丹参新醌乙减轻ox-LDL诱导的内皮细胞损伤:基于抑制NF-κB/NLRP3信号通路介导的细胞焦亡

目的探讨丹参新醌乙对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的影响及机制。方法取对数生长期的人脐静脉内皮细胞,分为正常组(加入10%胎牛血清)、ox-LDL组(在正常组基础上加入100ug/mL的ox-LDL)、二甲基亚砜(DMSO)组(在ox-LDL组基础上加入0.1%浓度DMSO)、丹参新醌乙组(在ox-LDL组基础上加入由DMSO溶解的100ng/ml的丹参新醌乙),培养24 h后进行实验。微板法检测乳酸脱氢酶(LDH)表达;qRT-PCR法检测NF-κB1、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)、白介素(IL)-1β的mRNA表达;WesternBlot法检测NF-κB1、NLRP3、caspase-1、GSDMD-N的蛋白表达。免疫荧光法检测GSDMD表达情况。结果与正常组比较,ox-LDL组、DMSO组LDH表达明显升高(P<0.01),NF-κB1、NLRP3、GSDMD、IL-1β的mRNA水平均显著上调(P<0.01),NF-κB1、NLRP3、caspase-1、GSDMD-N、IL-1β的蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与ox-LDL组、DMSO组比较,丹参新醌乙组LDH表达有所降低(P<0.05),NF-κB1、NLRP3、GSDMD、IL-1β的mRNA水平显著下调(P<0.01),NF-κB1、NLRP3、caspase-1、GSDMD-N、IL-1β的蛋白水平显著降低(P<0.01),GSDMD在质膜表达抑制,入核受限。结论丹参新醌乙可能通过NF-κB/NLRP3信号通路,抑制NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡,改善ox-LDL诱导的内皮细胞损伤。