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拟南芥DWF4基因的内含子影响自身表达 被引量:3
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作者 彭志红 黄颖 +1 位作者 袁利兵 任春梅 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期597-601,F0003,共6页
为了进一步确定DWF4基因的内含子是否影响自身表达,构建了35S启动子驱动的带内含子和不带内含子的DWF4基因表达载体,分别转入拟南芥DWF4基因的弱突变体psc1。对T2代幼苗进行表型分析发现,转入带内含子的DWF4基因的转基因株系TgD4能完全... 为了进一步确定DWF4基因的内含子是否影响自身表达,构建了35S启动子驱动的带内含子和不带内含子的DWF4基因表达载体,分别转入拟南芥DWF4基因的弱突变体psc1。对T2代幼苗进行表型分析发现,转入带内含子的DWF4基因的转基因株系TgD4能完全恢复突变体的表型,而转入不带内含子的DWF4基因的转基因株系TcD4只能部分恢复突变体的表型。RT–PCR分析显示,TgD4的DWF4表达水平明显增加,说明内含子对DWF4基因的表达有增强作用。 展开更多
关键词 拟南芥 dwf4基因 内含子 基因表达
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敲除DWF4基因提高拟南芥对低温胁迫的抗性 被引量:3
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作者 夏金婵 何奕昆 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期505-511,共7页
以拟南芥类固醇类C22α-羟化酶基因DWF4的T-DNA插入缺失突变体dwf4为研究材料,通过观察突变体在低温胁迫条件下的表型,检测dwf4突变体和野生型在低温胁迫条件下的相对电导率、叶绿素含量、可溶性糖含量、脯氨酸含量、抗冷基因表达量和... 以拟南芥类固醇类C22α-羟化酶基因DWF4的T-DNA插入缺失突变体dwf4为研究材料,通过观察突变体在低温胁迫条件下的表型,检测dwf4突变体和野生型在低温胁迫条件下的相对电导率、叶绿素含量、可溶性糖含量、脯氨酸含量、抗冷基因表达量和过氧化物酶基因表达量的区别,探讨了该基因在抗低温胁迫反应过程中的功能。结果表明,敲除DWF4基因能够提高拟南芥对低温胁迫的抗性。dwf4突变体的抗低温胁迫能力一方面源于在低温胁迫下,与野生型相比,dwf4突变体中相对较低的电导率和较高的叶绿素含量,以及更多渗透调节物质可溶性糖和脯氨酸的积累,另一方面源于低温胁迫条件下dwf4突变体中低温胁迫响应的下游基因RD29A及COR47的高表达。结果还表明尽管dwf4突变体中过氧化物含量增加,但是过氧化物酶基因Prx22与Prx698的高表达对过氧化物的毒害起到了很好的抑制作用。说明在拟南芥中DWF4负调控拟南芥对低温胁迫的反应过程。 展开更多
关键词 dwf4基因 低温胁迫 COR47基因 RD29A基因
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毛竹PeDWF4基因克隆及表达模式分析
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作者 王思宁 孙化雨 +4 位作者 李利超 杨意宏 徐浩 赵韩生 高志民 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2018年第5期50-56,共7页
[目的]通过对毛竹PeDWF4基因结构特点和表达特征的研究,揭示其在响应逆境胁迫过程中的作用。[方法]采用同源序列比对的方法,从毛竹基因组数据库中获得DWF4同源基因信息并克隆,通过生物信息学方法分析该基因的结构、理化特征,以及基因编... [目的]通过对毛竹PeDWF4基因结构特点和表达特征的研究,揭示其在响应逆境胁迫过程中的作用。[方法]采用同源序列比对的方法,从毛竹基因组数据库中获得DWF4同源基因信息并克隆,通过生物信息学方法分析该基因的结构、理化特征,以及基因编码蛋白的保守结构域、进化关系等,应用RT-PCR技术分析基因在毛竹不同组织中的表达情况,使用实时荧光定量PCR技术分别分析高盐、干旱、低温和强光等胁迫条件下该基因在叶片中的表达模式。[结果]从毛竹中克隆获得1个DWF4同源基因PeDWF4,编码区长度为1 503 bp,对应的基因组序列为6 149 bp,包含8个外显子和7个内含子,内含子完全符合GT-AG剪接原则。PeDWF4编码1个500 aa的碱性蛋白,属于细胞色素P450家族的单加氧酶。组织特异性表达分析表明,PeDWF4在毛竹不同组织中均检测到表达,其中,叶片中表达丰度最高,其次是根,茎、叶鞘和笋中的表达量较低。在Na Cl(400 mmol·L-1)和干旱胁迫条件下,叶片中PeDWF4的表达均先受到诱导,后受到抑制,其中,Na Cl处理下,表达量在2 h时达到最高(为对照的3. 5倍),6 h时最低(为对照的20%);干旱处理下,表达量在1 h时达到最高(为对照的2倍),8 h时最低(为对照的60%)。强光(1 200μmol·m-2·s-1)和低温(4℃)胁迫均诱导PeDWF4的表达,其中,强光处理2 h时表达量达到最高(为对照的4. 5倍),随后降低,8 h时仍为对照的2倍;低温处理下,叶片中PeDWF4表达量在1 h时达到最高(约为对照的3倍),随后持续下降,8 h时仍为对照的2倍。[结论]从毛竹中克隆了BL生物合成关键限速酶基因PeDWF4,该基因在毛竹中呈现组成型表达,在叶片中的表达受到Na Cl、干旱、低温和强光等非生物胁迫的影响,基因表达的变化表明PeDWF4可能有助于毛竹适应逆境胁迫。 展开更多
关键词 毛竹 油菜素内酯 dwf4 非生物胁迫 基因表达
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超量表达DWF4基因对芥菜生长发育的影响 被引量:2
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作者 兰彩耘 宋洪元 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期26-37,共12页
为研究DWF4基因在芥菜生长过程中的作用与功能,也为今后开发生物技术手段调控植物生长发育奠定理论基础,通过农杆菌介导转化法将DWF4基因导入芥菜中,结果显示:转基因芥菜植株生长迅速,生长势旺盛,其叶、花等器官都大于对照野生型.转基... 为研究DWF4基因在芥菜生长过程中的作用与功能,也为今后开发生物技术手段调控植物生长发育奠定理论基础,通过农杆菌介导转化法将DWF4基因导入芥菜中,结果显示:转基因芥菜植株生长迅速,生长势旺盛,其叶、花等器官都大于对照野生型.转基因植株成长过程中,其株高、开展度、最大叶宽、最大叶长都显著高于野生型,且植株抽薹时间和开花时间提前.pCA BarDWF4转基因芥菜植株与野生型植株相比,主枝更长,分枝更多,总种荚数增多,总种子数增多,种荚率更高.对pCA BarDWF4转基因芥菜植株定量PCR分析结果显示:植株体内油菜素甾醇(Brassinosteroids,BR)合成途径相关基因表达增高.结果表明:DWF4基因能促进植株内源BR的生成,因此促进了植株的生长发育. 展开更多
关键词 芥菜 产量 dwf4基因
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拟南芥(Arabidopsis thaliana)DWF4基因克隆、生物学信息分析及过表达载体构建 被引量:1
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作者 韦春 杨莉琴 秦利军 《种子》 北大核心 2021年第1期1-5,10,共6页
BRs(Brassinosteroids)是植物体内一种重要的类固醇激素,具有十分重要的生理功能。DWF 4是BRs生物合成的关键限速酶,显著影响BRs在植物体中的含量。本研究以拟南芥(Arabidopsis thaliana)为材料,利用同源克隆技术从A.thaliana cDNA中克... BRs(Brassinosteroids)是植物体内一种重要的类固醇激素,具有十分重要的生理功能。DWF 4是BRs生物合成的关键限速酶,显著影响BRs在植物体中的含量。本研究以拟南芥(Arabidopsis thaliana)为材料,利用同源克隆技术从A.thaliana cDNA中克隆到全长为1542 bp的特异性条带,测序结果表明该条带为AtDWF4基因;生物学信息分析显示该基因可编码513个氨基酸(amino acid,aa),Proscale在线预测该蛋白为亲水性蛋白,且SOPM分析表明DWF 4蛋白含有α-螺旋(alpha-helix)、β-折叠(beta-fold)、β-转角(beta-angle)等多个二级结构。同时,研究还构建了含AtDWF4基因的超量表达载体pRI 201-RdDwf 4,并遗传转化烟草K 326,已获得抗性愈伤组织及抗性芽。本研究为进一步探究过表达AtDWF4基因对烟草形态及抗逆胁迫能力的影响提供理想的实验材料。 展开更多
关键词 拟南芥 BRs dwf4基因 过表达载体构建
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超量共表达NsAKT1和AtDWF4烟草抗渗透胁迫能力研究
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作者 韦春 秦利军 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2020年第6期7-16,共10页
为了解钾和油菜素内酯(BRs)在调控植物抗逆境胁迫中的作用,以超量表达K+吸收基因NsAKT1及BRs合成基因AtDWF4的转基因烟草为材料,分析PEG渗透胁迫对其形态及抗性指标等的影响。结果表明,PEG胁迫3 d时,转基因烟草SOD活性即达到极值且显著... 为了解钾和油菜素内酯(BRs)在调控植物抗逆境胁迫中的作用,以超量表达K+吸收基因NsAKT1及BRs合成基因AtDWF4的转基因烟草为材料,分析PEG渗透胁迫对其形态及抗性指标等的影响。结果表明,PEG胁迫3 d时,转基因烟草SOD活性即达到极值且显著高于非转基因烟草(Wt),其中以共转AKT1/DWF4植株中SOD活性最高;而PEG胁迫1 d时,3种转基因植株的POD活性均显著(p<0.05)高于Wt植株,且共转AKT1/DWF4植株中POD活性分别是单转AKT1植株的1.28倍、单转DWF4植株的1.40倍和Wt植株的1.90倍;PEG胁迫第3天时,共转AKT1/DWF4植株中CAT活性增幅最大,达59.18%,显著高于其他2种转基因烟草。同时,H2O2和MDA含量测定表明,PEG处理后Wt中MDA和H2O2含量均在第5天时达极值,分别为58.52 nmol/g和38.21μg/g,均显著高于转基因烟草。另外,特征基因表达分析表明,NsAKT1和AtDWF4可能协同调控共转AKT1/DWF4烟株对PEG渗透胁迫的抗性。本研究为进一步揭示K和BRs协同介导的烟草抗逆境胁迫应答机制以及创制优良的烟草新种质奠定理论依据。 展开更多
关键词 烟草 AKT1 dwf4 抗旱性
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Over-expression of GhDWF4 gene improved tomato fruit quality and accelerated fruit ripening
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作者 YE Shu-e LI Fang +7 位作者 LI Xian-bi HONG Qi-bin ZHAI Yun-lan HU Ming-yu WEI Ting DENG Sha-sha PEI Yan LUO Ming 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2015年第10期1980-1991,共12页
Brassinosteroids(BRs), a class of steroidal phytohormones are essential for many biological processes in plant. However, little is known about their roles in fruit development. Tomato is a highly valuable vegetable ... Brassinosteroids(BRs), a class of steroidal phytohormones are essential for many biological processes in plant. However, little is known about their roles in fruit development. Tomato is a highly valuable vegetable and has been adopted as the model species for studying fruit growth, development, and ripening. To understand the role of endogenous BRs in the development of tomato fruit, the expression patterns of three homologues of DWF4 gene were investigated and the transgenic tomato plants were generated in which the Gh DWF4 gene from upland cotton(Gossypium hirsutum L.) was ectopically expressed. The contents of main quality components were analyzed in fruits of transgenic tomato line and non-transgenic line(control plant, CP) when the fruit was mature. Sl CYP90B3 that possesses high homology with Gh DWF4 preferentially expressed in mature fruit. Significantly higher contents of soluble sugar, soluble proteins, and vitamin C were obtained in fruit of transgenic tomato lines compared with those in the CP. Furthermore, overexpressing Gh DWF4 promoted fruit growth and ripening. The weight per fruit was increased by about 23% in transgenic lines. In addition, overexpressing Gh DWF4 promoted the germination of transgenic tomato seeds and hypocotyl elongation of seedlings. These results indicated that overexpressing Gh DWF4 gene in tomato could increase the contents of many nutrients in fruit and accelerate fruit ripening. It is suggested that increased endogenous BRs in fruit affect the growth and development of tomato fruit and therefore improved the nutrient quality of tomato. 展开更多
关键词 brassinosteroids Gh dwf4 tomato fruit ripening fruit quality transgenic plant
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TCP1 Modulates DWF4 Expression via Directly Interacting with the GGNCCC Motifs in the Promoter Region of DWF4 in Arabidopsis thaliana 被引量:13
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作者 Yahu Gao Dongzhi Zhang Jia Li 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2015年第7期383-392,共10页
Our previous studies indicated that TCP1 is a positive regulator of the brassinosteroid (BR) biosynthesis pathway by mediating the transcription of DWF4, one of the key BR biosynthetic genes in Arabidopsis thaliana.... Our previous studies indicated that TCP1 is a positive regulator of the brassinosteroid (BR) biosynthesis pathway by mediating the transcription of DWF4, one of the key BR biosynthetic genes in Arabidopsis thaliana. Whether TCP1 can directly bind to the promoter region of DWF4, however, has not been experimentally demonstrated. Here we provide our biochemical and genetic evidence that TCP1 mediates the expression of DWF4 by directly associating with the two GGNCCC motifs in the promoter region of DWF4. The expression levels of DWF4 are positively correlated to TCP1 abundance in planta. Electrophoretic mobility shift assays (EMSAs) using various synthetic DNA fragments suggest that the GGNCCC core sequence is critical for TCP1 binding. DNA sequences flanking the GGNCCC motifs are less important for the association of TCPI. Using DWF4p-GUS transgenic plants as an assay system, it is clearly indicated that these motifs are required for the positive regulation of DWF4 transcription by TCP1. More significantly, whole genome microarray analyses indicate that TCP1 can directly or indirectly regulate the expression of many other genes known to be important for normal plant growth and development. 展开更多
关键词 BRASSINOSTEROIDS TCP1 dwf4 ARABIDOPSIS HOMEOSTASIS
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