大川芎方对电刺激大鼠上矢状窦偏头痛模型疼痛行为学及血浆CGRP、SP、VIP浓度的影响

目的观察大川芎方对偏头痛大鼠模型疼痛行为学及SP等物质的影响，评价和探讨大川芎方治疗偏头痛的作用机制。方法各组大鼠不同药物连续灌胃3d，最后一次灌胃后1h造模，记录大鼠的疼痛行为学表现并检测其颈静脉血中CGRP、SP、VIP物质的浓度。结果大川芎方各组大鼠的疼痛行为学表现较生理盐水组减少，高剂量组更为显著（P〈0．05）；各组问血浆SP、CGRP浓度无统计学差异；大川芎方各组能升高偏头痛模型大鼠血浆NPY水平，高剂量组更为显著（P〈0．05）。结论大川芎方可能是通过升高血浆中NPY的浓度发挥镇痛作用来治疗偏头痛的。

大川芎方效应组分血浆及脑脊液HPLC特征指纹图谱研究

目的:通过大川芎方效应组分血浆及脑脊液HPLC指纹图谱的研究,建立准确、简便的体内定性分析方法,为大川芎方入血、入脑成分的研究奠定基础,对阐明其"引药上行"配伍规律提供依据。方法:建立大川芎方效应组分血浆及脑脊液HPLC指纹图谱。结果:各共有峰的相对保留时间的RSD<2.0%,6批血浆、脑脊液样品的指纹图谱的相似度均在0.85以上。结论:所建立的大川芎方效应组分血浆、脑脊液指纹图谱相对稳定、准确,可用于体内成分的定性分析。

大川芎方中川芎提取纯化工艺及其镇静镇痛作用

目的:探讨大川芎方中川芎的提取纯化工艺条件。方法:分别采用回流法提取、大孔树脂法纯化川芎提取物,用高效液相色谱法测定提取物中阿魏酸的含量,采用小鼠镇痛、镇静试验验证提取物的药效。结果:川芎的最佳提取工艺为乙醇体积分数为70%,溶剂用量为8倍量,提取次数为3次,时间为每次2 h;提取液采用HPD100型大孔树脂纯化;纯化条件为上样液浓度0.5 g.mL-1,洗脱剂为6倍柱体积50%乙醇。药效试验表明提取物具有较好的镇静与镇痛效果。结论:提取纯化方法简便、准确,可为大川芎方现代制剂的开发提供技术参考。

大川芎方化学成分的超高效液相色谱-电喷雾-四极杆飞行时间质谱分析

目的:采用液质联用技术(LC-MS)对中药大川芎方中的化学成分进行定性分析。方法:运用ACQUITY UPLCBEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,乙腈-水梯度洗脱;质谱使用ESI离子源,正离子与负离子模式下采集数据。结果:通过Q-TOFMS正、负离子质谱信息及元素组成分析并结合对照品与相关文献数据对照,共鉴定出17个化合物结构,主要结构类型为:酚类、有机酸类、苯酞类及含氮类化合物。同时,对大川芎方中主要化学成分的质谱裂解规律进行了分析。结论:经超高液相色谱分离,质谱测定相对分子质量及相关文献数据信息检索可以鉴别中药复方中的成分,为寻找大川芎方的物质溯源提供依据,为中药复方成分的鉴定提供一种快速准确的分析方法。

HPLC-DAD-MS^n联用技术表征大川芎方效应组分中主要化学成分

目的:采用HPLC-DAD-MSn联用技术研究大川芎方效应组分的主要化学成分,为其体内物质基础研究及质量标准的完善奠定基础。方法:通过建立大川芎方效应组分指纹图谱,将其复杂的化学成分表征出来,并采用HPLC-DAD-MSn联用技术对各化学成分进行结构鉴定和推测。结果:推断出川芎效应组分中的3个化学成分和天麻效应组分中的8个化学成分。结论:大川芎方效应组分的化学成分研究有助于阐明其效应物质基础并完善其质量标准。

基于尿液代谢组学技术分析大川芎方多组分中药制剂干预急性偏头痛大鼠模型的影响

目的:考察大川芎方多组分中药制剂对急性偏头痛大鼠尿液中内源性代谢产物的影响,通过尿液代谢组学技术探讨该药可能的作用机制。方法:采用40只SD雄性大鼠随机分为5组,分别为正常组、模型组和大川芎方多组分中药制剂低、中、高剂量组(0. 19,0. 37,0. 74 g·kg-1),每组8只。除正常组外,其余各组大鼠采用皮下注射10 mg·kg-1硝酸甘油方法制备急性偏头痛的模型。造模成功后,大川芎方多组分中药制剂组灌胃给予不同剂量的大川芎方多组分中药制剂。给药0. 5 h后腹主动脉取血,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血浆中血清素5-羟色胺(5-HT),5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA),一氧化氮(NO),一氧化氮合酶(NOS),降钙素基因相关肽(CGRP)及多巴胺(DA)含量;采用免疫组化对正常组及模型组大鼠下丘脑和脑干部位5-HT和NOS蛋白表达进行分析,并通过平均光密度值进行统计;采用UPLC-TOF/MS,结合主成分分析(PCA)对不同组别大鼠进行尿液代谢组学分析,并发现潜在的生物标记物;通过MetaboAnalyst 3. 0软件对差异代谢物进行代谢通路分析。结果:与正常组比较,模型组大鼠体内的神经递质均有极显著性差异(P <0. 01),说明急性偏头痛大鼠模型已建立;与模型组比较,各给药组体内的神经递质均有显著性差异(P <0. 05,P <0. 01),说明给予大川芎方多组分中药制剂可调节大鼠体内的神经递质含量。根据UPLC-TOF/MS分析,共发现10种潜在的差异代谢物。大川芎方多组分中药制剂给药组可降低模型组中色氨酸、缬氨酸的含量,升高γ-氨基丁酸(GABA),乳酸,β-羟丁酸的含量。根据代谢通路预测研究,发现相关性较大的代谢通路为丙氨酸、天冬氨酸与谷氨酸代谢,丙酸代谢,氮代谢及色氨酸代谢。结论:大川芎方多组分中药制剂对急性偏头痛大鼠模型体内的差异代谢物有一定的回调作用,其作用机制主要与氨基酸代谢有关,特别是犬尿氨酸的代谢。