洋金花体外抑制角质形成细胞炎性因子分泌和血管形成

目的以肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导角质形成细胞炎症为模型,研究传统草药洋金花(Datura metel L.)在银屑病治疗中可能的作用。方法使用角质形成细胞系HaCaT,构建了TNF-α诱导的银屑病细胞模型。实验分为3组:对照组、TNF-α银屑病模型组和TNF-α+洋金花干预组。以ELISA法测定IL-17和CCL20水平,利用Western blot检测核因子κB(NF-κB)亚单位p65蛋白的表达,使用体外血管生成分析试剂盒进行内皮细胞成血管实验。结果与TNF-α银屑病模型组相比,洋金花提取物极显著降低了TNF-α诱导的银屑病模型细胞培养上清液中的IL-17和CCL20的水平(P<0.001);洋金花提取物显著降低了TNF-α诱导的银屑病模型细胞的NF-κB亚单位p65的表达(P<0.01);洋金花提取物有效抑制了银屑病模型组细胞培养上清液对内皮细胞血管形成的诱导作用。结论洋金花提取物能够下调NF-κB信号通路分子,减少银屑病角质形成细胞炎性因子IL-17和CCL20的产生,抑制了血管形成。这些发现为洋金花在银屑病治疗中的应用提供了新的依据。

基于ERK和NF-κB途径探讨洋金花醉茄内酯Daturataturin A抑制HaCaT细胞增殖和迁移的作用

目的:基于ERK和NF-κB途径,对洋金花醉茄内酯Daturataturin A(DTA)诱导HaCaT增殖、迁移、炎症及相关分子机制进行研究,从而探讨其治疗银屑病的作用机制。方法:建立人角质形成细胞(HaCaT)为表皮细胞增殖状态的模型。通过蛋白质印迹法(Western blot)、迁移实验、CCK-8细胞增殖实验等方法研究DTA治疗银屑病的药效学及其作用机制。结果:DTA抑制HaCaT增殖和迁移呈剂量和时间依赖关系;DTA可抑制IL-17诱导的HaCaT过度增殖,同时可抑制持续活化的NF-κB和下游的炎症因子。结论:DTA具有抗增殖,降低HaCaT迁移能力和抗炎效应,可以通过ERK和NF-κB途径抑制HaCaT细胞增殖和迁移,从而治疗银屑病。其机制可能是通过ERK和NF-κB途径发挥作用。

毛叶曼陀萝(Datura innoxia Mill.)和颠茄(Atropa belladonna L.)属间体细胞杂交成功

据G.Krumbiegcl和O.Schieder报道,他们通过原生质体融合的途径,将曼陀萝和颠茄杂交成功。筛选了13个体细胞杂种,其中大部分已经开始分化出根和叶。杂种愈伤组织可以根据形态特征加以辨认。毛叶曼陀萝用的是白化苗突变体,因此杂种愈伤组织应是有毛(来自毛叶曼陀萝)和绿色(来自颠茄)的。

气候变化背景下入侵植物曼陀罗在西藏的潜在风险区预测

生物安全与外来物种入侵是国门生物安全的重大生态学问题,生物入侵造成了巨大的经济损失与生物多样性快速丧失,还影响着人类的身体健康。西藏是我国重要的生态安全屏障,生态类型复杂且丰富多样,明确西藏区域尺度上外来入侵植物的潜在分布格局及其对气候变化的响应对入侵植物的预防和控制具有重要意义。为了探究入侵植物曼陀罗(Datura stramonium L.)对西藏生态安全的影响风险,基于野外实地调查数据,采用最大熵(Maxent)模型,应用R语言和SPSS软件对模型参数和数据进行优化筛选,探讨影响其地理分布的主要环境因子,并模拟预测了当代及2种气候变化情景(RCP 45、RCP 85)下2050年和2070年,其在西藏的潜在入侵风险区分布情况。结果表明:下层土壤酸碱度、年平均气温、最暖月最高温度与土壤有效含水量是影响曼陀罗分布的主导环境因子,海拔和人类活动影响强度也有重要作用;朗县、加查县、乃东区、城关区、八宿县、贡嘎县、巴宜区、波密县、察隅县、芒康县等地为入侵高风险地区;两种气候背景下曼陀罗的各级风险区面积和总风险区面积均呈持续增加的变化趋势,且在最高碳排放情景(RCP 85情景)下响应更为敏感;主要沿着低海拔河谷区域东南向西北方向入侵扩散的趋势,分布中心由当前的墨脱县域向工布江达县域转移。综合来说,曼陀罗在西藏分布受土壤环境、温度和降水影响较大,气候变化和人类活动影响强度将使其向西藏西部、北部扩散。研究结果可为西藏地区综合防控曼陀罗的入侵危害与动态监测提供生态学基础理论依据。

曼陀罗内生真菌Fusarium solani MBM-5活性次级代谢产物研究

该文对木本曼陀罗内生真菌Fusarium solani MBM-5(茄腐皮镰刀菌)的次级代谢产物进行了化学及生物活性研究。运用多种色谱方法(如开放ODS柱色谱、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备型HPLC等),从F.solani MBM-5培养物的乙酸乙酯萃取物中共分离得到6个烯酸类化合物,包括1个新化合物和5个已知化合物。利用化合物的理化常数和波谱学(UV、IR、NMR、HR-ESI-MS等)方法及Mosher′s反应,鉴定了化合物结构,分别为fusaridioic acid E (1)、fusaridioic acid C (2)、fusaridioic acid A (3)、L660282 (4)、hymeglusin (5)、hymeglnone (6),其中化合物1为新化合物。采用MTT法和Griss法,分别评价了所有化合物对2种肿瘤细胞的生长抑制作用,以及对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞RAW264.7释放NO的影响及其抗炎作用。实验结果表明,化合物5对A549和HepG2细胞株具有较强的生长抑制活性(IC_(50)分别为4.70、13.57μmol·L^(-1)),并且化合物1和6可显著抑制LPS诱导RAW264.7细胞的NO释放量,其IC_(50)分别为77.00、70.33μmol·L^(-1)。

木本曼陀罗毛状根植株再生体系的建立

建立了木本曼陀罗(Datura arborea L.)毛状根的植株再生体系并对再生植株进行了初步检测。采用"一步法"诱导不定芽的适宜培养基为MS+6-BA2.0mgL-1+NAA0.2mgL-1;采用"两步法"诱导不定芽时,先在MS+6-BA4.0mgL-1+KT0.5mgL-1+2,4-D0.5mgL-1上诱导愈伤组织,然后在MS+6-BA4.0mgL-1+NAA0.2mgL-1上诱导愈伤组织分化不定芽。诱导不定芽的最适宜生根培养基为1/2MS+IBA0.1mgL-1。用PCR技术从再生植株叶片中得到了rolB、rolC目的基因片段。HPLC检测结果表明毛状根再生植株中莨菪烷类生物碱(Tropane alkaloids,TA)的含量较野生植株有明显的提高。

木本曼陀罗丛生芽的诱导及快速繁殖

以茄科药用植物木本曼陀罗的叶片为外植体,通过一步法再生获得丛生芽及其再生植株,建立了木本曼陀罗的快速无性繁殖体系.结果表明:木本曼陀罗最佳丛生芽诱导培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L,丛生芽分化率可达91.4%,平均丛生芽倍增数为13.5.试管苗生根培养基以1/2MS+IBA1.0mg/L最好,生根率高达94.5%.

木本曼陀罗内生真菌抗菌活性的筛选研究

从木本曼陀罗植物内生真菌中筛选高效抗菌活性的菌株。选择与人类和植物相关的36株病原微生物,分别对分离自木本曼陀罗(Datura arborea L.)植物的内生真菌77株进行了发酵代谢产物的抗菌活性筛选研究。结果显示:对细菌病原菌、皮肤致病真菌、植物致病真菌有抑制作用的内生真菌分别有24,9,17株,其中5株内生真菌对10种以上的供试病原菌有明显的抑制作用,活性最好的1株对20种病原菌有较强抑制活性,最大抑菌圈直径达48mm。这说明木本曼陀罗植物内生真菌抗菌能力较强,抗菌谱较广。

木本曼陀罗北方引种后的栽培技术探讨

探讨并揭示木本曼陀罗的引种特性,即不同的栽培措施对其生长发育及开花的影响规律,为其在北方的生产栽培提供理论依据。以黄花和红花木本曼陀罗为供试材料,研究不同施肥条件、不同光照强度、不同基质及酸碱度、不同温湿度条件和不同生长调节剂对北方引种的木本曼陀罗植株生长发育和开花的影响。结果表明:施用钾宝(N:12%,K2O:44%)后的叶片鲜重及叶面积增长率最多,施用复合肥(N∶P∶K=2∶1∶1)的变化与其差异不显著,但后者处理的植株花蕾总数与前者差异显著。遮光40%,光照强度为17 280～25 900lx的条件下,叶色花色最佳,开花数减少8.41%,但花径增加18.53%,花冠长增加22.02%。不同温湿度条件下,0～15℃生长缓慢,15～30℃和>30℃时的生长没有显著差异,生长势均强,且随着温度的提高,地径的增长幅度逐渐增大,但15～30℃时株型易控制,观赏性好。喷施浓度为0.5～1g/L的PP333溶液可有效缩短节间距,增加萌芽数。木本蔓陀罗在遮光40%,光照强度为17 280～25 900lx、空气相对湿度60%、土壤pH值为6.5～7.5的条件下叶片绿色浓厚,花多色艳。施肥以复合肥(N∶P∶K=2∶1∶1)为主,同时在整个生长期内施用3～4次钾宝,在植株萌蘖期后到开始拔节时期喷施0.5～1.0g/L的PP333 3次即可保证盆栽观赏效果。

重金属污染下曼陀罗种群分化的RAPD分析

将不同空间地段上获得的同一种质但污染年代各不相同的 4个曼陀罗材料种子易地种植在同一模拟重金属污染生境中 ,对这 4个曼陀罗种群进行 RAPD分析。结果表明 ,在 1 0 5个检测位点中发现有 78个位点呈多态性。在这些多态位点中未发现与重金属抗性有关的特异性多态 DNA片段。Shannon-Weiner指数计算结果表明 ,在短期污染时间内曼陀罗种群遗传多样性水平降低。随着污染时间的推移 ,曼陀罗种群逐渐在污染迹地上稳定下来 ,曼陀罗种群遗传多样性水平有所回升和提高 ,4个曼陀罗种群遗传多样性由高到低排列顺序为 L>CK>M>S。遗传多样性指数表明曼陀罗种群间变异程度远小于种群内的遗传变异。 4个种群两两间遗传距离较小 ,遗传距离最大的种群为 L和 S,最小的为 L和 CK种群。因此 ,在重金属胁迫环境选择下 ,曼陀罗种群发生了一定程度的分化与微进化 。

曼陀罗生物碱提取液对几种植物种子萌发的影响

以不同浓度的曼陀罗生物碱提取液分别处理3种植物种子，探索其对植物种子萌发的影响。结果表明：低浓度（0．1、0．2mg/ml）浸种对鹰嘴豆、金豆种子萌发均有不同程度的促进作用，但较高浓度（0．3～0．5mg/ml）浸种则表现出抑制作用；各处理对番茄种子萌发均有抑制作用，使种子的萌发率、α-淀粉酶活性等受到明显抑制，且抑制作用随处理浓度提高而增强。

曼陀罗毛状根的诱导及其悬浮培养合成天麻素初探

利用A4和R1601两种发根农杆菌菌株分别感染曼陀罗的嫩叶及嫩茎诱导产生毛状根。探讨了不同菌株、不同外植体、蔗糖预处理、外植体预培养与染菌时间以及外植体二次染菌等条件对转化频率的影响,并建立毛状根悬浮培养体系及转化外源底物对羟基苯甲醇合成天麻素。结果表明:A4转化频率高于R1601;嫩叶转化频率最高;嫩叶最佳预培养时间为4 d;最佳染菌时间为5 min。HPLC法分析表明,悬浮培养毛状根能转化外源底物对羟基苯甲醇合成天麻素。

曼陀罗植株不同部位浸提液化感作用的比较研究

为了比较曼陀罗不同部位化感作用的差异,用蒸馏水分别浸提曼陀罗根、茎、叶的有效成分,以蒸馏水为对照,研究曼陀罗根、茎、叶浸提液对芝麻和粟种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,0.2g/ml曼陀罗叶浸提液处理时,芝麻和粟种子萌发率分别降低83%和83.3%,幼苗的根和茎则停止了生长;0.4g/ml曼陀罗茎浸提液使芝麻和粟的萌发率降低27.6%和15.8%,幼苗根长降低93.3%和64.7%,幼苗茎长降低51.2%和18.0%。0.4g/ml曼陀罗根浸提液使芝麻和粟种子萌发率降低31.2%和56.2%,幼苗根长降低75.1%和15.0%。因此,曼陀罗叶浸提液强烈抑制了芝麻和粟的种子萌发和幼苗生长,茎浸提液和根浸提液也都存在一定的抑制效应,但都弱于叶浸提液。

曼陀罗属新变种温州曼陀罗与白曼陀罗的比较研究

报道了白曼陀罗ＤａｔｕｒａｍｅｔｅｌＬ的一新变种─温州曼陀罗Ｄ．ｍｅｔｅｌＬ．ｖａｒ．ｗｅｎｃｈｏｗｅｎｓｉｓ。并通过电镜扫描、凝胶电泳及生物碱测定的实验，比较了两者的形态、超微结构和化学组成的差异。结果表明，本变种与白曼陀罗外部形态不同，花冠和花粉粒扫描电镜观察也有明显区别，可溶性蛋白及过氧化物同工酶凝胶电泳图谱区别不明显。本变种东莨菪碱含量明显高于白曼陀罗，这种特性是稳定的。

洋金花倍半萜类化合物的分离与鉴定

目的:研究洋金花中倍半萜类化学成分。方法:采用离子交换树脂、大孔吸附树脂、硅胶等柱色谱方法分离,利用多种波谱学测试技术进行化合物的结构鉴定。结果:从洋金花中分离并鉴定了5个倍半萜类化合物,分别为二氢红花菜豆酸(dihydrophaseic acid)(1),(6Z)-4-(3-hydroxybutylidene)-3,5,5-trimethyl-2-cyclohexene-1-one-O-β-D-glucopyranoside(2),(6E)-4-(3-hydroxybutylidene)-3,5,5-trimethyl-2-cyclohexene-1-one-O-β-D-glucopyrano-side(3),Vomifoliol(4)和(6S,9R)-3-oxo-α-ionol-9-O-β-D-glucopyranoside(5)。结论:化合物1-3为首次从洋金花中分离得到。

气相色谱/质谱法分析曼陀罗果实挥发油的化学成分

用水蒸汽蒸馏法从曼陀罗果实中提取挥发油,并用气相色谱/质谱(GC/MS)联用技术对其化学成分进行分离和结构鉴定,用峰面积归一化法确定各成分的相对含量。结果确定了68种化合物,占挥发油总量的82.83%,其主要成分为6-戊基-5,6-二氢化吡喃-2-酮(9.13%)、3,7,11,15-四甲基-2-十六碳烯-1-醇(6.71%)、二苯酮(6.16%)和1-己醇(6.10%)等。

4种曼陀罗对粘虫和菜青虫的触杀和拒食作用研究

研究了曼陀罗、紫花曼陀罗、毛曼陀罗和重瓣曼陀罗不同部位提取液对粘虫和菜青虫的触杀和拒食作用.结果表明,4种曼陀罗不同部位甲醇粗提物对粘虫5龄初期幼虫的触杀作用以曼陀罗初花期根茎叶为最高,其次为紫花曼陀罗花和初花期根茎叶,校正死亡率分别为23.0%、19.0%和17.0%.紫花曼陀罗花及其初花期根茎叶、曼陀罗初花期根茎叶5种不同极性溶剂(甲醇、乙醇、丙酮、石油醚、乙酸乙酯)粗提物对粘虫的触杀作用均以甲醇粗提物为最高,校正死亡率分别为20.83%和17.93%、23.0%.紫花曼陀罗花甲醇粗提物对4龄初期菜青虫的触杀作用最强,其次为曼陀罗花甲醇粗提物,校正死亡率分别为100.0%和80.0%.4种曼陀罗花和初花期根茎叶甲醇粗提物对粘虫均无拒食作用.曼陀罗花和毛曼陀罗花甲醇粗提物对菜青虫的拒食率分别为95.5%和83.4%.

洋金花中生物碱类成分的分离与鉴定

为了分离、鉴定洋金花中的生物碱类化学成分,采用硅胶柱、ODS开放柱和制备液相等色谱方法分离,从提取物中分离得到6个生物碱类化合物,并通过IR、NMR和MS等技术确定了其化学结构分别为曼陀罗碱(meteloidine)、莨菪碱(hyoscyamine)、去水阿托品(apoatropine)、山莨菪碱(anisodamine)、东莨菪碱(hyoscine)和norharman。

曼陀罗植株提取物除草活性初步研究

以小麦、高粱、油菜、黄瓜为受体植物,采用培养皿滤纸法测定了曼陀罗植物不同组织、不同溶剂提取物的除草活性。结果表明,曼陀罗的不同组织粉末在100mg/mL的添加浓度下对各受体植物幼苗生长具有不同程度的抑制作用。其中花的抑制活性最强,特别是对油菜、黄瓜的幼根和幼茎生长抑制率均在96%以上,种子、叶的抑制活性次之,根和茎的抑制活性最弱。曼陀罗叶、花和种子的乙酸乙酯提取物的抑制活性最强,其次是甲醇提取物和蒸馏水提取物,石油醚提取物的活性最弱。曼陀罗提取物对受体植物幼根的抑制效果高于对幼芽的抑制效果。

曼陀罗不同提取液对玉米螟的触杀活性研究

应用均匀设计法研究了曼陀罗全草的不同提取液对玉米螟的触杀作用。结果表明:乙醇浸提液对玉米螟具有较高的触杀作用,对玉米螟72h的致死浓度(LC50)为17.3281mg/mL,触杀致死率为96.1%;乙醚浸提液和水蒸气蒸馏液对玉米螟的触杀作用不显著。