丹参提取物平衡溶解度及表观油水分配系数的测定

目的 测定丹参提取物中“水-脂”二元组分指标成分在不同溶剂中的平衡溶解度及不同pH下的表观油水分配系数,探索丹参提取物的溶解性能。方法 应用超高效液相色谱法(UPLC)结合质量权重系数法表征丹参提取物中迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A、隐丹参酮及丹参酮ⅡA 6个指标成分在不同极性及pH值溶液中的整体溶解度和在饱和正辛醇-水系统中的整体油水分配系数。结果 37℃时提取物在水、甲醇、乙醇、乙腈、正丁醇、丙酮、三氯甲烷、乙酸乙酯八种溶剂中整体溶解性介于0.62~11.58 mg·mL-1之间,在水中的平衡溶解度较大;在缓冲液中平衡溶解度呈先增大后减小,最后趋于稳定的趋势;饱和正辛醇-水系统中的整体油水分配系数Kapp介于-1.12~-0.16之间,pH为4.97时lgP达到最大。结论 丹参提取物溶解性与渗透性均差,在剂型设计时可考虑在处方中加入适量醇类提高溶解度,调节pH值、利用促渗方法等促进药物经皮吸收。

基于HIF-1α/VEGF信号通路探讨丹参提取物对糖尿病视网膜病变大鼠模型的影响

目的 探讨丹参提取物通过低氧诱导因子-1α (Hypoxic inducible factor-1α,HIF-1α)/血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)信号通路对糖尿病视网膜病变(Diabetic retinopathy, DR)大鼠模型的影响。方法 高脂高糖饲养+腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)建立DR大鼠模型,将其分为模型对照组、阳性对照组(芪明颗粒1.42 g/kg)、丹参水提物组(0.16 g/kg)和丹参酮提取物组(0.12 g/kg),连续灌胃4周,然后检测大鼠的空腹血糖(Fasting blood glucose, FBG)、甘油三酯(Triglyceride, TG)、总胆固醇(Total cholesterol, TC)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol, LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol, HDL-C)的水平;HE染色观察视网膜组织形态变化,测量视网膜外核层(Outer nuclear layer, ONL)、内核层(Inner nuclear layer, INL)和神经节细胞层(Ganglion cell layer, GCL)的厚度;酶联免疫吸附测定法(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测血清中糖化血红蛋白(Glycosylated hemoglobin, HbA1c)、糖基化终末产物(Advanced glycation end products, AGEs)和视网膜中白细胞介素-1β (Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-10 (Interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α (Tumor necrosis factor-α,TNF-α)与转化生长因子-β1 (Transforming growth factor-β1,TGF-β1)的水平,免疫组化法检测视网膜中HIF-1α和VEGF的表达。结果 较正常对照组,模型对照组中视网膜组织结构排列紊乱,各结构层厚度减少,FBG、TG、TC和LDL-C水平显著上升(P<0.01),HDL-C水平显著下降(P<0.05),血清中HbA1c和AGEs水平显著升高(P<0.01),视网膜中IL-1β、TNF-α、TGF-β1、HIF-1α和VEGF表达水平显著升高(P<0.01),IL-10表达水平显著降低(P<0.01);与模型对照组相比,丹参水提物和丹参酮提取物减轻了视网膜组织病变程度,降低了血糖和血脂的水平(P<0.05或P<0.01),减少了血清中HbA1c和AGEs的含量(P<0.01),IL-10和TGF-β1改善无统计学意义,IL-1β、TNF-α、HIF-1α和VEGF表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论 丹参提取物能改善DR大鼠视网膜组织的病变,其机制可能是改善血糖血脂、炎性反应以及抑制HIF-1α/VEGF通路。

丹参提取物治疗增生性瘢痕作用机制研究进展

增生性瘢痕是烧伤、冻伤、手术等创伤造成皮肤深部组织损伤后,修复过程中结缔组织过度增生所致的纤维增生性疾病,不仅影响患者外部美观,还可伴发瘙痒、疼痛及肢体挛缩等症状,严重影响患者的生活质量。目前,增生性瘢痕的形成机制尚未完全明确,多认为与创伤修复过程中细胞因子及相关分子失衡引起的过度炎症反应、成纤维细胞(FB)过度增殖和细胞外基质(ECM)过度沉积有关。近年来,有研究表明,丹参提取物(丹参酮ⅡA、隐丹参酮和丹酚酸B等)可通过抑制促炎细胞活性、抗血管生成、抗FB增殖而发挥抗瘢痕增生作用。基于此,本文从调控炎症反应、抑制FB增殖及血管生成等方面阐述了丹参提取物对增生性瘢痕的影响,以期为丹参在增生性瘢痕中的进一步应用提供理论依据。

丹参提取物耐缺氧功能及营养化学研究

目的:探讨丹参提取物对小鼠耐常压缺氧功能及其功能营养化学基础。方法:用常压缺氧小鼠模型试验研究提取物耐缺氧活性,对提取物中功能成分和营养素进行测定和比较。结果:丹参提取物能显著延长小鼠耐常压缺氧的存活时间。提取物中含有丰富的耐缺氧功能因子和相关性营养成分,其中,醇提物中丹参酮IIA1.43%、隐丹参酮0.51%、丹参酮I0.1%、丹参素2.14%、原儿茶醛0.33%、多糖含量4.6%。每100g提取物中VC、VE和胡萝卜素的含量分别为0.722mg、25.9mg和0.47mg。结论:丹参提取物具有增强模型小鼠耐常压缺氧能力,其中耐缺氧功能因子和相关性营养素含量丰富。提示这些成分是其耐缺氧作用的物质基础。丹参提取物作为功能食品基料具有良好的应用基础。

高效液相色谱法测定复方丹参提取液中丹参素含量

目的采用高效液相色谱法测定复方丹参提取液中丹参素的含量。方法色谱柱:Agilent C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-1%冰醋酸梯度洗脱;流速:1 mL.min-1;柱温为室温;检测波长:280 nm。结果线性方程为Y=11 981X+11.492(r=0.999 9),线性范围:20.8-145.6μg.mL-1,丹参素的平均含量为58.28μg.mL-1,RSD为0.77%,回收率100.03%,RSD为0.82%。结论该法操作简便,精确度高,可靠性强,可作为丹参和复方丹参制剂质量控制的标准。

丹参药材中丹参酮ⅡA提取工艺优选及HPLC法含量测定

目的:优选丹参药材中丹参酮ⅡA最佳提取工艺。方法:用正交试验法分别考察三种提取方法(冷浸法,加热回流法,超声法)对丹参药材提取液中丹参酮ⅡA含量的影响,并以HPLC法测出的丹参酮ⅡA的含量为考察指标,优选出丹参酮ⅡA的最佳提取工艺。结果:丹参药材中丹参酮ⅡA最佳提取工艺为:4倍量95%乙醇超声2次,30min/次,合并滤液。丹参酮ⅡA在25.2-126ug/mL范围内线性关系良好。结论:超声技术操作简便,快捷,试验重现行好。

丹参水提物预防糖皮质激素对大鼠睾丸损害的实验研究

目的观察丹参水提物对醋酸泼尼松致大鼠睾丸结构和功能损害的预防作用。方法 3月龄雄性SD大鼠32只按随机数字表法分为4组,每组8只。正常对照(Cont)组给予双蒸水灌胃,醋酸泼尼松(GC)模型组给予醋酸泼尼松加双蒸水灌胃,丹参高剂量(DSH)组给予醋酸泼尼松加丹参水提物5 g/kg灌胃,丹参低剂量(DSL)组给予醋酸泼尼松加丹参水提物2.5 g/kg灌胃,各组大鼠均灌胃给药90 d。测量睾丸重量和睾丸内脏指数;观察睾丸形态学;放射免疫法检测血清睾酮含量。结果 (1)大体病理:各组大鼠睾丸重量、睾丸内脏指数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)形态学:醋酸泼尼松组大鼠睾丸生精小管和生精细胞均萎缩、数目减少,间质纤维化增生;DSH组和DSL组均可见生精小管数量增加,体积增大,且生精小管肥大,功能增强,间质纤维化减少。(3)血清睾酮含量4组比较,差异有统计学意义(P<0.05),DSL组含量最高,其次为DSH组、Cont组、GC组(P<0.05)。结论丹参水提物可以预防糖皮质激素所致的大鼠睾丸结构损害和功能改变。

高效液相色谱法测定双丹水提液中丹参素含量

目的:采用高效液相色谱法测定双丹水提液中丹参素的含量。方法:色谱柱:Agilent C18(250mm×4.65μm);流动相:甲醇-1%冰醋酸;流速:1mL/min;温度为室温;检测波长:280nm。结果:线性方程为y=12183x-0.8623(r=0.9998),线性范围:20.8～208(μg/mL)。结论:该法操作简便,精确度高,可靠性强,可作为丹参和复方丹参制剂质量控制的标准。

洁阴药液的体外抗菌活性与应用

本文测定了洁阴药液的体外抗菌活性，并观察了临床应用效果。结果，洁阴药液对细菌繁殖体，霉菌，芽胞均有效，临床总有效率为９６％，治愈率为６４％。

SPE-HPLC-ELSD法测定复方丹参浸膏中五种低聚糖成分的方法研究

目的建立一种以固相萃取-高效液相色谱-蒸发光散射法（SPE-HPLC-ELSD）对复方丹参浸膏中的五种低聚糖成分进行测定的方法。方法使用Prevail TM Carbohydrate ES色谱柱,以乙腈和水为流动相,梯度洗脱（0-23 min,乙腈75%→60%）,柱温30℃,流速为0.8 ml·min^-1;ELSD漂移管温度60℃,载气为空气,气压25 psi。结果复方丹参浸膏中的五种低聚糖成分能够得到较好的分离,葡萄糖、果糖、蔗糖、Glu-Fru-Gal三糖和Gal-Gal-Glu-Fru四糖的线性范围分别为0.246-1.230,0.236-1.182,0.246-1.230,0.068 2-1.364和0.580 5-5.805 0 mg;平均加样回收率（n=6）分别为101.7%（RSD=1.6%）、102.0%（RSD=1.0%）、100.8%（RSD=0.9%）、102.8%（以棉子糖计,RSD=1.2%）和98.5%（RSD=1.8%）。结论该方法快速简捷、结果准确稳定,适合于复方丹参浸膏中的五种低聚糖成分的含量测定。

丹参水溶性成分提取工艺研究

目的:优选丹参水溶性酚酸类成分的最佳提取工艺。方法:采用正交试验法,以HPLC法测得丹参素含量为指标。结果:丹参水溶性成分的最佳提取工艺条件为A_3B_3C_2-D_1。结论:丹参中酚酸类化合物含量高,稳定性好。

不同辅料在丹参提取液前处理过程中的比较研究

目的通过比较不同的辅料在流化床一步制粒中的载药量、制得颗粒的性质,寻找出适合中药提取液前处理过程的辅料。方法通过流化床顶喷装置,分别以各辅料为底物,丹参流浸膏为粘合剂进行一步制粒,并比较各辅料的载药量、制得颗粒的流动性、可压性、吸湿性以及粒径和粒径分布。结果优化微晶纤维素Prosolv SMCC的载药量最大,所制得的颗粒可压性好,粒径分布适当,流动性和吸湿性比除甘露醇以外的其余辅料好。结论优化微晶纤维素是中药流浸膏前处理过程的理想辅料。

盐酸水提法制备丹参水溶性有效部位群及其对成骨细胞活性测定

目的 探讨丹参水溶性有效部位群（salvia miltiorrhiza utility aqueous extract，DUAE，丹参骨宝2号）的制备工艺。质量控制及其对成骨细胞活性测定。方法采用盐酸水提法处理丹参药材，制得丹参骨宝2号，用高效液相法（HPLC）进行含量测定；通过PNPP检测法比较DUAE对sD大鼠成骨细胞（osteoblast，OB）的碱性磷酸酶（ALP）表达水平的影响。评价丹参骨宝2号药物机制。结果 用盐酸水提法制备的丹参骨宝2号与传统水提方法比较，丹参素含量提高3．28倍，为（11．50±0．52）mg·g^-1生药，丹酚酸B含量减低1．46倍，为（16．40±1．22）mg·g^-1生药，且两者含量均在1％-1、5％，原儿茶醛含量增加1．46倍，为（0．233±0．02）mg·g。生药。传统水提法制备的DUAE药量为1mg生药·L^-1时仅提高成骨细胞ALP活性5．5％±0．3％。丹参骨宝2号药量为0．25mg生药·L^-1时提高成骨细胞ALP活性达52％±10％。结论 用盐酸水提法制备的丹参骨宝2号中含有较高的丹参素和一定比例的丹酚酸B、原儿茶醛，且成分含量稳定，质量可控，对成骨细胞活性测定显示药效好，为研究丹参抗骨质疏松新制剂提供有益资料。

丹参红花提取物对鼠心脏成纤维细胞胶原合成的影响

目的:探讨丹参红花提取物(DCE)对血管升压素(AVP)诱导的新生SD大鼠心脏成纤维细胞(CF)胶原合成作用的影响,为应用中成药防治高血压心肌纤维化提供理论依据。方法:运用3H-脯氨酸掺入法分别观察不同浓度和不同时间DCE对AVP诱导CF胶原合成的影响。结果:CF的3H-脯氨酸掺入率随着DCE干预浓度的增加而降低,其中100mg/L和200mg/LDCE组的3H-脯氨酸掺入率明显低于空白对照组,并具有统计学意义(P<0.01);随着DCE作用时间的延长,CF的3H-脯氨酸掺入率呈递减趋势,CF胶原合成功能与DCE作用时间呈明显的负相关。结论:DCE能够呈浓度和时间依赖性抑制AVP诱导的CF胶原合成功能,防治高血压心肌纤维化。

三种丹参水提有效部位群对糖皮质激素性骨质疏松大鼠的影响

目的对比三种丹参水提有效部位群对激素大鼠骨质疏松的影响,试图寻找丹参对抗激素大鼠骨质疏松的最佳有效成分。方法 4月龄SD大鼠灌服泼尼松3.5 mg.kg-1.d-1造成大鼠骨质疏松模,同时分别给予三种丹参水提有效部位群进行防治性用药,用药时间为12周。实验结束后,取左侧胫骨做骨形态学静态参数观察,取股骨进行骨密度和骨生物力学检测,随后检测骨钙、磷、镁和羟脯氨酸含量。结果与正常大鼠相比,泼尼松模型组大鼠胫骨反应骨小梁结构、数量的四个参数均显著下降,股骨中段骨密度显著下降,而弹性载荷、最大载荷、刚性系数、最大强度和弹性模量等五个股骨的生物力学性能指标均显著降低,股骨中的钙和羟脯氨酸均成比例显著减少。与模型组相比,SAB组大鼠胫骨松质骨四个参数有显著改善,且能有效增加股骨中钙的含量,但对其他的参数无明显改善;DSⅠ组能显著改善激素大鼠胫骨和股骨的骨丢失破坏,且能有效提高其抗骨折的能力;DSⅡ组可有效改善大鼠松质骨改变,股骨骨密度以及骨中钙盐含量,但对于其他参数的改变无显著效果。结论三种丹参水提有效部位群均可改善激素大鼠松质骨的改变,对其股骨的修复作用以DSⅠ组(丹参素∶原儿茶醛∶丹酚酸B=2∶1∶2)效果最佳。

丹参酸提液对高脂大鼠骨量的影响

目的观察丹参酸提液对高脂大鼠胫骨和腰椎骨丢失的防治作用。方法选取3月龄SD大鼠30只,随机分为正常对照组(NS组)、高脂乳剂组(HFE组)、丹参酸提液组(SMB组),每组10只。NS组灌胃生理盐水,HFE组和SMB组灌胃高脂乳剂建立高脂血症模型,SMB组同时给予丹参酸提液。给药16周后处死大鼠,分离血清检测胆固醇、三酰甘油和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),并取胫骨上段、胫骨中段和第5腰椎,进行骨组织形态计量学参数检测。结果与HFE组比较,SMB组大鼠HDL-C升高(P<0.05),骨小梁面积百分数、骨小梁数量、成骨细胞贴壁长度百分率均增加(P<0.05),而骨小梁分离度、每毫米破骨细胞数、破骨细胞贴壁长度百分率均减少(P<0.01);胫骨中段的皮质骨面积百分数增加(P<0.01),骨髓腔面积百分数减少(P<0.01);腰椎松质骨的骨小梁面积百分数、骨小梁宽度增加(P<0.05),而骨小梁分离度减少(P<0.01)。结论长期高脂乳剂灌胃会导致大鼠骨量丢失,丹参酸提液能有效对抗高脂大鼠胫骨上段、中段骨、第5腰椎的骨丢失。

响应面法优化丹参有效成分的提取工艺及其体外抗氧化活性研究

目的应用响应面法优化丹参中丹参酮ⅡA和丹酚酸B两类有效成分的集成提取工艺,并对其体外抗氧化活性进行研究。方法应用高效液相色谱法同时检测丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量,并以此为评价指标,应用响应面法优化丹参中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的集成提取工艺条件。此外,测定提取样品对DPPH和ABTS自由基的清除活性。结果响应面法得到的最优提取工艺条件为:12倍量67%乙醇,提取2次,每次48 min。体外抗氧化实验表明,应用此工艺提取得到的丹参提取物可剂量依赖性地清除DPPH和ABTS自由基,其清除能力优于Vc。结论响应面法用于丹参中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的集成提取工艺优化,预测性良好,此工艺得到的丹参提取物具有较好的抗氧化活性,在氧化应激相关疾病的防治中值得进一步的研究开发。

丹参祛痘涂膜剂制备工艺及其抗炎作用

目的优选丹参祛痘涂膜剂提取工艺条件和制备方法,并对其抗炎作用进行观察。方法采用L_9(3)~4正交实验法考察温度、溶剂浓度、提取时间及提取次数对隐丹参酮和丹参酮ⅡA提取率的影响,优选醇提条件;正交实验优选出涂膜剂的基质组方;采用二甲苯所致小鼠耳廓肿胀模型研究该涂膜剂的抗炎作用。结果醇提工艺条件为8倍量90%乙醇75℃回流提取3次;时间分别为2、1、1 h,制备涂膜剂的基质最优组方为聚乙烯醇(PVA)∶甘油∶西黄蓍胶=1.0 g∶2.5 mL∶1.0 g;与基质对照组比较,祛痘涂膜剂中剂量(1%)与高剂量(2%)具有抗炎作用,能显著降低小鼠耳廓肿胀度(P<0.05)。结论丹参祛痘涂膜剂提取与制备工艺稳定可控,成膜性好,无刺激性,无毒,具有较显著的的抗炎作用。

丹参中脂溶性成分的亚临界水提取方法研究

通过亚临界水提取丹参药材中的丹参酮ⅡA的研究 ,建立了中药材中的脂溶性成分的亚临界水提取条件。分别考察了温度、压力、提取时间、提取物颗粒度等因素对提取量的影响 ,并与有机溶剂提取法比较。结果表明 :当两者具有相同的提取效率时 ,亚临界水提取法的提取时间及提取溶剂的消耗大大减少 ,并避免了因使用有机溶剂而造成的污染。提取最佳条件为 :样品颗粒度为 0 .18～ 0 .15mm ,5MPa ,180℃保持 10min。并通过提取 HPLC联机分析实现了对提取物的实时监测。

复方丹参提取物片降血脂作用研究

目的:观察复方丹参提取物片对实验性高血脂大鼠的降血脂作用效果。方法:根据《保健食品检验与评价技术规范》辅助降血脂检测评价方法,将SPF级雄性大鼠(体质量180.3~206.4 g)随机分为166.7 mg/(kg·bw)、333.3 mg/(kg·bw)、666.6 mg/(kg·bw)三个剂量组、模型对照组和空白对照组,每组10只。连续灌胃30 d后测定血清总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、三酰甘油(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(High-density Lipoprotein Cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(Low-density Lipoprotein Cholesterol,LDL-C)。结果:高剂量组血清TG、血清TC和LDL-C均显著低于模型对照组(P<0.05);而各剂量组血清HDL-C与模型对照组比较无显著差异(P>0.05)。结论:复方丹参提取物片具有较好的降血脂作用。