赣州市花—金边瑞香(Daphne Odoravar·Marginata)(瑞香科)(Thymelaeaceae)的研究概述

本文综述了金边瑞香的栽培条件、繁殖方法及其价值,展望了金边瑞香今后的研究趋势。

毛瑞香化学成分研究

目的:研究毛瑞香的化学成分。方法:应用色谱技术进行分离和纯化,通过光谱方法鉴定其化学结构。结果:得到16个化合物,鉴定其中的9个,分别为β谷甾醇(Ⅰ),对羟基苯甲酸乙酯(Ⅱ),反式2-丙烯酸3(3,4-二羟基苯基)二十二烷酯(Ⅲ),5,4′二羟基-7-甲氧基黄酮(即芫花素)(Ⅳ),2,4-二羟基嘧啶(Ⅴ),瑞香素(Ⅵ),双白瑞香素(Ⅶ),5,7,4′-三羟基黄酮-3醇(Ⅷ),β-胡萝卜苷(Ⅸ)。结论:化合物Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ,Ⅷ,Ⅸ为首次从该植物中分得。

金边瑞香浸膏体内外抗肿瘤作用

目的：探讨金边瑞香浸膏的体内外抗肿瘤作用。方法：采用流式细胞术观察不同浓度金边瑞香浸膏对SMMC7721细胞周期的影响。采用MTT法检测不同浓度金边瑞香浸膏对SMMC7721，NKM45，A549和S180肿瘤细胞增殖的影响。利用小鼠皮下移植性肿瘤模型观察不同浓度金边瑞香浸膏的体内抗肿瘤作用。结果：金边瑞香浸膏可使SMMC7721 G0／C1期细胞增多，S期细胞减少，以0．5g·mL^-1剂量作用最明显，G0／G1期细胞达80．64％。金边瑞香浸膏浓度在0．03125～1．0g·mL^-1范围内对体外培养的SMMC7721，NKM45，A549和S180肿瘤细胞增殖均有一定程度的抑制作用，0．5g·mL^-1浓度时对此4种肿瘤细胞的增殖抑制率分别为65．82％，60．38％，42．36％和49．94％。金边瑞香浸膏对荷S180小鼠的肿瘤生长有抑制作用，20和40g·kg^-1·d^-1金边瑞香剂量组抑瘤率分别为43．57％和28．13％。结论：金边瑞香浸膏在体内外具有抗肿瘤作用。

金边瑞香插穗形态、POD与可溶性蛋白含量变化研究

分析金边瑞香扦插生根过程中插穗形态变化、POD活性和可溶性蛋白含量的变化规律与生根的关系,为其生产和生根机理研究提供理论依据。结果表明,600 mg.L-1的NAA溶液能有效抑制金边瑞香插穗基部变褐和腐烂,促进愈伤和生根的发生,最高生根率达86.8%,生根率与皮层开裂呈正相关。生根过程中,插穗体内POD活性总体呈"升高-降低-升高"趋势,最高峰值较CK提早了8 d,与愈伤高峰出现一致;可溶性蛋白总体呈"降低-升高"趋势,各处理下降的速度较CK要快。

金边瑞香茎尖脱毒及快繁技术

报道了金边瑞香顶芽在MS＋0，05mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA培养基中预培养20d，再在34℃（11h）＋23℃（13h）的昼夜温度交替下处理30d后，剥离0．2-0．3mm大小的茎尖在MS＋0，1mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA培养基中的诱导成活率为80．0％，并获得脱毒苗。继代和增殖培养基为MS＋0．5-1．0mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA，增殖系数4，1。试管苗在适宜培养条件下平均生根率为82．6％，在珍珠岩：泥炭=2：1基质中生根苗移栽成活率达到96．46％。

金边瑞香的扦插生根研究

研究表明金边瑞香插穗所带叶片数与生根关系极大，在插穗体内吸水与蒸腾平衡状况下，一定长度的枝条其叶片数越多，生根率及根系发达程度越高；同一枝条分３段扦插，以梢部生根率及根系发达程度最高，中部次之，基部最差；不同树龄的金边瑞香插穗以“低龄”母株生根最好。

金边瑞香提取物抗氧化及清除自由基活性研究

采用不同的化学模型评价了金边瑞香(Daphne odora var.marginata)乙醇提取物的乙酸乙酯组分(EA)及其三个子组分(乙酸乙酯组分上硅胶柱层析,用石油醚-丙酮按照体积比为8:3、4:3和1:4梯度洗脱得到,分别命名为F1、F2和F3)的抗氧化及清除自由基的能力。研究结果表明,组分F2清除超氧自由基和羟基自由基的能力最强,组分F1清除DPPH.的能力最强,EA还原铁离子和螯合亚铁离子的能力最强,所有组分对羟基自由基所致DNA损伤均有很好的保护作用,预测了活性较强的组分F2可能含有活性先导物。

金边瑞香试管苗高频生根诱导研究

针对金边瑞香脱毒组培苗在增殖培养中存在壮苗率低、生根不稳定、生根率低以及试管苗生根移植周期性长等问题,采用MS基本培养基,添加不同种类和水平的激素,筛选出培养壮苗、诱导生根的最佳激素组合,同时进行不同基质试管苗生根移植试验。试验结果表明:金边瑞香壮苗率由原30%提高到90%,生根诱导率90%以上,移植成活率达93%。

金边瑞香花粉活力和柱头可授性研究

[目的]研究金边瑞香花粉活力和柱头可授性。[方法]采用I-KI法、TTC法和固体培养基法测定金边瑞香花粉的活力,并用联苯胺-过氧化氢法测定柱头的可授性。[结果]金边瑞香从初花期至盛花期,I-KI法未对花粉内部染色,使用TTC法花粉未变红色,离体培养法未见有花粉管萌发,均表明花粉不具生活力。柱头表面有少量气泡产生的,且柱头变色,表明金边瑞香柱头可授性较低。[结论]金边瑞香花粉无活力,柱头可授性低。

金边瑞香浸膏对小鼠血清IFN-γ、IL-4、IL-18表达的影响

目的观察金边瑞香(daphne odora var.marginata,DOVM)浸膏对小鼠血清干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素18(IL-18)表达的影响。方法选用昆明系小鼠60只,随机分为生理盐水组(对照组)和1、2、4、8、16 g/(kg.d)DOVM浸膏组共6组,每组10只。DOVM浸膏不同浓度组分别灌胃给药0.02 mL/g,1次/d,连续14 d;生理盐水组给予生理盐水灌胃0.02 mL/g,1次/d,连续14 d。常规分离血清后,采用生物素双抗体ELISA夹心法(ABC-ELISA)测定各组小鼠血清IFN-γ、IL-4、IL-18的水平。结果1 g/(kg.d)DOVM浸膏组血清IL-4水平明显高于生理盐水组(P<0.05)。生理盐水组与DOVM浸膏不同浓度组血清IFN-γ、IL-18水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05),DOVM浸膏不同浓度组间血清IFN-γ、IL-18水平比较差异也均无统计学意义(P均>0.05)。结论1 g/(kg.d)DOVM浸膏对小鼠IL-4的表达有一定促进作用。

金边瑞香的抑菌实验

目的 :探讨金边瑞香对金黄色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、肖氏沙门菌 (旧称乙型副伤寒杆菌 )、大肠杆菌、绿脓杆菌的抑菌作用。方法 :琼脂扩散法。结果 :不同浓度的金边瑞香对金黄色葡萄球菌、肖氏沙门菌、福氏痢疾杆菌具有抑菌作用 ,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强 ,0 .2 5 g/ml～ 1g/ml的药液均有明显抑菌作用 ,抑菌圈直径在 15～ 2 0mm。对大肠杆菌、绿脓杆菌无抑菌作用。结论 :金边瑞香对金黄色葡萄球菌、肖氏沙门菌、福氏痢疾杆菌具有抑菌作用。

金边瑞香提取液镇痛作用的实验研究

目的 :探讨金边瑞香提取液对小鼠的镇痛作用。方法 :用小鼠扭体法、热板法及电刺激法观察其镇痛作用。结果 :金边瑞香提取液对醋酸引起的扭体反应、热板法及电刺激法诱发的疼痛呈剂量依赖性镇痛作用 ,此作用不被纳络酮所对抗。结论 :金边瑞香提取液具有镇痛作用。

外源亚精胺对越冬金边瑞香抗寒性的影响

【目的】研究外源亚精胺(Spd)对金边瑞香抗寒性的生理效应,为金边瑞香的室外越冬管理与露地栽培提供依据。【方法】于2010-12-01-2011-03-16,以2年生盆栽金边瑞香为试材,叶面喷施1mmol/L外源Spd,喷施量约100mL/株,每隔10d喷1次,共喷10次,以同样的方法喷施清水作为对照。研究Spd对室外越冬条件下金边瑞香抗寒性生理指标的影响。【结果】12月至翌年1月,Spd处理和对照金边瑞香叶片中可溶性糖、游离脯氨酸含量以及抗氧化保护酶SOD、POD和CAT的活性均逐渐增强,2月份开始逐渐降低,试验期间上述指标均以Spd处理较高,且在试验中期(01-05-02-13),Spd处理的游离脯氨酸含量、SOD和CAT活性显著高于对照,试验中、后期(01-20-03-07),Spd处理的可溶性糖含量和POD活性显著高于对照(P<0.05);而电解质渗透率和MDA含量在整个试验期间呈现前低后高的变化趋势,且均以Spd处理较低;3月份Spd处理的电解质渗透率显著(P<0.05)低于对照,在试验中、后期(01-20-03-16),MDA含量显著(P<0.05)低于对照。【结论】叶面喷施1mmol/L Spd能明显提高金边瑞香叶片中可溶性糖含量和3种抗氧化保护酶的活性,降低细胞膜相对透性和MDA含量,从而提高了金边瑞香的抗寒能力,其开花时间较对照提前3～4d,且植株长势良好,而对照则表现出一定程度的低温损伤症状。

金边瑞香花期化学调控技术研究

通过对 4种植物生长调节剂的试验 ,从中筛选出了调节金边瑞香花期的适宜的化控剂种类及其施用浓度、时间和方法。 4种化控剂对促进金边瑞香开花的效果依次为A >B >C、D。

生长刺激素对金边瑞香扦插生根的效应研究

研究了不同生长刺激素及其组合对金边瑞香扦插生根的影响。结果表明,单独使用IBA、NAA以及ABT对金边瑞香扦插生根均有较好的促进作用,在浸泡3 min时,500 ppm IBA、600 ppm NAA、1 000 ppm ABT效果最好,其生根率分别为92.7%、88.7%、86.0%;生长刺激素组合使用可使金边瑞香扦插生根率进一步提高,正交试验表明,NAA200 ppm+IBA300 ppm+Vc50 ppm+浸泡时间3 min,生根率最高,达到96.7%,根系数量和质量均较单一生长刺激素处理有所提高。

紫外分光光度法测定金边瑞香枝和叶中总黄酮的含量

目的:建立金边瑞香枝和叶中总黄酮含量的测定方法,为该品的质量控制提供依据。方法:以葛根素为对照品,采用紫外分光光度法在254nm波长处测定样品的吸光度。结果:对照品在0～100mg/L范围内呈良好线性关系,回归方程为Y=0.0040X+0.0052,R=0.9997。金边瑞香枝和叶中总黄酮含量分别为0.1262%和0.2615%。结论:该方法操作稳定,结果准确、可靠,重现性好,适合金边瑞香枝和叶中总黄酮含量的测定。

金边瑞香茎尖外植体快繁技术的研究

以金边瑞香茎尖为外植体,探讨了不同培养基对丛生芽的诱导增殖、芽苗生根的影响。结果表明:1)金边瑞香丛生芽的诱导增殖可用培养基B5大量无机成分+MS微量无机成分+B5维生素+BA2.0 mg.L-1;2)丛生芽形成一定高度的芽苗后,接入培养基1/2B5+NAA50 mg.L-1中培养10 d,然后接入1/2B5培养基中可获得最佳生根效果.

金边瑞香有机相提取物库的构建及活性成分分离纯化研究

采用逆流提取-系统溶剂组分化-高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)检测组分化效果-高速逆流色谱技术(High-Speed Counter-Current Chromatography,HSCCC)分离制备高纯度化合物的研究思路,对金边瑞香化学成分进行研究得到4个高纯度单体化合物。通过现代谱学方法分别鉴定为:瑞香素(daphnetin,1)、瑞香黄烷I(daphnodorin I,2)、对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzonic acid,3)和瑞香黄烷D1(daph-nodorin D1,4),化合物2～4均为首次从该种植物中分离得到。

金边瑞香离体培养中芽和愈伤组织诱导初步研究

以MS为基本培养基,附加激素KT、NAA、6-BA、IAA、ZT进行试验,发现不同的激素组合、不同的激素水平处理对芽及愈伤组织诱导影响较大,其中以MS附加ZT1.0mg/L的培养基上芽的诱导率最高,高达94%,且诱导时间短,芽生长健壮。

金边瑞香茎段外植体快繁技术研究

以金边瑞香茎段为外植体,探讨了不同培养基对愈伤组织诱导、愈伤组织分化的影响。结果表明:1)金边瑞香茎段愈伤组织诱导以培养基MS+2,4-D2.0 mg.L-1+6-BA0.2 mg.L-1效果最佳;2)愈伤组织增殖宜采用培养基MS+2,4-D2.0 mg.L-1,并且增殖培养不宜超过1代;3)愈伤组织分化成苗宜采用培养基1/2MS+6-BA2.0 mg.L-1+NAA0.2 mg.L-1,对愈伤组织进行脱水处理能提高分化率。