体外实验验证槲皮素治疗后发性白内障的作用机制

目的通过分子对接技术验证核心成分与核心靶点的结合能,体外实验验证槲皮素(QUE)对TGF-β2诱导的人晶状体上皮细胞(HLE-B3)的作用。方法前期通过网络药理学的方法筛选出丹红化瘀口服液(DHK)治疗后发性白内障(PCO)的核心成分槲皮素(QUE),关键靶点STAT3、JUN、TNF、TGF-β、IL-6、AKT1,利用AutoDock等软件获取核心成分与关键靶点的结合能,通过CCK-8、细胞划痕、RT-qPCR及Western blot等体外实验验证QUE对TGF-β2诱导的HLE-B3的作用。结果QUE与关键靶点STAT3、JUN、TNF、TGF-β、IL-6、AKT1有很好的结合性;体外实验结果表明QUE对TGF-β2诱导的HLE-B3细胞增殖起到抑制作用,且抑制作用呈浓度依赖性;QUE通过上调Bax和下调Bcl-2蛋白表达,发挥治疗PCO的作用。结论QUE可通过多靶点和多通路发挥治疗PCO的作用,为临床治疗提供参考。

丹红化瘀口服液联合胰岛素对早期糖尿病大鼠心肌病的影响

目的:探讨丹红化瘀口服液联合胰岛素对链脲佐菌素(STZ)诱导1型糖尿病大鼠心肌病的影响。方法:采用STZ诱导糖尿病大鼠模型,STZ注射1 w后将造模成功大鼠随机分为4组,即糖尿病模型组、胰岛素组、丹红化瘀口服液组,丹红化瘀口服液与胰岛素联合用药组,另设正常对照组。给药1次/d,连续给药15 w后检测大鼠心脏质量指数,血清LDH、CK、AST、ALT、血脂四项(T-CHO、TG、LDL-C和HDL-C)、葡萄糖和胰岛素水平,糖化血红蛋白。取左心室及胰腺组织切片,HE染色,光镜观察。结果:与模型组比较,联合给药组的心脏质量指数及血清LDH、AST、ALT和HDL-C水平显著降低,同时对胰腺和心肌的病理变化均明显改善。结论:丹红化瘀口服液联合胰岛素对STZ诱导1型糖尿病大鼠心肌病有良好的治疗作用。

丹红化瘀口服液对视网膜缺血再灌注损伤大鼠视网膜中央静脉阻塞症的保护作用及机制研究

目的研究丹红化瘀口服液对视网膜缺血再灌注损伤大鼠模型视网膜中央静脉阻塞症的保护作用及机制。方法通过对前房加压建立大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型,给予阿司匹林和丹红化瘀口服液干预30 d。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠视网膜组织病理变化;采用ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性;采用免疫组化法检测大鼠视网膜组织缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)、血管内皮生长因子(vascular endothelial grown factor,VEGF)和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65蛋白表达情况。结果模型组大鼠视网膜结构紊乱,神经节细胞层细胞减少,视网膜萎缩变薄;丹红化瘀口服液组大鼠视网膜组织结构及神经节细胞变性程度均有所改善。与模型组比较,丹红化瘀口服液组大鼠血清SOD、GSH-Px及CAT活性明显升高(P<0.05、0.01),血清MDA水平显著降低(P<0.05);血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平显著降低(P<0.05、0.01),IL-10水平显著升高(P<0.05、0.01);视网膜组织HIF-l、Caspase-3、NF-κB p65和VEGF阳性表达均显著降低(P<0.05)。结论丹红化瘀口服液对视网膜缺血再灌注损伤大鼠的视网膜结构具有改善作用,对神经节细胞具有保护作用,其作用机制可能与抑制视网膜组织细胞凋亡、抗炎和抑制新生血管生成有关。

丹红化瘀口服液对气滞血瘀证大鼠眼结膜微循环的改善作用及机制研究

目的研究丹红化瘀口服液对气滞血瘀证大鼠眼结膜微循环的改善作用及机制。方法采用复合因素(夹尾、束缚、冰水浴等)建立气滞血瘀证大鼠模型,造模同时给予丹红化瘀口服液和阿司匹林进行干预,3周后观察大鼠眼结膜血管数、微血管交叉数、微血管管径及血流速度;采用ELISA法检测大鼠血清中6-酮-前列腺素F1α(6-keto-prostaglandin F1α,6-keto-F1α)、血栓素B2(thromboxane B2,TXB2)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,c AMP)、环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,c GMP)水平及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)活性;采用微板法测定大鼠血清中一氧化氮(nitric oxide,NO)水平;采用Western blotting法检测大鼠眼结膜组织磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(phosphorylated cAMP response-elementbinding protein,p-CREB)和iNOS蛋白表达情况。结果与模型组比较,丹红化瘀口服液组大鼠微血管管径显著增大(P<0.05),血流速度加快(P<0.05、0.01),血管数和微血管交叉数显著增多(P<0.05、0.01);血小板最大聚集率及血清中TXB2/6-ketoF1α、VEGF、c AMP/cGMP、NO水平和iNOS活性均显著降低(P<0.05、0.01);眼结膜组织p-CREB和iNOS蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01)。结论丹红化瘀口服液对气滞血瘀模型大鼠的眼结膜微循环有改善作用,其作用机制可能与抑制视网膜组织血栓形成、减少细胞自由基生成、抗炎和抑制血管生成有关。

丹红化瘀口服液对视网膜中央静脉阻塞症关键靶点的调节作用

目的采用G蛋白偶联受体及酶活检测实验方法,探究丹红化瘀口服液对视网膜中央静脉阻塞症关键靶点的调节作用,明确其作用机制。方法选取磷酸二酯酶3A(phosphodiesterase 3A,PDE3A)、凝血酶(Thrombin)、内皮素转化酶1(endothelin converting enzyme 1,ECE1)、血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)、α1A肾上腺素受体(α1A adrenergic receptor,ADRA1A)为研究载体,通过胞内钙离子荧光检测和酶抑制剂检测技术评价丹红化瘀口服液及14个主要单体成分对PDE3A、Thrombin、ECE1、VEGFR2酪氨酸激酶和ADRA1A的抑制活性。结果丹红化瘀口服液对以上5个靶点均有显著的抑制作用(P<0.001);丹酚酸D、丹酚酸B、丹参素、迷迭香酸和柚皮苷对PDE3A有显著的抑制作用(P<0.05、0.001);14个化合物对Thrombin均有显著的抑制活性(P<0.05、0.01、0.001);丹酚酸D、丹酚酸B、丹参素、迷迭香酸、阿魏酸、羟基红花黄色素A对ECE1有显著的抑制活性(P<0.05、0.01、0.001);丹酚酸D、丹酚酸B、丹参素、迷迭香酸、柠檬苦素对VEGFR2酪氨酸激酶有显著的抑制效果(P<0.01、0.001);柴胡皂苷a可显著抑制ADRA1A活性(P<0.001)。结论 ADRA1A、VEGFR2、PDE3A、Thrombin和ECE1可能为丹红化瘀口服液治疗中央静脉阻塞症的关键作用靶点,其药效物质基础可能为丹参酮IIA、丹酚酸B、丹酚酸D、丹参素、迷迭香酸、原儿茶醛、阿魏酸、川芎嗪、洋川芎内酯I、羟基红花黄色素A、苦杏仁苷、柴胡皂苷a、柚皮苷和柠檬苦素。

丹红化瘀口服液的二次开发研究

中药大品种二次开发研究是中药创新研究的重要内容,是继承和发展中医药理论、突破制约中医药理论和中药产业发展瓶颈的重要路径。药效物质基础和作用机制研究是中药大品种二次开发的核心内容。对丹红化瘀口服液的药效物质基础和作用机制进行了系统总结,即通过对原料药材、复方制剂以及口服后血中移行成分的系统辨识,阐释丹红化瘀口服液的主要化学物质组和潜在有效成分;进一步通过网络药理学预测分析和相关受体活性测试实验,筛选和明确了其主要药效物质基础;通过与视网膜中央静脉阻塞症相关的整体动物模型、网络药理学分析、相关功能受体结合及酶学检测研究,阐释了丹红化瘀口服液的作用机制,为该药的临床应用和质量控制提供科学依据。

基于网络药理学的丹红化瘀口服液治疗视网膜中央静脉阻塞症的作用机制研究

目的 基于网络药理学探究丹红化瘀口服液治疗视网膜静脉中央阻塞症的作用机制。方法 选取丹红化瘀口服液中的21个入血成分为研究对象,借助TCMSP和CTD数据库预测化合物的作用靶点,利用MAS 3.0生物分子功能软件获取相关通路,通过FUNRICH软件对获得靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析,最后利用Cytoscape软件构建“化合物-靶点-通路-疾病”网络图。结果 21个成分可作用于104个蛋白靶点和45条通路,其中多个靶点和通路与视网膜静脉中央阻塞症相关。结论 丹红化瘀口服液通过作用于与凝血过程、新血管生成、血管舒张、免疫调节和炎症反应等相关的靶点,起到活血化瘀、行气通络的功效,从而治疗视网膜中央静脉阻塞症。

基于网络药理学探讨丹红化瘀口服液治疗深静脉血栓的作用机制

目的 基于网络药理学方法探讨丹红化瘀口服液治疗深静脉血栓(deep vein thrombosis,DVT)的作用机制。方法利用中药系统药理学技术平台数据库(TCMSP)获取丹红化瘀口服液的主要化学成分及作用靶点,利用Uniprot数据库对获取的作用靶点进行规范化处理;通过DisGeNet、GeneCards、OMIM、DrugBank数据库获取DVT相关靶点;利用Venny 2.1.0绘图网站构建Venn图,得到丹红化瘀口服液与DVT的交集靶点;应用String平台构建蛋白质-蛋白质相互作用(proteinprotein interaction,PPI)网络;通过David数据库对交集靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,使用微生信网站绘制结果气泡图,并利用KEGG Mapper平台制作通路机制图;相关结果采用Cytoscape 3.7.2软件进行可视化研究及网络拓扑结构分析。结果 经过数据库分析共筛选丹红化瘀口服液化学成分130个,潜在作用靶点268个,其中涉及DVT靶点136个。“中药-成分-疾病靶点”网络显示,槲皮素、木犀草素、山柰酚等是丹红化瘀口服液治疗DVT的主要活性成分,转录因子AP-1(transcription factor AP-1,JUN)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)等是丹红化瘀口服液治疗DVT的核心靶点。通过GO功能富集分析得到211条生物进程条目,124条分子功能条目,72条细胞成分条目。通过KEGG通路富集分析,得到3条与DVT相关的通路,即胞内磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)-蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)通路、TNF信号通路、缺氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)信号通路。结论 丹红化瘀口服液可通过多成分、多靶点和多通路发挥治疗DVT的作用,为拓宽其临床用途提供基础。

丹红化瘀口服液药理作用及机制的研究进展

丹红化瘀口服液是血府逐瘀汤的加减方,具有活血化瘀、行气通络的功效。临床上,丹红化瘀口服液主要用于气滞血瘀引起的视物模糊不清、突然不见症、视网膜中央静脉阻塞症的吸收期见上述证候者。研究发现丹红化瘀口服液还具有多种作用如抑制血栓形成,延缓糖尿病视网膜病变、糖尿病肾病和糖尿病心肌病的进展,以及促进糖尿病黄斑水肿消退等。通过分析和总结丹红化瘀口服液的药理作用及作用机制的研究,为其临床合理应用提供参考。

丹红化瘀口服液联合卵磷脂络合碘治疗视网膜静脉阻塞的临床研究

目的分析丹红化瘀口服液联合卵磷脂络合碘治疗视网膜静脉阻塞的的临床效果。方法选择2016年2月-2019年2月在郑州大学附属郑州中心医院治疗的视网膜静脉阻塞患者105例,随机分成对照组(52例)和治疗组(53例)。对照组口服卵磷脂络合碘片,2片/次,3次/d。治疗组在对照组的基础上口服丹红化瘀口服液,20 mL/次,3次/d。两组患者均治疗3个月。观察两组患者临床疗效,同时比较治疗前后两组患者搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、舒张末期血流速度(EDV)和收缩峰值血流速度(PSV)水平及血清可溶性细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果治疗后,对照组临床有效率为75.00%,显著低于治疗组的94.34%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组PI和RI水平明显降低(P<0.05),而EDV和PSV指标水平均明显升高(P<0.05),且治疗组PI、RI、EDV和PSV等指标改善效果明显优于对照组(P<0.05)。治疗后,两组ICAM-1、MCP-1、TNF-α指标均明显降低(P<0.05),且治疗组明显低于对照组(P<0.05)。结论丹红化瘀口服液联合卵磷脂络合碘治疗视网膜静脉阻塞,可改善眼部血液循环,临床疗效较好,安全可靠。