C57BL/6J小鼠背景的CD19嵌合抗原受体T细胞的制备及优化

目的:探索C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞体外刺激条件、最佳培养和感染时间,以期提高CD19嵌合抗原受体T细胞(m CD19 CAR-T)的感染效率。方法:将纯化的C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞在包被CD3/CD28抗体(anti-CD3/CD28 coated)、包被CD3抗体+可溶性CD28抗体(anti-CD3 coated+soluble anti-CD28)和包被CD3抗体(anti-CD3 coated)3种不同条件下分别刺激12 h和24 h,后续培养24 h、48 h和72 h并记录细胞克隆数。在上述3种条件下分别刺激C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞12、24和36 h,然后加入白介素(IL)-2(100 U/ml),镜下记录培养24 h、48 h和72 h的细胞克隆数;此条件下取刺激24 h的CD3^(+)T细胞,感染m CD19 CAR-T逆转录病毒,制备m CD19 CAR-T细胞,流式检测48 h时3组中GFP+CAR-T细胞的百分率。结果:利用获得BALB/c小鼠m CD19 CAR-T细胞的最优化条件,制备C57BL/6J小鼠的m CD19 CAR-T细胞感染效率仅5.23%;anti-CD3^(+)soluble anti-CD28 coated刺激C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞24 h,终止刺激继续培养至48 h时细胞克隆数最高;在上述条件刺激24 h后加入IL-2培养48 h,anti-CD3^(+)soluble anti-CD28 coated组T细胞增殖克隆数量显著增加,且CAR-T细胞感染效率为17.63%±4.17%。结论:C57BL/6J小鼠来源T细胞制备CAR-T细胞的最佳条件与BABL/c小鼠不同;anti-CD3^(+)soluble anti-CD28 coated+IL-2刺激条件下诱导的T细胞感染逆转录病毒后可获得最高效率的m CD19 CAR-T细胞。

肝癌干细胞表面标志物CK19在化学诱癌过程中的差异表达

目的检测CK19基因在化学诱发C57BL/6J小鼠肝癌过程中各阶段的表达差异。方法对50只C57BL/6J雄性小鼠通过化学法诱发肝癌,以50只正常C57BL/6J雄性小鼠为对照组。观察诱癌小鼠的生长状况,每4周处死一批小鼠获取组织标本进行病理学、荧光实时定量PCR(FQ-RT-PCR)法、Western blot等检测CK19基因及蛋白表达差异。结果在化学诱癌第16周后处死的小鼠出现明显的灰白色小结节,直径为2 mm大小,第20周时肝癌结节直径在5～25 mm之间,呈多发性。早期病理改变主要是肝细胞排列结构轻度紊乱,细胞轻度的异型增生。病理切片显示为中、高分化的肝癌细胞,可见瘤巨细胞和病理性核分裂,间质肝纤维组织增生,提示有肝硬化改变;RT-PCR,Western blot结果显示,实验组小鼠在化学诱癌第16周开始CK19-mRNA表达升高,第20周时明显增强;荧光定量结果显示,CK19 mRNA在化学诱癌第4、8、12、16及20周的小鼠肝癌组织中的表达水平分别为(2.133±0.470)、(2.395±0.472)、(2.767±0.729)、(3.217±0.627)和(14.095±5.812),与同期对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肝癌干细胞标志物CK19参与了肝癌的发生发展,其表达量随诱癌时间的延长而逐渐增加,但其对肝癌发生发展的确切调控机制有待深入研究。

血清人附睾蛋白、CA125、CA199联合检测诊断妇科恶性肿瘤的价值

【目的】 探讨血清人附睾蛋白（HE4）、糖类抗原125（CA125）、CA199联合检测诊断妇科恶性肿瘤的价值。【方法】 检测42例妇科恶性肿瘤患者（A组）及同期收治的42例妇科良性肿瘤者（B组）HE4、CA125、CA199水平,比较不同标志物及联合检测的阳性率和相关指标。【结果】 A组HE4、CA125、CA199表达水平、三项标志物单项检测及联合检测阳性率均高于B组,且差异有显著性（P＜0.05）;A组不同标志物联合检测阳性率、ROC曲线下面积（AUC）、准确性、特异性、灵敏度均高于CA125、CA199单独检测（P＜0.05）,其阳性率、AUC、准确性、特异性与HE4单独检测时无明显差异（P＞0.05）,但灵敏度显著高于HE4单独检测（P＜0.05）。【结论】 HE4诊断妇科恶性肿瘤的价值优于CA125、CA199,三者联合诊断可进一步提高良恶性肿瘤鉴别诊断率。

血清PCAT-1联合CEA、CA199检测在结直肠癌患者中的诊断价值

【目的】探讨血清前列腺癌相关长链非编码RNA转录产物l(PCTA-l)、癌胚抗原(CEA)和糖类抗原199(CA199)单独及联合检测对结直肠癌(CRC)的诊断价值。【方法】选取182例初诊CRC患者(恶性组),80例结直肠息肉患者(良性组)和80例健康体检者(对照组)作为研究对象,分别空腹采集受试者静脉血进行血清PCTA-KCEA和CA199水平检测,比较各组间和各病理特征间血清PCTA-l、CEA和CA199水平的变化;绘制ROC曲线分析血清PCTA-1、CEA、CA199单独和联合检测对CRC的诊断价值。【结果】恶性组患者血清PCAT-1、CEA和CA199水平明显高于良性组和对照组,良性组明显高于对照组•组间比较均具统计学意义(P<0.05);恶性组随着CRC分化程度的降低、临床TNM病理分期的增加和淋巴结的转移,血清PCAT-1、CEA和CA1997jc平呈升高趋势•血清CEA和CA199水平的组间比较具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析血清PCAT-1、CEA、CA199、PCAT-1+CEA、PCAT-1+CA199以及三者联合对CRC的诊断AUC分别为:0.791、0.631、0.683、0.822、0.848和0.836,敏感性分别为:75.25%、60.21%、59.25%、68.70%、73.35%和70.05%,特异性分别为:65.32%、77.22%、80.25%、79.36%、83.75%和75.73%.PCAT-1对CRC的诊断敏感性高于CEA和CA199,但诊断特异性低于CEA和CA199(P<0.05);PCAT-1+CEA、PCAT-1+CA199、PCAT-1+CEA+CA199的联合诊断价值高于PCAT-1、CEA和CA199单独诊断AUC.其中PCAT-1联合CA199诊断可明显提高CRC的诊断特异性(P<0.05)。【结论】血清PCAT-1、CEA和CA199水平的升高有助于CRC的早期诊断,且联合检测更具诊断优势,尤其是PAC'T-l联合CA199的检测,能够降低CRC的漏诊率,具有临床推广意义。

琥珀散对卵巢囊肿患者血清CA125、CA199水平的影响及疗效分析

目的探讨琥珀散对卵巢囊肿患者血清肿瘤抗原125（CA125）、糖类抗原CA199（CA199）水平的影响，并分析其临床疗效。方法90例卵巢囊肿患者根据治疗方法分为两组：采用大黄庶虫丸口服治疗45例（大黄庶虫丸组），琥珀散组治疗45例（琥珀散组），2个月为1个疗程，均治疗一个疗程。另外选取女性健康体检者30例（对照组）。采用化学发光法检测正各组血清CA125、CA199水平，B超检测90例卵巢囊肿患者治疗前后囊肿直径并分析临床疗效。结果大黄庶虫丸组、琥珀散组治疗前血清CA125、CA199水平显著高于对照组（ P ＜0．01）；治疗后大黄庶虫丸组、琥珀散组血清CA125、CA199水平均下降，但琥珀散组血清CA125、CA199水平显著低于大黄庶虫丸组（ P ＜0．05）。琥珀散组治疗后囊肿直径显著小于大黄庶虫丸组（P ＜0．05），其总有效率显著高于大黄庶虫丸组（P ＜0．05）。结论琥珀散可显著降低卵巢囊肿患者的血清CA125、CA199水平，显著改善患者临床症状，疗效满意，值得临床推广。

2型糖尿病患者血清CA199与血糖水平的相关性分析

【目的】探讨2型糖尿病患者血清CAl99水平与血糖的关系。【方法】将本院收治的385例2型糖尿病患者（剔除糖尿病肾病、消化道疾病、肿瘤患者）根据CA199水平分为CA199阳性组（n-80），CAl99阴性组（n=305），比较两组患者的空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1C）、体质量指数（BMI）及血糖控制平稳后CA199水平变化。【结果】CAl99阳性组FBG，HbAlC较阴性组显著升高，且两组相比较差异有显著性（P〈0．05），两组BMI比较差异无显著性（P〉0．05）。阳性组血糖控制平稳后复测CAl99较初入院时显著下降，且差异有显著性（P〈0．05）。【结论】2型糖尿病患者cAl99升高与血糖控制不达标有关。

针刺肺俞及四花穴对慢性支气管炎迁延期老年患者免疫球蛋白的影响

目的观察针刺肺俞及四花(膈俞和胆俞)穴对慢性支气管炎迁延期老年患者免疫球蛋白的影响。方法将60例老年慢性支气管炎迁延期患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。两组均采用常规药物治疗,治疗组采用针刺肺俞及四花穴治疗,对照组采用口服蜜炼川贝枇杷膏治疗。分别观察两组治疗前后免疫球蛋白变化。结果治疗组治疗后免疫球蛋白各项指标(IgA、IgM、IgG)与同组治疗前比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗后免疫球蛋白各项指标与对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论针刺肺俞及四花穴对慢性支气管炎迁延期老年患者免疫球蛋白具有升高作用。

血清五项肿瘤标志物及降钙素原水平在肺腺癌化疗前后的变化及其临床意义

【目的】探讨血清五项肿瘤标志物及降钙素原(PCT)水平在肺腺癌化疗前后的变化及其临床意义。【方法】两院收治的124例肺腺癌患者,均在常规治疗基础上联合紫杉醇(或多西紫杉醇)化疗方案,对患者血清五项肿瘤细胞标志物[癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、糖蛋白抗原19-9(CA19-9)、糖蛋白抗原125(CA-125)、糖蛋白抗原15-3(CA15-3)及PCT]进行检测,分别比较化疗有效组与无效组、治疗后2年生存组与死亡组患者化疗前后上述各项指标的变化。【结果】124例肺腺癌患者化疗后血清CEA、CA-125及PCT水平较化疗前均降低(P<0.05)。124例患者中治疗有效患者74例(59.68%),化疗无效患者50例(40.32%),两组化疗后血清CEA、CA-125水平均低于化疗前,且有效组化疗后血清PCT水平低于化疗前(P<0.05);有效组化疗后血清CEA、CA-125、PCT水平均低于无效组(P<0.05)。124例肺腺癌患者中生存周期≥2年者28例(22.58%),96例(77.42%)患者在2年内死亡,生存组及死亡组化疗后血清CEA、CA-125及PCT水平均低于化疗前,且生存组均低于死亡组(P<0.05)。生存组化疗后血清CEA、CA-125及PCT水平降低比例均高于死亡组(P<0.05)。【结论】血清CEA、CA-125及PCT水平变化与肺腺癌患者的疗效、预后关系密切,可用于辅助评估肺腺癌患者的病情进展及预后。

白芥子灸四花穴治疗盗汗疗效观察

目的观察白芥子灸四花穴(双侧膈俞、胆俞)治疗盗汗的临床疗效。方法将120例盗汗患者随机分为A组、B组和C组,每组40例。A组采用白芥子灸四花穴治疗;B组采用口服左归丸治疗;C组将小米粉碎成末并与水调和成糊后,贴敷四花穴。治疗22 d后,观察3组治疗前后汗症中医症状体征量化评分变化情况,并比较3组临床疗效。结果 3组患者治疗后汗症中医症候体征量化评分与同组治疗前比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。A组治愈率和总有效率分别为50.0%和92.5%,B组分别为27.5%和75.0%,C组分别为12.5%和50.0%。A组治愈率、总有效率及治疗后汗症中医症候体征量化评分与B组和C组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。B组治愈率、总有效率及治疗后汗症中医症候体征量化评分与C组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论白芥子灸四花穴是一种治疗盗汗的有效方法,能明显改善患者夜间汗出症状。

多种肿瘤标志物联合检测对卵巢癌术后复发的早期诊断价值

【目的】探讨多种肿瘤标志物联合检测处卵巢癌术后复发的早期诊断价值。【方法】选取陕西省商南县妇幼保健院2016年1月至2019年2月收治的104例经影像学检查、临床表现等疑似盆腹腔复发的卵巢癌患者为研究对象,采用电化学发光免疫测定法测定患者血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原199(CA199)水平,采用酶联免疫吸附法测定血清人附睾蛋白4(HE4)水平。建立ROC曲线,计算曲线下面积(AUC),分析血清CEA、HE4、CA125、CA199的独立检测与联合检测对卵巢癌复发的诊断价值。【结果】104例疑似卵巢癌盆腹腔复发患者,经病理证实共80例盆腹腔复发,24例未复发。盆腹腔复发患者CEA、CA125、CA199、HE4水平均高于未复发者(P<0.05)。联合检测卵巢癌复发、转移诊断的AUC为0.950,敏感性为95.71%,特异性为80.00%,阳性似然比为4.79,明显高于各指标单一检测(P<0.05)。【结论】血清CEA、HE4、CA125、CA199联合检测可有效地提高卵巢癌早期复发的诊断率,对临床治疗具有十分重要的意义。

血清肿瘤标志物和免疫组化指标与胃癌临床病理特征的相关性

【目的】探讨免疫组化指标及肿瘤标志物与胃癌临床病理特征的相关性。【方法】回顾性分析2015年12月至2019年12月于本院就诊的152例胃癌患者的临床资料,分析免疫组化中人类表皮生长因子受体(Her-2)、表皮生长因子受体(EGFR)及抗原ki67(Ki67)的表达及肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖链抗原(CA125)及糖链抗原(CA19-9)的水平与胃癌患者临床病理特征的相关性。【结果】Her-2、EGFR、Ki67表达与有淋巴转移、高分化及TNMⅢ、Ⅳ期之间存在相关性(P<0.05);有肿瘤淋巴转移患者CEA、CA125、CA19-9水平明显高于无转移患者(P<0.05),以肿瘤2.4 cm为界,肿瘤直径增大患者血清中CEA、CA125、CA19-9水平明显高于肿瘤直径较小者(P<0.05)。CA125水平随患者病理分化程度升高而降低(P<0.05);在胃癌患者中,Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期的CEA、CA125、CA199的表达高于I期(P<0.05),Ⅲ期、Ⅳ期的CEA、CA125、CA199的表达高于Ⅱ期(P<0.05),Ⅳ期的CEA、CA125、CA199的表达高于Ⅲ期(P<0.05)。【结论】免疫组化及肿瘤标志物能作为胃癌患者诊断的依据,为胃癌患者早期的诊断及治疗提供理论依据。

PET/CT显像对血清CA19-9升高患者原发肿瘤诊断的意义

目的分析探讨血清糖类抗原19-9(CA19-9)升高行18F-氟代脱氧葡萄糖正电子发射计算机断层/计算机断层扫描(^(18)F-FDG PET/CT)显像受检者中CA19-9及SUVmax数值高低与恶性肿瘤诊断效能的相关性。方法既往无恶性肿瘤病史而血清CA19-9升高的受检者149例,行全身^(18)F-FDG PET/CT显像,血清CA19-9均在显像前2周内检测。通过手术/活检病理以及临床随访结果确诊。结果 149例受检者中证实为恶性肿瘤者64例,非恶性肿瘤者85例,^(18)F-FDG PET/CT显像真阳性60例、假阳性13例、真阴性72例、假阴性4例。PET/CT显像诊断恶性肿瘤的准确率为88. 6%,明显高于单纯血清、CA19-9诊断准确率43.0%(X^2=59. 882,P <0. 05)。血清CA19-9按照37～100 U/ml、100～500 U/ml、500～1 000 U/ml、> 1 000 U/ml不同水平分成4组,每组PET/CT显像诊断准确率分别为94. 5%、84. 9%、81. 3%、88.0%,各组比较差异无统计学意义(X^2=3.503,P>0. 05)。血清CA19-9诊断恶性肿瘤受试者工作特征曲线(ROC)的曲线下面积(AUC)为0. 726,诊断界值为152. 75 U/ml时的敏感度、特异度分别为70. 3%、68. 2%。病灶最大标准化摄取值(SUVmax)诊断恶性肿瘤AUC为0. 742,SUVmax分界值为6. 95时的敏感度、特异度分别为73. 3%、69. 2%。结论 ^(18)F-FDG PET/CT显像在血清CA19-9升高受检者中诊断恶性肿瘤具有重要临床价值,当血清CA19-9> 152. 75 U/ml时有必要行PET/CT显像,病灶SUVmax>6. 95时应考虑恶性肿瘤。

直接灸四花穴对肺癌化疗患者细胞因子的影响

目的:观察直接灸四花穴对非小细胞肺癌化疗患者免疫功能的作用及生存质量的影响。方法:将80例非小细胞肺癌患者随机分为化疗加艾灸组(40例)和单纯化疗组(40例)。两组均采用诺维本+顺铂(NP)化疗方案,化疗加艾灸组化疗同时采用直接灸四花穴(膈俞穴、胆俞穴)治疗,每穴施灸3壮,每天1次,10天为一疗程,共观察1个疗程。比较两组患者治疗前后集落刺激因子(CSF)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-2(IL-2)及卡劳夫斯基(Karnofsky)体力评分的变化。结果:治疗后化疗加艾灸组患者血清CSF、IL-2水平较单纯化疗组升高(均P<0.01),TNF水平较单纯化疗组降低(P<0.01);治疗后两组Karnofsky体力评分均较治疗前下降(均P<0.01),但化疗加艾灸组Karnofsky体力评分较单纯化疗组高(P<0.01)。结论:直接灸四花穴能提高肺癌化疗患者血清CSF、IL-2水平,降低TNF水平,从而提高患者免疫功能及临床疗效,改善其生存质量。

MRI联合血清CA153、CEA、CYFRA21-1水平检测对乳腺癌患者诊断效能的影响

目的分析磁共振成像(MRI)联合血清糖类抗原153(CA153)、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)水平检测对乳腺癌患者诊断效能的影响。方法选取2015年12月至2017年12月本院收治的80例乳腺癌患者为观察组,另选取98例良性乳腺疾病患者为对照A组,同期94例健康体检女性为对照B组。以电化学发光分析法测定比较3组血清CA153、CEA、CYFRA21-1水平,比较观察组不同分期患者(Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期)上述血清指标水平,并对3组采取MRI检查,分析MRI与血清CA153、CEA、CYFRA21-1联合及单独诊断乳腺癌的特异度、灵敏度及准确度。结果 3组血清CA153、CEA、CYFRA21-1水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),且观察组血清CA153、CEA、CYFRA21-1水平高于对照A组与对照B组(P <0.05);观察组Ⅲ～Ⅳ期患者血清CA153、CEA、CYFRA21-1水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05);采用MRI与血清CA153、CEA、CYFRA21-1联合诊断乳腺癌的灵敏度、准确度分别为96.25%(77/80)、84.93%(231/272),均高于应用血清CA153、CEA、CYFRA21-1单独诊断(P <0.05);且联合诊断的灵敏度高于MRI单独诊断(P<0.05)。结论应用MRI联合血清CA153、CEA、CYFRA21-1水平检测能显著提升乳腺癌诊断灵敏度与准确度,降低漏诊风险,为乳腺癌诊治提供有力依据。

四花穴治疗癌因性疲乏的理论基础

四花穴为古代治疗骨蒸劳热的著名灸穴,在临床上有着广泛应用。根据笔者临床实践结合文献研究,探讨四花穴治疗癌因性疲乏(CRF)的有效性及可行性,为临床治疗CRF提供新思路。从传统中医角度,CRF属于虚劳类病证,应用四花穴能调整阴阳,气血同治,有效治疗虚劳病症;从现代研究而言,CRF属于慢性疲劳综合征,应用四花穴能通过调控多种细胞因子水平改善疲乏症状,同时可调节免疫功能细胞群,综合提高患者免疫力。基于此,推断四花穴能有效治疗CRF,改善患者免疫功能。