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泽兰有效部分L.F04对红细胞流变学的影响 被引量:14
1
作者 石宏志 高南南 +3 位作者 李勇枝 余竞光 范全春 白桂娥 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期331-334,共4页
目的研究泽兰有效部分L .F0 4对红细胞流变学的影响 ,以探讨其活血化瘀作用机理。方法用高分子右旋糖酐静脉推注造成大鼠血瘀证动物模型 ,观察泽兰L .F0 4对红细胞变形性、聚集性和膜流动性的影响。结果高分子右旋糖酐造成了大鼠红细胞... 目的研究泽兰有效部分L .F0 4对红细胞流变学的影响 ,以探讨其活血化瘀作用机理。方法用高分子右旋糖酐静脉推注造成大鼠血瘀证动物模型 ,观察泽兰L .F0 4对红细胞变形性、聚集性和膜流动性的影响。结果高分子右旋糖酐造成了大鼠红细胞变形性降低 (P <0 .0 5 ) ,聚集性增高 (P <0 .0 1 ) ,膜流动性降低 (P <0 .0 5 )。与模型组相比 ,L .F0 4大 ( 0 .61 2 g/kg)、小 ( 0 .30 6g/kg)剂量明显改善了红细胞变形性(P <0 .0 5 ) ,抑制了红细胞聚集 (P <0 .0 5 ) ;对红细胞膜流动性有增加的趋势 ,但未呈现出量效关系。结论L .F0 4可显著改善血瘀动物异常的红细胞流变学指标。 展开更多
关键词 泽兰 泽兰l.f04 血瘀 红细胞流变学 变形性 聚集性 流动性 活血化瘀
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推进剂松弛模量主曲线及W.L.F.方程参数的拟合处理 被引量:9
2
作者 胡全星 姜豫东 +1 位作者 李健 富婷婷 《固体火箭技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第2期46-48,共3页
依照最小二乘法原理,提出了由试验数据拟合出推进剂松弛模量主曲线及W.L.F.方程中参数的方法,建立了统一的松弛模量主曲线拟合模型。讨论了QJ2487 93《复合固体推进剂单向拉伸应力松弛模量及主曲线测定方法》标准中所提出的方法,对有关... 依照最小二乘法原理,提出了由试验数据拟合出推进剂松弛模量主曲线及W.L.F.方程中参数的方法,建立了统一的松弛模量主曲线拟合模型。讨论了QJ2487 93《复合固体推进剂单向拉伸应力松弛模量及主曲线测定方法》标准中所提出的方法,对有关方法进行了对比。文中提出的方法有待于在进一步应用中检验。 展开更多
关键词 固体推进剂 松弛模量 主曲线 W.l.f.方程 最小二乘法
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实时荧光定量PCR检测猴痘病毒的方法研究
3
作者 冯俊霞 陈锦峰 +3 位作者 崔晓虎 夏语嫣 薛冠华 袁静 《遵义医科大学学报》 2024年第5期508-512,521,共6页
目的建立猴痘病毒(mpox virus)的实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测方法。方法以猴痘病毒F3L基因为靶序列,设计特异性引物和探针,建立猴痘病毒RT-PCR检测方法,并对方法的灵敏度、特异性和重复性进行检测;对疑似猴痘阳性的人脓拭子临床样本核... 目的建立猴痘病毒(mpox virus)的实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测方法。方法以猴痘病毒F3L基因为靶序列,设计特异性引物和探针,建立猴痘病毒RT-PCR检测方法,并对方法的灵敏度、特异性和重复性进行检测;对疑似猴痘阳性的人脓拭子临床样本核酸进行检测,对RT-PCR方法检测临床样本能力进行评价。结果本研究建立的RT-PCR检测方法可实现猴痘病毒的特异性检测,与天花、痘苗、牛痘等其他正痘病毒无交叉反应,检测重复性好,最低检测限为103copies/μL。可以对人皮肤拭子样本中的猴痘病毒进行准确检测。结论本研究建立了猴痘病毒的RT-PCR检测方法,可在临床样本中快速、特异、灵敏的检测猴痘病毒。 展开更多
关键词 猴痘病毒 实时荧光定量PCR 快速检测方法 F3L基因
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羊口疮病毒F1L基因真核表达载体的构建及鉴定
4
作者 蒋尊 安红艳 +3 位作者 孙创奇 葛佳仪 梁倩 鲜思美 《贵州畜牧兽医》 2024年第1期57-59,共3页
为构建羊口疮病毒F1L基因的真核表达载体,以ORFV-DZ分离株基因组作为模板,PCR特异性扩增F1L基因,扩增产物与pEGFP-N1质粒连接构建重组质粒pEGFP-F1L,经测序和酶切验证的阳性重组子转染HEK-293t细胞进行表达,通过荧光显微镜观察和Western... 为构建羊口疮病毒F1L基因的真核表达载体,以ORFV-DZ分离株基因组作为模板,PCR特异性扩增F1L基因,扩增产物与pEGFP-N1质粒连接构建重组质粒pEGFP-F1L,经测序和酶切验证的阳性重组子转染HEK-293t细胞进行表达,通过荧光显微镜观察和Western blotting对融合蛋白的表达进行鉴定。结果:PCR产物长度为1 029 bp,与F1L基因片段长度相符;阳性重组质粒pEGFP-F1L转染HEK-293t细胞可观察到明显绿色荧光,表达的融合蛋白大小约65 ku,与预期相符。结论:试验成功构建了pEGFP-F1L真核表达载体。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 F1L基因 真核表达载体
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赤芝提取物的抗氧化美白及细胞增殖作用研究
5
作者 木开代斯·买合木提 陈建 +1 位作者 焦春伟 谢意珍 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第7期949-956,共8页
目的:研究赤芝提取物(GLE)抗氧化美白及细胞增殖作用。方法:以测定GLE中糖类含量,体外1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除力、蘑菇酪氨酸酶活性抑制力、抑制B16F10细胞黑色素... 目的:研究赤芝提取物(GLE)抗氧化美白及细胞增殖作用。方法:以测定GLE中糖类含量,体外1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除力、蘑菇酪氨酸酶活性抑制力、抑制B16F10细胞黑色素合成及酪氨酸酶活性抑制、结晶紫实验和划痕实验为评价指标,研究GLE抗氧化美白及对L929成纤维细胞增殖的作用。结果:GLE中富含总糖、多糖,GLE相较于β-熊果苷对DPPH自由基和ABTS自由基表现出较弱的清除作用,其自由基清除率半抑制浓度(IC 50)分别为1.6 mg/mL和1.2 mg/mL;对蘑菇酪氨酸酶活性有很强的抑制能力,基于α-MSH促黑激素细胞表型造模实验显示,0.4 mg/mL和0.8 mg/mL的GLE具有显著抑制B16F10细胞酪氨酸酶活性以及黑色素生成的作用;GLE具有促进L929成纤维细胞增殖作用。结论:GLE是美白及功能食品开发利用领域的候选者。 展开更多
关键词 赤芝提取物 酪氨酸酶活性 B16F10细胞 黑色素 自由基 抗氧化 增殖 L929成纤维细胞
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仰卧起坐计数设备的无线组网设计
6
作者 王奕智 华志远 +1 位作者 李全彬 臧秋华 《物联网技术》 2024年第4期38-42,共5页
仰卧起坐作为大学生体测项目之一,实践中存在测试速度慢、监测工作量大、人为因素影响大等痛点,迫切需要便携式、智能化计数设备并能实现多点无线组网工作。采用国产CH32单片机结合nRF24L01通信模块,借助MPU6050角度传感器,设计实现了... 仰卧起坐作为大学生体测项目之一,实践中存在测试速度慢、监测工作量大、人为因素影响大等痛点,迫切需要便携式、智能化计数设备并能实现多点无线组网工作。采用国产CH32单片机结合nRF24L01通信模块,借助MPU6050角度传感器,设计实现了准确进行仰卧起坐计数的设备,包括用于仰卧起坐计数的手环设备和进行组网控制和数据统计的终端设备。通过无线组网技术,同时实现控制终端和多个手环之间的命令分发与信息收集,并实时交换测试数据,最后将数据经过蓝牙传送到手机APP,方便监考人员处理与统计。本设备计数准确,在突发网络中断时,恢复通信后可无损恢复测试数据,鲁棒性好,可有效减少仰卧起坐项目的考试工作量,消除人为干扰因素,提高体测效率。 展开更多
关键词 仰卧起坐计数 CH32F103C8T6 MPU6050 NRF24L01 无线组网 蓝牙传输 OLED 并行工作
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基于物联网的激光测距系统
7
作者 周泰 张琥石 +3 位作者 林伟龙 覃茂昌 梁妮 韦妙灵 《物联网技术》 2024年第6期21-23,27,共4页
文中提出了一种基于物联网的激光测距系统,该系统主要由STM32F103单片机、ATK-MS53L1M激光测距模块和ATK-HC05蓝牙通信模块构成。该系统利用ATK-MS53L1M模块对目标进行测距,数据传给单片机程序进行处理,最终通过ATK-HC05模块将目标距离... 文中提出了一种基于物联网的激光测距系统,该系统主要由STM32F103单片机、ATK-MS53L1M激光测距模块和ATK-HC05蓝牙通信模块构成。该系统利用ATK-MS53L1M模块对目标进行测距,数据传给单片机程序进行处理,最终通过ATK-HC05模块将目标距离信息传输到移动终端。该系统具有数据稳定性高、精度高、响应速度快等特点,在室内和室外的测距实验中,取得了较好的测距效果,为人们研究和开发更加智能化的物联网应用提供了一定的参考。 展开更多
关键词 STM32 ATK-HC05蓝牙通信模块 激光测距 物联网 ATK-MS53L1M STM32F103RCT6
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Two new steroidal glucosides from Ophiopogon japonicus (L.f.) Ker-Gawl 被引量:2
8
作者 Ya Jiuan Xu Tun Hai Xu +5 位作者 Ling Zhu Hao Hong Feng Zhao Sheng Xu Xie Yun Shan Si Dong Han Dong Ming Xu 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2008年第7期825-828,共4页
Two new steroidal glucosides, 26-O-β-D-glucopyranosyl (25S)-furost-5-ene-1β,3β,22α,26-tetraol l-O-β-D-xylopyranosyl- (1 → 3)-[α-h-rhamnopyranosyl-(1 → 2)]-[β-D-fueopyranoside and (25R) spirost-5-ene-3... Two new steroidal glucosides, 26-O-β-D-glucopyranosyl (25S)-furost-5-ene-1β,3β,22α,26-tetraol l-O-β-D-xylopyranosyl- (1 → 3)-[α-h-rhamnopyranosyl-(1 → 2)]-[β-D-fueopyranoside and (25R) spirost-5-ene-3β,14α-diol-3-β-O-β-L-rhanmopyranosyl- (1 → 2)-[β-D-xylopyranosyl(1 → 4)]-[-β-D-glucopyranoside, were isolated from the Ophiopogon japonicus (L.f.) Ker-Gaw. Their structures were elucidated by spectroscopic methods. 展开更多
关键词 Ophiopogon japonicus l.f.) Ker-Gawl Steroidal glucosides LILIACEAE
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Effects of L.F04,the Active Fraction of Lycopus lucidus, on Erythrocytes Rheological Property 被引量:3
9
作者 石宏志 高南南 +4 位作者 李勇枝 余竞光 范全春 白桂娥 辛冰牧 《Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Medicine》 2005年第2期132-135,共4页
Objective: To study the effects of L.F04, the active fraction of Lycopus lucidus, on erythrocytes rheological property so as to investigate its mechanism in promoting blood circulation and removing blood stasis. Metho... Objective: To study the effects of L.F04, the active fraction of Lycopus lucidus, on erythrocytes rheological property so as to investigate its mechanism in promoting blood circulation and removing blood stasis. Method: The effects of L.F04 (used for treatment for 10 days in different dosages) on deformability, aggregation and membrane liquidity of erythrocytes (MLE) as well as whole blood apparent viscosity (η_b) were examined on the basis of rat model of blood-stasis syndrome induced by venous injection of high molecular weight dextran. Result: As compared with the normal control group, the model group's RBC deformability and MLE were lower, and the aggregation of erythrocytes and η_b were higher. Compared with the model group, both L.F04 0.612g/kg and 0.306g/kg showed significant effect in improving deformability and inhibiting aggregation of red blood cells (RBC) and reducing blood viscosity. The trend of improving MLE was also shown. Conclusion: L.F04 could significantly improve the abnormal rheological property of erythrocytes. 展开更多
关键词 Lycopus lucidus blood-stasis deformability of erythrocytes aggregation of erythrocytes membrane liquidity of erythrocytes whole blood apparent viscosity l.f04
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Response of a Submersed Macrophyte Hydrilla verticillata (L.f) Royle,to Sodium Dodecylbenzene Sulfonate Stress
10
作者 ZHAO Qiang WU Zhenbin +1 位作者 CHENG Shuiping HE Feng 《Wuhan University Journal of Natural Sciences》 CAS 2008年第2期221-226,共6页
The acute toxicity of Sodium dodecylbenzene sulfonate (SDBS) to subcamersed macrophyte Hydrilla verticillata (L.f) Royle was studied. Chlorophyll contents and the activities of 3 antioxidant enzymes: superoxide d... The acute toxicity of Sodium dodecylbenzene sulfonate (SDBS) to subcamersed macrophyte Hydrilla verticillata (L.f) Royle was studied. Chlorophyll contents and the activities of 3 antioxidant enzymes: superoxide dismutase (SOD, EC 1.15.1.1), catalase (CAT, EC 1.11.1.6), peroxidase (POD, EC 1.11.1.7) in the leaves were investigated under different concentrations of SDBS, The chlorophyll contents in leaves of experimental plants decreased gradually, while the electrical conductivity of culture solution increased gradually with the increased dose of SDBS. Under higher concentrations of SDBS (32 mg/L and 128 mg/L) treatment, SOD lost its activities completely after 24 h. The native PAGE analysis indicated the diversity of POD isoenzymes was obvious under different concentrations of SDBS stress. 展开更多
关键词 sodium dodecylbenzene sulfonate TOXICITY Hydrilla verticillata l.f rovle enzyme activity
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生物化学家莱洛伊尔L.F.
11
作者 Santiago G. 张息珍 《生命科学》 CSCD 1989年第2期40-40,共1页
著名生化学家莱洛伊尔L.F.(Leloir Luis F.)生于1906年,死于1987年12月4日。他的初期贡献之一且立即引人注目的,是发现了葡萄糖-1,6-二磷酸及葡萄糖-1,6-二磷酸作为磷酸葡萄糖变位酶辅助因子的作用。效仿于此,科里、萨瑟兰和帕斯特纳克... 著名生化学家莱洛伊尔L.F.(Leloir Luis F.)生于1906年,死于1987年12月4日。他的初期贡献之一且立即引人注目的,是发现了葡萄糖-1,6-二磷酸及葡萄糖-1,6-二磷酸作为磷酸葡萄糖变位酶辅助因子的作用。效仿于此,科里、萨瑟兰和帕斯特纳克一起,提出作为磷酸甘油酸变位酶的2,3双二磷酸甘油酸的类似作用的提议。 展开更多
关键词 莱洛伊尔 l.f 生物化学家 二磷酸 生化学 辅助因子 科里 磷酸甘油酸 特纳 萨瑟兰
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黄檀属植物的分布、化学成分及药用价值概况
12
作者 甄丹丹 韦金玲 +4 位作者 丘琴 李文秀 陈科成 张淼 甄汉深 《壮瑶药研究》 2023年第1期62-64,311,共4页
黄檀属植物含有黄酮类、甾醇类以及三萜类等活性成分;具有抗氧化、抗炎、抗菌、成骨活性、脑保护作用、止泻等药理作用。因此,应充分利用黄檀属植物的药用价值,对它进行进一步的研究、开发和利用。
关键词 黄檀属植物 分布 化学成分 药理作用
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非洲猪瘟病毒B646L和F778R双基因PCR检测方法的构建
13
作者 王慧 钟菊花 +3 位作者 杨俊 杜丽飞 王红兵 刘俊琦 《激光生物学报》 CAS 2023年第6期554-560,共7页
为建立一种能够快速检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的普通PCR方法,本研究分别以ASFV B646L和F778R基因为靶序列设计了两对特异性引物,建立ASFV B646L和F778R双基因普通PCR方法,并对其特异性、灵敏性及重复性进行检测。结果显示:该PCR体系(25.0... 为建立一种能够快速检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的普通PCR方法,本研究分别以ASFV B646L和F778R基因为靶序列设计了两对特异性引物,建立ASFV B646L和F778R双基因普通PCR方法,并对其特异性、灵敏性及重复性进行检测。结果显示:该PCR体系(25.0μL体系)的最优组合为Pfu酶0.2μL、10×Reaction Buffer 2.5μL、2.5 mmol/L d NTP Mixture 2.5μL、B646L上下游引物各1.5μL、F778R上下游引物各0.5μL、DNA模板1.0μL;退火温度为57℃、退火时间为30 s、72℃延伸2.5 min,30个循环。该方法仅针对ASFV B646L和F778R基因进行特异性扩增,无交叉反应。同时对B646L和F778R阳性质粒的最低检测下限分别为7.2×10^(7)copies/μL、1.5×10^(6)copies/μL,试验重复性良好。本研究对于提高ASFV临床诊断的准确性、特异性和高效性具有重要价值,为其快速检测提供了可靠的技术支撑。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 多重PCR B646L基因 F778R基因 快速检测
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羊口疮病毒B2L和F1L截短融合基因原核表达产物的免疫原性分析
14
作者 鲜思美 郑维豪 +7 位作者 梁倩 张友 杨倩 顾庆林 包涛涛 青成欣 杜鹏 邱进杰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期185-190,共6页
为分析羊口疮病毒(OrfV)B2L和F1L截短融合基因表达蛋白的反应原性,本研究分别选取B2L、F1L基因序列的主要抗原区域,采用重叠延伸PCR将二者融合后克隆至原核表达载体pET-32a中,构建重组质粒pET-32a-B2L-F1L,通过PCR、双酶切和测序鉴定,... 为分析羊口疮病毒(OrfV)B2L和F1L截短融合基因表达蛋白的反应原性,本研究分别选取B2L、F1L基因序列的主要抗原区域,采用重叠延伸PCR将二者融合后克隆至原核表达载体pET-32a中,构建重组质粒pET-32a-B2L-F1L,通过PCR、双酶切和测序鉴定,结果显示获得1080 bp的B2L-F1L融合基因目的片段,测序结果经比对分析正确无误,表明正确构建了重组表达质粒pET-32a-B2L-F1L。将pET-32a-B2L-F1L转化BL21(DE3)后经IPTG诱导,SDS-PAGE检测结果显示表达了39 ku的重组蛋白rB2L-F1L。采用Ni-IDA亲和层析方法纯化重组蛋白,经western blot鉴定,结果显示获得39 ku的单一特异性条带,表明rB2L-F1L的纯化效果和免疫原性均较好。采用rB2L-F1L纯化蛋白皮下多点注射免疫羔羊,采用ELISA方法检测免疫后不同时间羔羊血清中的OrfV抗体、IL-2、IFN-γ和IL-4细胞因子。结果显示,与生理盐水组相比,rB2L-F1L能够诱导羔羊产生OrfV特异性抗体,并可显著或极显著诱导羔羊分泌IL-2、IFN-γ和IL-4细胞因子(P<0.05、P<0.01);与弱毒活疫苗组比较,除在免疫后14 d~28 d时rB2L-F1L诱导羔羊产生的IL-2水平显著低于弱毒活疫苗组外(P<0.05),其他细胞因子在各时段两组均无显著差异(P>0.05)。本研究首次将OrfV优势抗原基因融合表达并分析了融合蛋白的免疫原性,为OrfV的检测技术和基因工程亚单位疫苗的研发奠定了良好基础。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 B2L基因 F1L基因 截短表达 免疫原性分析
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Bna-miR43-FBXL调控模块参与甘蓝型油菜铝胁迫的功能分析 被引量:1
15
作者 张盈川 吴晓明玉 +8 位作者 陶保龙 陈丽 鲁海琴 赵伦 文静 易斌 涂金星 傅廷栋 沈金雄 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1211-1221,共11页
在酸性土壤中,铝是制约作物生长和产量的一个重要因素,如何利用酸性土地意义重大。本研究的对象是前期本课题鉴定到的一个未被报道的miRNA——Bna-miR43。系统地对甘蓝型油菜中Bna-miR43及其靶基因进行生物信息学分析以及表达模式鉴定,... 在酸性土壤中,铝是制约作物生长和产量的一个重要因素,如何利用酸性土地意义重大。本研究的对象是前期本课题鉴定到的一个未被报道的miRNA——Bna-miR43。系统地对甘蓝型油菜中Bna-miR43及其靶基因进行生物信息学分析以及表达模式鉴定,并构建Bna-miR43过表达载体探讨了Bna-miR43-FBXL模块在甘蓝型油菜响应铝胁迫的分子机制。5’-RACE结果表明Bna-miR43在甘蓝型油菜中真实切割BnaA09g03940D、BnaCnng24950D。生物信息学分析表明,BnaA09g03940D、BnaCnng24950D在拟南芥中的同源基因为AT5G27950,编码含F-box的E3泛素连接酶。qRT-PCR结果显示,Bna-miR43及其靶基因在甘蓝型油菜不同组织以及铝胁迫瞬时处理下的表达水平存在此消彼长的现象。油菜转基因试验表明,Bna-miR43的过表达株系地上部分长势良好,体内积累了较少的MDA和H2O2,同时转基因植株根系的铝积累量较对照少。本研究结果为甘蓝型油菜中铝胁迫响应提供参考。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 Bna-miR43 F-BOX 铝胁迫
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99份苦荞主要农艺性状评价与筛选 被引量:1
16
作者 刘丽 柴敏 +6 位作者 韩伟 郄启阳 冯晓龙 那冬晨 周元成 曹艳玲 王祎玲 《农学学报》 2023年第7期25-31,共7页
为了对苦荞的主要农艺性状进行综合评价,筛选优质苦荞品种,以99份苦荞(国外51份、国内48份)为试验材料,通过变异分析、相关分析和综合得分F值等方法对99份苦荞的11个农艺性状进行分析。结果表明:苦荞11个农艺性状间存在较大变异,变异系... 为了对苦荞的主要农艺性状进行综合评价,筛选优质苦荞品种,以99份苦荞(国外51份、国内48份)为试验材料,通过变异分析、相关分析和综合得分F值等方法对99份苦荞的11个农艺性状进行分析。结果表明:苦荞11个农艺性状间存在较大变异,变异系数均大于0.1;单株粒重、单株粒数、千粒重和株高与籽粒产量呈极显著正相关;主成分分析显示,前4个主成分的累计贡献率为73.234%,第一主成分中负有最高荷载的为单株粒数和单株粒重;聚类分析将99份苦荞分为6个类群,其中类群Ⅳ的18份品种性状优良,可作为核心种质资源。苦荞选育时应重点考虑单株粒数和单株粒重2个性状指标。综合聚类分析和综合得分F值筛选出23份高产优质苦荞,其中12份为国外引进品种。 展开更多
关键词 苦荞 农艺性状 籽粒产量 综合得分F值 筛选
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隧道防汛监控预警系统设计 被引量:1
17
作者 李明 董晨乐 +1 位作者 杨延宁 董军堂 《计算机测量与控制》 2023年第8期251-258,共8页
下穿式隧道是城市交通中快速通道的重要形式,但在雨季汛期容易发生积水现象,影响交通安全和效率;目前常用的隧道积水检测方法存在测量不准确、反应不及时、维护成本高等;为了实现下穿式隧道水位的实时监测预警,设计了一种基于STM32F103C... 下穿式隧道是城市交通中快速通道的重要形式,但在雨季汛期容易发生积水现象,影响交通安全和效率;目前常用的隧道积水检测方法存在测量不准确、反应不及时、维护成本高等;为了实现下穿式隧道水位的实时监测预警,设计了一种基于STM32F103C8T6主控芯片、HC-SR04超声波传感器和nRF24L01通信模块的水位检测系统;从机位负责采集隧道口易积水地区的水位高度,并通过无线方式发送给主机位;主机位负责接收并处理水位信息,并在OLED12864显示屏上显示实时水位及相应警告;该系统具有测量精度高、响应速度快、功耗低、安装简便等特点;实验结果表明,该系统能够准确地测量隧道口易积水地区的水位高度,并在OLED12864显示屏上显示相应警告信息,达到了预期效果;为下穿式隧道积水检测提供了一种新颖有效的解决方案,并为其他类似场景中的水位监测提供了参考。 展开更多
关键词 隧道防汛 STM32F103C8T6 HC-SR04 NRF24L01 水位监测
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135位点表达ORFVF1L基因的重组山羊痘病毒的构建
18
作者 余远迪 牟豪 +3 位作者 张阳 郑华 李幸 付利芝 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第8期1808-1813,共6页
【目的】采用Cre/Loxp基因编辑系统,在羊痘病毒135基因位点插入ORFV外源基因F1L,同时引入标记基因,从而构建重组山羊痘病毒,为临床上预防羊口疮疫苗的设计、研制提供参考。【方法】以pDonor载体为基础,135基因编码区两侧500 bp左右的片... 【目的】采用Cre/Loxp基因编辑系统,在羊痘病毒135基因位点插入ORFV外源基因F1L,同时引入标记基因,从而构建重组山羊痘病毒,为临床上预防羊口疮疫苗的设计、研制提供参考。【方法】以pDonor载体为基础,135基因编码区两侧500 bp左右的片段作为上下重组同源臂,中间插入羊口疮病毒F1L基因编码区及标记基因gpt、EGFP、痘病毒早晚期启动子p7.5、p11,并且含有loxp位点,构建同源重组供体质粒命名为pGTPV(135)-ORFV-F1L;并对阳性克隆菌液进行PCR鉴定并测序,经测序正确的菌液接种氨苄LB液体培养基培养过夜,提取去内毒素的质粒并进行双酶切鉴定。山羊痘病毒弱毒株感染永生化山羊睾丸细胞2 h后,重组质粒经脂质体法转染永生化山羊睾丸细胞,观察细胞病变及EGFP标记基因的表达情况;48 h后收获病毒液,反复冻融后离心,盲传3代,通过PCR鉴定目标基因的整合情况,以羊口疮病毒阳性血清为一抗,驴抗山羊IgG为二抗,通过蛋白免疫印迹分析目标基因的表达情况来对获得的重组病毒进行鉴定。【结果】经PCR筛选,成功获得表达羊口疮病毒F1L基因的同源重组供体质粒。经过测序并与目标序列进行比对,结果正确,表明重组质粒成功构建。重组质粒经去内毒素提取后测定浓度并进行双酶切鉴定,结果与预期相符,经鉴定的重组质粒转染山羊睾丸细胞,在48 h后观察到细胞病变及绿色荧光,PCR鉴定结果表明F1L基因整合到重组病毒上。蛋白免疫印迹分析显示,检测到目标蛋白条带,说明重组山羊痘病毒插入的外源基因F1L基因成功表达。【结论】本研究成功构建了一种在135基因位点表达羊口疮病毒F1L基因的重组山羊痘病毒,并在永生化山羊睾丸细胞中,该重组病毒展现出目的基因的稳定表达。以羊痘病毒弱毒株135基因位点插入羊口疮病毒F1L外源基因,该重组病毒在永生化山羊睾丸细胞中获得,目的基因能稳定表达,成功构建135基因位点插入羊口疮病毒F1L基因的重组山羊痘病毒方法。 展开更多
关键词 羊痘病毒 羊口疮病毒 F1L基因 重组病毒
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羊口疮病毒内脏和口唇感染株B2L和F1L基因的比较分析
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作者 吴姣 富国文 +4 位作者 四朗玉珍 曾琴 白卫兵 班旦 樊月圆 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2023年第4期580-586,共7页
【目的】分析内脏和口唇感染羊传染性脓疱病病毒主要致病因子F1L和B2L基因和蛋白的差异,为进一步研究该病毒的致病机制提供参考。【方法】对内脏和口唇感染株F1L和B2L基因进行PCR扩增后克隆测序,运用生物信息学软件对其序列及编码蛋白... 【目的】分析内脏和口唇感染羊传染性脓疱病病毒主要致病因子F1L和B2L基因和蛋白的差异,为进一步研究该病毒的致病机制提供参考。【方法】对内脏和口唇感染株F1L和B2L基因进行PCR扩增后克隆测序,运用生物信息学软件对其序列及编码蛋白的二级结构、磷酸化位点和跨膜结构域进行预测和分析。【结果】内脏株和口唇株的F1L基因长度均为1 564 bp,分别编码342和343个氨基酸;B2L基因长度均为1 370 bp,均编码378个氨基酸。内脏和口唇感染株B2L基因核苷酸序列同源性为97.80%,氨基酸序列同源性为98.15%;两者的F1L基因核苷酸序列同源性为95.49%,氨基酸序列同源性为87.20%。氨基酸组成显示:内脏和口唇感染株B2L蛋白缬氨酸含量最高;口唇株F1L蛋白亮氨酸含量最高,内脏株F1L蛋白精氨酸含量最高。【结论】羊口疮病毒内脏和口唇感染株的B2L基因保守性良好,而F1L基因差异明显,本结果可为进一步研究羊口疮病毒致病机制提供参考。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 口唇感染株 F1L基因 B2L基因 生物信息学分析
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羊口疮病毒SYBR Green I qPCR方法建立及VIR基因的遗传演化分析
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作者 冯星 卢昌杨 +6 位作者 邓亚飞 吴佳颖 苑君君 贺绍君 辛洪雷 刘德义 张留君 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期772-779,共8页
目的为快速、高效、准确地检出羊口疮病毒(ORFV),并进一步明确皖北地区羊群ORFV流行毒株的遗传变异情况。方法本研究基于ORFV F1L基因建立SYBR Green I实时荧光定量PCR(qPCR)方法,对皖北地区羊场开展ORFV检测,并从阳性病料中PCR扩增ORF... 目的为快速、高效、准确地检出羊口疮病毒(ORFV),并进一步明确皖北地区羊群ORFV流行毒株的遗传变异情况。方法本研究基于ORFV F1L基因建立SYBR Green I实时荧光定量PCR(qPCR)方法,对皖北地区羊场开展ORFV检测,并从阳性病料中PCR扩增ORFV的完整VIR基因,直接测序后进行遗传演化分析。结果所建立ORFV SYBR Green I qPCR方法的线性关系良好,R 2=0.994;扩增效率高,E%=95.62%;检测速度快,理论反应时间约15 min;灵敏度较高,检测下限为10 copies/μL,是普通PCR法的100倍;重复性良好,组内和组间变异系数分别为0.44%~1.14%和2.82%~3.16%。用该qPCR方法对采集自皖北地区的168份羊临床样本进行检测,其ORFV阳性率为37.5%(63/168)。PCR扩增阳性样本中ORFV的完整VIR基因并直接测序,共获得52条全长VIR基因序列,其中21条来源于山羊,31条来源于绵羊。52条VIR基因间核苷酸序列及氨基酸序列的一致性分别为95.8%~100.0%和93.5%~100.0%,与参考毒株VIR基因核苷酸序列及氨基酸序列的一致性分别为95.1%~100.0%和91.3%~100.0%。基于ORFV VIR基因的遗传进化树分析显示,本次检测的21株山羊源ORFV毒株与8株国内外山羊源参考毒株和1株人源hChi17.2017参考毒株位于同一大分支,而本次检测的31株绵羊源ORFV毒株与7株国内外绵羊源参考毒株、1株人源hMbu15参考毒株及1株OV-V疫苗毒株位于遗传距离较远的另一大分支。结论建立了用于检测ORFV的高效、快捷、特异、灵敏、稳定的SYBR Green I qPCR方法。从临床样本中检测到的不同宿主来源ORFV的VIR基因间存在较大遗传差异。该研究结果可为ORFV的临床监测、检测、诊断及防控提供参考和指导。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 荧光定量PCR F1L基因 VIR基因 遗传演化分析
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