD=-3.58,95%CI:-5.52^-1.64在DTaP-IPV/Hib五联疫苗较低。安全性分析结果显示:红肿(RR=0.82,95%CI:0.72~0.93)和触痛(RR=0.45,95%CI:0.30~0.65),在五联疫苗中发生率较低,但是肿胀发生率较高。结论DTaP-IPV/Hib五联疫苗在基础免疫中的免疫原性与安全性与对照疫苗具有可比性。

乙型肝炎卡介苗联合疫苗免疫豚鼠及小鼠的病理学研究

观察乙型肝炎卡介苗联合疫苗(简称HBV-BCG联合疫苗)皮下免疫豚鼠的毒性病理损伤,及其皮内免疫小鼠的局部毒性反应和可逆性改变,检查乙肝表面抗原是否为促使卡介苗毒力增强的潜在因素。豚鼠及小鼠均分设3组,即对照组、BCG组和HBV-BCG联合疫苗组。按计划免疫豚鼠及小鼠,豚鼠观察至42天全部活杀。小鼠观察至第3、5、7、9、11、15、20、25、30天各活杀3只。大体剖检,常规病理制片,HE染色,病理组织学观察和显微照相。对照组豚鼠及小鼠接种局部皮肤组织及全身各脏器均未见异常。与对照组相比,BCG组和HBV-BCG联合疫苗组豚鼠及小鼠接种局部皮肤均发生非特异性炎症反应,以及由BCG引起的特异性类上皮细胞肉芽肿性炎。2组接种局部皮肤的病理改变相似,未见明显差异。另外豚鼠蹊部、肺门和肠系膜淋巴结皮质内的淋巴滤泡有不同程度增生,生发中心活跃、扩大,副皮质区增宽。肺、肝、脾及其余各脏器均未见与疫苗相关的病理改变。BCG或HBV-BCG联合疫苗免疫豚鼠及小鼠所产生的病变,具有BCG原发性病变特征,均未见干酪样坏死或转向恶性化的结核性病变。证实HBsAg不具有促使BCG毒力增强的潜在危险。

甲乙型肝炎联合疫苗小鼠的免疫原性

目的 观察甲乙型肝炎联合疫苗的免疫原性。方法 制备甲乙型肝炎联合疫苗,不同配比的甲乙型肝炎联合疫苗于第 0、4、24周 3次接种小鼠,连续测定甲型和乙型肝炎抗体水平;1次免疫后测定小鼠脾脏单个核细胞增殖情况及 CD 和 CD 细胞数量变化情况。结果 3次免疫后,各组甲、乙型肝炎抗体阳转率均达到 100%,且联 + + 4 8合疫苗组早于单价对照组阳转;所诱导的甲、乙型肝炎抗体水平在数值上超过了单价对照,但无显著差异。1次接种后,联合疫苗能有效诱导机体的细胞免疫应答,小鼠脾脏单个核细胞增殖,CD 和 CD 细胞数量增加。结论 所 + + 4 8制备的联合疫苗具有良好的免疫原性。

同批次细胞基质收获甲肝和麻疹病毒制备联合疫苗的方法

采用同一批次细胞基质收获甲肝和麻疹病毒。应用甲肝L A 1株和麻疹D3T11株 ,间隔 3周先后感染同一批次人胚肺二倍体细胞 2BS株 ,待两种病毒同时达到增殖高峰期时收获病毒液 (以下简称HAM )。对HAM分别进行病毒滴定、特异性检查、猴体安全性和免疫效果试验。结果显示 ,HAM的甲肝和麻疹病毒滴度与同批单价甲肝和麻疹疫苗病毒滴度 ,差异均无显著意义。该方法用于制备甲肝 麻疹联合疫苗 ,省时省力 ,操作简便 。

无细胞百白破b型流感嗜血杆菌联合疫苗的研制

目的研制无细胞百白破b型流感嗜血杆菌联合疫苗(DTaP/Hib)。方法按不同抗原配比配制3组联合疫苗,分别检测疫苗的效价及安全性,从中选择最佳配比配制3批联合疫苗,并用相应批原液,按相同配比配制3批DTaP和3批Hib疫苗作为对照,检测联合疫苗中抗原的相容性。结果3组配比的联合疫苗效价及安全性均达到《中国药典》三部(2005版)要求,联合疫苗中以每毫升含AcP18μgPN、D25Lf、T7Lf和Hib多糖抗原20μg为最佳配比。动物实验证明联合疫苗各抗原间不存在免疫干扰。结论已成功研制4种抗原配比合理的DTaP/Hib联合疫苗。

无细胞百白破联合疫苗安全性和免疫原性研究

[目的]评价长春长生生物科技股份有限公司研制的吸附无细胞百白破联合疫苗的安全性和免疫原性。[方法]在江苏省连云港市赣榆县选择3~5月龄、未接种过百白破联合疫苗、无百日咳白喉破伤风疾病史的足月健康儿童进行临床研究,采用随机、双盲、同类疫苗平行对照设计,将观察对象按3︰2的比例随机分别接受观察疫苗和对照疫苗的接种。在观察期内对接种对象进行安全性观察,接种前后采集血清样本,进行免疫原性的观察。[结果]受试者全身中度发热反应发生率为1.62%（15/924）,没有出现全身严重及以上反应。未出现中度以上局部反应。免疫原性结果表明：受试者破伤风抗毒素阳转率为100.00%;白喉抗毒素阳转率为98.05%;抗百日咳毒素抗体阳转率为87.99%,抗丝状血凝素抗体阳转率为93.18%。[结论]该疫苗接种后具有低反应性和较好的免疫原性。

乙型肝炎卡介苗联合疫苗与单价乙型肝炎疫苗免疫效果的比较

目的:比较乙型肝炎卡介苗联合疫苗与单价乙型肝炎疫苗的免疫效果。方法:实验动物采用豚鼠,按0、1、2月三针免疫程序接种,并于每针免疫后1个月采血,ELISA方法检测血清抗体滴度。实验分三部分进行。实验一:三种不同规格的联合疫苗与单价乙型肝炎疫苗的比较;实验二:同一规格连续三批联合疫苗与单价乙型肝炎疫苗的比较;实验三:联合疫苗与两种单价疫苗同时免疫的比较。结果:在三个实验中,联合疫苗组第一针血清抗体滴度均低于对照组,但无统计学差异;联合疫苗组第二、三针血清抗体滴度均高于对照组,也无统计学差异,实验组各组之间无明显差异。结论:联合疫苗组三针免疫程序的HBsAg的效力与单价乙型肝炎疫苗组相似。