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过表达DACT1对白血病K562细胞生物学行为的影响及机制 被引量:1
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作者 朱珂 胡荣 刘卓刚 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第2期182-185,共4页
目的:研究过表达DACT1对白血病K562细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,并探讨其作用机制。方法:用Attractene Transfection试剂在K562细胞中转染DACT1质粒,使其在细胞中过表达,应用CCK-8法、流式细胞术检测过表达DACT1对K562细胞增殖、凋... 目的:研究过表达DACT1对白血病K562细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,并探讨其作用机制。方法:用Attractene Transfection试剂在K562细胞中转染DACT1质粒,使其在细胞中过表达,应用CCK-8法、流式细胞术检测过表达DACT1对K562细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。Western blot法检测过表达DACT1后凋亡相关蛋白的变化。结果:过表达DACT1能够抑制K562细胞集落形成,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,使细胞发生G_0/G_1期阻滞。同时可使促凋亡蛋白Bax、caspase-3及caspase-9表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少。结论:过表达DACT1可以抑制白血病K562细胞增殖并诱导其凋亡,干扰其增殖周期,可能具有潜在的抑癌作用,其机制可能与调节凋亡相关蛋白有关。 展开更多
关键词 白血病 dact1 凋亡 增殖 细胞周期
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中国北方汉族人群神经管缺陷患儿DACT1基因突变分析
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作者 方玉莲 赵林胜 +4 位作者 张瑞苹 支秀芳 王懿征 曹丽荣 蔡春泉 《天津医药》 CAS 2017年第3期297-300,共4页
目的探讨中国北方汉族人群神经管缺陷(NTDs)患儿与DACT1基因的相关性,为疾病的诊断及遗传咨询提供依据。方法收集163例NTDs患者和480例无亲缘关系健康个体的外周血标本,采用聚合酶链反应和DNA直接测序的方法检测DACT1基因的突变情况,并... 目的探讨中国北方汉族人群神经管缺陷(NTDs)患儿与DACT1基因的相关性,为疾病的诊断及遗传咨询提供依据。方法收集163例NTDs患者和480例无亲缘关系健康个体的外周血标本,采用聚合酶链反应和DNA直接测序的方法检测DACT1基因的突变情况,并对突变位点进行生物信息学分析。结果在NTDs患者中发现6个突变位点,有4个突变位点为错义突变,分别为p.R45W、p.D142G、p.N356K、p.V702G,在正常对照中未检测到这些突变位点。其中3个位点的氨基酸残基(p.45R、p.142D、p.356N)在进化上高度保守,且这3个位点突变携带者均为女性,同时存在无脑畸形。结论中国北方汉族人群NTDs患者存在DACT1基因突变,且可能为该病风险因素之一。 展开更多
关键词 神经管缺损 突变 汉族 dact1
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DACT1错义突变与先天性心脏病易感性的相关性研究 被引量:1
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作者 王鹤 彭瑞 +2 位作者 段文元 王红艳 姚晓英 《中国循证儿科杂志》 CSCD 北大核心 2019年第2期118-122,共5页
目的:筛选与先天性心脏病(CHD)相关的DACT1基因的错义突变,并研究其生物学功能。方法:研究对象为中国山东地区汉族人群,病例组为2008年8月至2011年1月散发CHD的连续就诊患儿,排除综合征型和有心脏病家族史患者;对照组为同时期收集的排除... 目的:筛选与先天性心脏病(CHD)相关的DACT1基因的错义突变,并研究其生物学功能。方法:研究对象为中国山东地区汉族人群,病例组为2008年8月至2011年1月散发CHD的连续就诊患儿,排除综合征型和有心脏病家族史患者;对照组为同时期收集的排除CHD以及有心脏病家族史的健康儿童。①提取两组外周静脉血WBC的基因组DNA,靶向DACT1基因的编码区进行测序,将测序结果中的单核苷酸变异(SNV)与数据库dbSNP(version137)和千人基因组比对,病例组与对照组的SNV比对,筛选出病例特异性的新发现或稀有DACT1突变位点,通过Sanger法验证。②构建野生型和各突变型DACT1的表达质粒,在HEK293T细胞中通过蛋白质免疫印迹实验观察DACT1和DVL2蛋白表达水平。③通过双荧光素酶报告基因实验观察突变后DACT1对经典Wnt信号通路和非经典Wnt信号通路(PCP)调控作用的变化。结果:病例组404例,年龄(2.9±2.7)岁;对照组213名,年龄(7.1±3.7)岁。病例组和对照组的男女比例分别为1.2∶1和1∶1,均为汉族儿童。在3例CHD中筛选到4个DACT1基因编码区的新发现或稀有的错义突变c.1486C>T(p.S441L)、c.1598C>A(p.S478R)、c.1659G>C(p.E499Q)和c.1891T>A(p.M576K),经Sanger测序验证均为杂合突变。DACT1^S478R和DACT1^E499Q在不同物种中保守性很高。DACT1^S441L SIFT评价为有害突变;DACT1^E499Q PolyPhen-2评价为可能有害(0.978),DACT1^S478R和DACT1^M576K SIFT和PolyPhen-2预测为无有害性。4种突变型对DACT1蛋白的表达水平均无明显影响。与野生型DACT1相比较,突变型DACT1^E499Q对DVL2蛋白的下调作用减弱(P<0.05),对经典Wnt信号通路以及PCP信号通路的抑制作用也减弱(P<0.01)。结论:DACT1^E499Q错义突变可能通过减弱对Wnt信号通路活性的抑制来促进CHD的发生。 展开更多
关键词 先天性心脏病 dact1 错义突变 WNT信号通路
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The role of aberrant promoter hypermethylation of DACT1 in bladder urothelial carcinoma 被引量:4
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作者 Huan Cheng Zhonglei Deng +2 位作者 Zengjun Wang Wei Zhang Jiantang Su 《The Journal of Biomedical Research》 CAS 2012年第5期319-324,共6页
The purpose of this study was to determine the relationship between hypermethylation of DACT1 gene pro-moter and lower mRNA expression in bladder urothelial carcinoma tissue.The methylation status of 29 urothelial car... The purpose of this study was to determine the relationship between hypermethylation of DACT1 gene pro-moter and lower mRNA expression in bladder urothelial carcinoma tissue.The methylation status of 29 urothelial carcinoma samples and 29 normal tissue samples were examined by methylation-specific polymerase chain reac-tion(MSP).The DACT1 mRNA transcript levels and DACT1 protein levels in all samples were then evaluated to define the relationship between the methylation status of the DACT1 promoter and its expression at the transcrip-tional and translational levels.Decreased expression of DACT1 was detected in 89.66% of urothelial carcinomas(26/29;P 〈 0.005).Promoter hypermethylation was found in 58.62%(17/29) urothelial carcinomas and 25%(7/29) normal tissues,respectively(P 〈 0.05).DACT1 expression was lower in tissues where the DACT1 gene promoter was hypermethylated than in unmethylated tissues(0.25±0.17 vs 0.69±0.30,P 〈 0.05).DACT1 gene hyper-methylation was closely related to tumor size,grade and stage(P 〈 0.05).Our results indicate that silencing and downregulation of DACT1 mRNA may be implicated in carcinogenesis and the progression of bladder urothelial carcinoma,and may be a potential prognostic factor. 展开更多
关键词 DNA methylation dact1 HYPERMETHYLATION bladder urothelial carcinoma
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过表达DACT1通过调节凋亡相关蛋白对人白血病细胞增殖的抑制作用研究
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作者 刘敬东 王亚文 张峰 《临床和实验医学杂志》 2019年第18期1923-1926,共4页
目的研究过表达DACT1通过调节凋亡相关蛋白对人白血病细胞增殖的抑制作用。方法在人白血病K562细胞中,通过基因转染试剂对空载质粒vector与DACT1质粒分别进行转染,分别作为阴性对照组与观察组,并使DACT1呈现过表达。另设置一组未经任何... 目的研究过表达DACT1通过调节凋亡相关蛋白对人白血病细胞增殖的抑制作用。方法在人白血病K562细胞中,通过基因转染试剂对空载质粒vector与DACT1质粒分别进行转染,分别作为阴性对照组与观察组,并使DACT1呈现过表达。另设置一组未经任何处理的细胞为空白对照组。通过流式细胞术、CCK-8法对DACT1过表达后K562细胞周期、增殖、凋亡的影响进行检测。并采用Western blot法对DACT1过表达后调节凋亡相关蛋白的表达进行检测。结果观察组克隆形成率为(6. 33±0. 98)%,较空白对照组(20. 74±3. 12)%、阴性对照组(20. 43±3. 32)%均明显降低(P <0. 05)。细胞增殖实验结果发现,观察组细胞增殖活性较空白对照组、阴性对照组均显著降低。观察组细胞凋亡率为(28. 97±3. 04)%,较空白对照组(0. 85±0. 12)%、阴性对照组(0. 83±0. 09)%均显著升高(P <0. 05)。观察组细胞G0/G1期比例较空白对照组、阴性对照组显著增加(P <0. 05)。观察组半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)等促凋亡蛋白表达较空白对照组和阴性对照组均显著上调,而B淋巴细胞癌-2(Bcl-2)等抗凋亡蛋白的表达较空白对照组和阴性对照组均显著降低。结论在人白血病K562细胞中,DACT1过表达可阻滞细胞增殖,促使细胞凋亡,亦会影响细胞周期,使得细胞出现G0/G1期阻滞。分析其原因,可能与DACT1过表达具有潜在的抗肿瘤作用,其作用机制可能与上调促凋亡蛋白(caspase-3、caspase-9、Bcl-2)表达和抑制抗凋亡蛋白(Bcl-2)表达密切相关。 展开更多
关键词 白血病 dact1 凋亡相关蛋白 细胞增殖
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DACT1、β-catenin在儿童支气管哮喘中的作用及意义
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作者 彭晶 《检验医学与临床》 CAS 2019年第5期675-677,共3页
目的探讨DACT1、β-catenin在儿童支气管哮喘中的作用及意义。方法收集38例支气管哮喘患儿以及35例健康体检的儿童临床资料,采用M276407肺功能仪检测FEV1、FEV1/FVC、FEF25%~75%、FEF50%、FEF75%,同时检测FeNO,记录IL-6和Eos水平。qRT-... 目的探讨DACT1、β-catenin在儿童支气管哮喘中的作用及意义。方法收集38例支气管哮喘患儿以及35例健康体检的儿童临床资料,采用M276407肺功能仪检测FEV1、FEV1/FVC、FEF25%~75%、FEF50%、FEF75%,同时检测FeNO,记录IL-6和Eos水平。qRT-PCR检测DACT1、β-catenin mRNA的表达,采用Pearson进行相关性分析。结果观察组患儿的FEV1、FEV1/FVC、FEF25%~75%、FEF50%、FEF75%等均明显低于对照组,而FeNO、Eos、IL-6等明显高于对照组(P<0.05),DACT1mRNA水平明显高于对照组,β-catenin mRNA水平明显低于对照组(P<0.05)。DACT1mRNA的表达与FEV1、FEV1/FVC、FEF25%~75%、FEF50%、FEF75%等指标呈现负相关(P<0.05),与FeNO、IL-6和Eos呈正相关(P<0.05)。β-catenin mRNA的表达与FEV1、FEV1/FVC、FEF25%~75%、FEF50%、FEF75%等指标呈现正相关(P<0.05),与FeNO、IL-6和Eos呈负相关。结论哮喘患儿DACT1表达上调,抑制β-catenin的表达和核转位,并促进IL-6等炎性因子的表达,促进哮喘的发生和进展。 展开更多
关键词 dact1 Β-CATENIN 儿童 支气管哮喘
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青黄散联合健脾补肾方对骨髓增生异常综合征患者DACT1基因甲基化及Wnt/β-catenin通路的影响 被引量:7
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作者 高飞 许勇钢 +2 位作者 王洪志 王德秀 麻柔 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期3362-3366,共5页
目的:探讨青黄散联合健脾补肾方对骨髓增生异常综合征(MDS)患者DACT1基因甲基化及Wnt/β-catenin通路的影响。方法:亚硫酸氢盐测序法检测30例MDS患者治疗前后骨髓DACT1基因甲基化状态、RTPCR检测治疗前后DACT1 mRNA及β-catenin mRNA变... 目的:探讨青黄散联合健脾补肾方对骨髓增生异常综合征(MDS)患者DACT1基因甲基化及Wnt/β-catenin通路的影响。方法:亚硫酸氢盐测序法检测30例MDS患者治疗前后骨髓DACT1基因甲基化状态、RTPCR检测治疗前后DACT1 mRNA及β-catenin mRNA变化。结果:治疗前MDS骨髓标本中,DACT1基因启动子区S1片段呈高甲基化状态,为15.21%,经青黄散联合健脾补肾方治疗后呈低甲基化状态,为5.45%(P<0.01)。治疗后DACT1 mRNA相对表达量由0.69±0.41升至1.83±2.01,较治疗前显著增加(P<0.01);β-catenin mRNA相对表达量治疗前后差异无统计学意义。结论:青黄散联合健脾补肾方通过DACT1基因去甲基化的作用效应,可能主要通过激活下游其他通路实现抑癌作用。 展开更多
关键词 青黄散 健脾补肾方 骨髓增生异常综合征 dact1基因 甲基化 WNT/Β-CATENIN通路
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DACT1在结肠癌中的表达及其作用 被引量:1
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作者 王重凯 袁国红 付卫 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2011年第12期3432-3435,共4页
目的探讨DACT1在结肠癌中的表达及其对结肠癌细胞SW480增殖、迁移和侵袭的影响。方法 Western blot检测DACT1在结肠癌组织中的表达;CCK-8进行细胞增殖实验;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;用Transwell小室法检测细胞转染前后侵袭力改变... 目的探讨DACT1在结肠癌中的表达及其对结肠癌细胞SW480增殖、迁移和侵袭的影响。方法 Western blot检测DACT1在结肠癌组织中的表达;CCK-8进行细胞增殖实验;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;用Transwell小室法检测细胞转染前后侵袭力改变。结果 21例结肠癌组织中有14例DACT1表达增高,DACT1高表达的SW480增殖能力明显增强(P<0.05),细胞划痕后24h,DACT1高表达的细胞划痕宽度恢复70%,而对照组划痕宽度恢复20%(P<0.05)。实验组SW480细胞侵袭数量明显高于对照组(P<0.05)。结论 DACT1在结肠癌中高表达并促进结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 细胞增殖 细胞运动 肿瘤浸润 dact1
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DACT1在乳腺癌组织的表达及临床意义
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作者 刘瑞明 焦举 +1 位作者 黄群爱 刘瑞磊 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2810-2812,共3页
目的 探讨DACT1在乳腺癌及癌旁组织中的表达及与其他临床病理特征的相关性,并分析其与术后生存数据的关系.方法 检测120例乳腺癌组织及68例癌旁组织中DACT1的表达,比较两组表达率的差异,以及实验组DACT1表达水平与其他临床病理指标的相... 目的 探讨DACT1在乳腺癌及癌旁组织中的表达及与其他临床病理特征的相关性,并分析其与术后生存数据的关系.方法 检测120例乳腺癌组织及68例癌旁组织中DACT1的表达,比较两组表达率的差异,以及实验组DACT1表达水平与其他临床病理指标的相关性.结果 乳腺癌DACT1的阳性表达率(18.3%)显著低于癌旁组织(56.2%,P<0.05).相关分析结果显示,DACT1表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期、组织学分级、雌激素受体(ER)、人类表皮生长因子受体2(Her-2)存在明显相关(P<0.05);但与年龄及孕激素受体(PR)表达无明显相关(P>0.05).生存分析显示,DACT1蛋白表达水平高的乳腺癌患者预后较DACT1低表达水平的患者好(P<0.05).结论 DACT1在乳腺癌组织中的表达较癌旁组织中明显降低,且随着肿瘤大小的增大、淋巴结转移的出现、组织学分级及临床分期的增高而表达下降,并与ER表达呈正相关,与Her-2表达呈负相关,其高表达的患者预后较好,表明其可能在乳腺癌的发生发展中发挥重要作用. 展开更多
关键词 dact1 免疫组织化学 乳腺癌
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肾透明细胞癌中β-环连蛋白抑制基因1启动子CpG岛甲基化与其失表达相关
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作者 程欢 王增军 苏建堂 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1266-1269,共4页
目的:探讨肾透明细胞癌中β-环连蛋白抑制基因1(dapper homolog 1,antagonist of beta-catenin,Dact1)表达与其启动子CpG岛甲基化状态的关系,并探究他们之间的关系及在肾透明细胞癌发生中的作用。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)... 目的:探讨肾透明细胞癌中β-环连蛋白抑制基因1(dapper homolog 1,antagonist of beta-catenin,Dact1)表达与其启动子CpG岛甲基化状态的关系,并探究他们之间的关系及在肾透明细胞癌发生中的作用。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)分别检测30例癌组织及相应的癌旁对照组织中Dact1基因mRNA的表达和其启动子甲基化状态。结果:癌组织组中,19例Dact1基因mRNA失表达(63%),7例表达低于癌旁对照组(23%);癌旁对照组织组中,2例Dact1基因mRNA低表达(6%)。Dactl基因在癌组织、癌旁对照组织中的甲基化阳性率分别为70%、6%,2组比较差异有统计学意义(P<O.001),Dactl基因mRNA的失表达或低表达与其启动子甲基化状态的相关性分析有统计学意义(P<0.05)。结论:Dact1基因mRNA的失表达或低表达可能参与了肾透明细胞癌的发生发展,其失表达可能与Dactl启动子区异常甲基化相关。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 dact1 启动子 甲基化
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