洋金花体外抑制角质形成细胞炎性因子分泌和血管形成

目的以肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导角质形成细胞炎症为模型,研究传统草药洋金花(Datura metel L.)在银屑病治疗中可能的作用。方法使用角质形成细胞系HaCaT,构建了TNF-α诱导的银屑病细胞模型。实验分为3组:对照组、TNF-α银屑病模型组和TNF-α+洋金花干预组。以ELISA法测定IL-17和CCL20水平,利用Western blot检测核因子κB(NF-κB)亚单位p65蛋白的表达,使用体外血管生成分析试剂盒进行内皮细胞成血管实验。结果与TNF-α银屑病模型组相比,洋金花提取物极显著降低了TNF-α诱导的银屑病模型细胞培养上清液中的IL-17和CCL20的水平(P<0.001);洋金花提取物显著降低了TNF-α诱导的银屑病模型细胞的NF-κB亚单位p65的表达(P<0.01);洋金花提取物有效抑制了银屑病模型组细胞培养上清液对内皮细胞血管形成的诱导作用。结论洋金花提取物能够下调NF-κB信号通路分子,减少银屑病角质形成细胞炎性因子IL-17和CCL20的产生,抑制了血管形成。这些发现为洋金花在银屑病治疗中的应用提供了新的依据。

基于ERK和NF-κB途径探讨洋金花醉茄内酯Daturataturin A抑制HaCaT细胞增殖和迁移的作用

目的:基于ERK和NF-κB途径,对洋金花醉茄内酯Daturataturin A(DTA)诱导HaCaT增殖、迁移、炎症及相关分子机制进行研究,从而探讨其治疗银屑病的作用机制。方法:建立人角质形成细胞(HaCaT)为表皮细胞增殖状态的模型。通过蛋白质印迹法(Western blot)、迁移实验、CCK-8细胞增殖实验等方法研究DTA治疗银屑病的药效学及其作用机制。结果:DTA抑制HaCaT增殖和迁移呈剂量和时间依赖关系;DTA可抑制IL-17诱导的HaCaT过度增殖,同时可抑制持续活化的NF-κB和下游的炎症因子。结论:DTA具有抗增殖,降低HaCaT迁移能力和抗炎效应,可以通过ERK和NF-κB途径抑制HaCaT细胞增殖和迁移,从而治疗银屑病。其机制可能是通过ERK和NF-κB途径发挥作用。

白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫生长发育的影响

研究了白花曼陀罗(D a tura m etel L inn.)叶提取物对南方根结线虫(M eloid ogyne incogn ita Ch it-w ood.)生长发育的影响。结果表明,白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫胚胎发育和胚后发育有抑制作用。1%白花曼陀罗叶提取物处理48 h,仅有19.88%的卵完成胚胎发育,且变异卵增多;胚后发育历程、初侵染、初产卵日分别推迟2、4、6 d,雌虫产卵量降低。

白花曼陀罗叶总碱提取物杀线活性及其作用机理研究

为了解白花曼陀罗的杀线活性物质及其作用机理,对白花曼陀罗叶的总生物碱进行了提取鉴定,并通过测定乙酰胆碱酯酶活性及乙酰胆碱含量研究其作用机理,结果表明:生物碱是白花曼陀罗的重要杀线活性物质,可抑制线虫乙酰胆碱酯酶活性,提高线虫乙酰胆碱含量,直接作用于线虫的神经系统。

洋金花倍半萜类化合物的分离与鉴定

目的:研究洋金花中倍半萜类化学成分。方法:采用离子交换树脂、大孔吸附树脂、硅胶等柱色谱方法分离,利用多种波谱学测试技术进行化合物的结构鉴定。结果:从洋金花中分离并鉴定了5个倍半萜类化合物,分别为二氢红花菜豆酸(dihydrophaseic acid)(1),(6Z)-4-(3-hydroxybutylidene)-3,5,5-trimethyl-2-cyclohexene-1-one-O-β-D-glucopyranoside(2),(6E)-4-(3-hydroxybutylidene)-3,5,5-trimethyl-2-cyclohexene-1-one-O-β-D-glucopyrano-side(3),Vomifoliol(4)和(6S,9R)-3-oxo-α-ionol-9-O-β-D-glucopyranoside(5)。结论:化合物1-3为首次从洋金花中分离得到。

洋金花中生物碱类成分的分离与鉴定

为了分离、鉴定洋金花中的生物碱类化学成分,采用硅胶柱、ODS开放柱和制备液相等色谱方法分离,从提取物中分离得到6个生物碱类化合物,并通过IR、NMR和MS等技术确定了其化学结构分别为曼陀罗碱(meteloidine)、莨菪碱(hyoscyamine)、去水阿托品(apoatropine)、山莨菪碱(anisodamine)、东莨菪碱(hyoscine)和norharman。

曼陀罗属新变种温州曼陀罗与白曼陀罗的比较研究

报道了白曼陀罗ＤａｔｕｒａｍｅｔｅｌＬ的一新变种─温州曼陀罗Ｄ．ｍｅｔｅｌＬ．ｖａｒ．ｗｅｎｃｈｏｗｅｎｓｉｓ。并通过电镜扫描、凝胶电泳及生物碱测定的实验，比较了两者的形态、超微结构和化学组成的差异。结果表明，本变种与白曼陀罗外部形态不同，花冠和花粉粒扫描电镜观察也有明显区别，可溶性蛋白及过氧化物同工酶凝胶电泳图谱区别不明显。本变种东莨菪碱含量明显高于白曼陀罗，这种特性是稳定的。

新疆产白花曼陀罗种子化学成分研究

目的：对新疆产白花曼陀罗种子进行化学成分研究。方法：采用硅胶、ODS以及Sephadex LH-20等色谱技术分离纯化化合物,根据理化性质及波谱数据解析鉴定化合物结构。结果：从白花曼陀罗种子中分离并鉴定出10个化合物,分别为：异嗪皮啶（1）、滨蒿内酯（2）、曼陀罗萜二醇（3）、对苯二酚（4）、Arenarine D（5）、香草醛（6）、N-阿魏酰酪胺（7）、东莨菪内酯（8）、β-谷甾醇（9）、Hyoscyamilactol（10）。结论：其中,化合物1、2为首次从茄科植物中分离得到,化合物3～8为首次从该植物中分离得到。

洋金花种子化学成分研究(Ⅳ)

目的:研究洋金花种子的化学成分。方法:采用硅胶柱层析、ODS柱及制备HPLC等色谱技术进行分离,结合1H-NMR、13C-NMR等波谱技术进行鉴定,利用LPS诱导RAW264.7细胞模型进行化合物抗炎活性评价。结果:从洋金花种子乙酸乙酯萃取物中分离得到14个化合物,分别鉴定为:(-)-开环异落叶松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷(1)、cis-grossamide K(2)、落叶松脂醇-4'-O-β-D-葡萄糖苷(3)、thoreliamide C(4)、melongenamide D(5)、落叶松树脂醇-9-O-β-D-吡喃型葡萄糖苷(6)、臭矢菜素A(7)、异嗪皮啶(8)、baimantuoluoside E(9)、daturafoliside G(10)、daturametelin J(11)、daturametelin I(12)、daturataturin A(13)、daturataurin B(14)。化合物1~3、5~7和13对LPS诱导RAW264.7释放的NO具有较好的抑制作用,IC50值为45.9~84.4μmol/L。结论:其中,化合物1~3为首次从茄科植物中分离得到,化合物4为首次从曼陀罗属植物中分离得到,化合物5、6为首次从该植物中分离得到,且化合物1~3、5~7和13具有一定程度的抗炎活性。

洋金花生物碱最佳提取酸度研究

测定洋金花ｐＨ１～７各乙醇提取物中总生物碱、东莨菪碱和莨菪碱的含量，认为采用酸性乙醇法提取洋金花中的生物碱，其ｐＨ值控制在２～３为宜。

曼陀罗茎段愈伤组织诱导和再生植株的研究

本试验以曼陀罗茎段为外植体,在附加不同植物激素组合的培养基中对愈伤组织的诱导和植株再生进行研究。结果表明:采用修改的MS培养基(除去甘氨酸,维生素B1含量增加至0.5mg/L,pH5.5)附加2mg/L2,4-D可由曼陀罗茎段诱导大量胚性愈伤组织;愈伤组织继代选用0.5mg/L2,4-D为宜;不定芽的诱导采用MS培养基(20g蔗糖,8g琼脂,0.1g水解干酪素)+6-BA(0.5mg/L);幼苗进一步转接至1/2MS+IBA(0.2mg/L)生根培养基中,可完成曼陀罗茎段愈伤组织诱导和再生植株的组织培养过程。

烟草与白花曼陀罗属间远缘杂种后代化学成分的研究

为缓解吸烟与健康的矛盾,通过常规育种的方法将普通烟草品种78-04与药用植物白花曼陀罗(Datura metel L.)进行属间远缘杂交育种,对选育出的新型烟草品系长柄曼陀罗烟(Mantuoluo tobacco)的内在化学成分和药用成分进行分析。酯酶同工酶和RAPD分析证实,长柄曼陀罗烟中转入了亲本药用植物的遗传物质。烟叶内在化学成分及药用成分分析显示,长柄曼陀罗烟具有低糖、中高烟碱,含有东莨菪碱和阿托品等药用成分的特点。普通烟草与白花曼陀罗属间远缘杂交能创造变异、产生烟草新类型,对降低卷烟产品的危害性具有一定作用。

白花曼陀罗悬浮培养细胞生长和生物碱活性成分合成

目的 研究白花曼陀罗细胞悬浮培养合成生物碱。方法 在MS液体培养基上悬浮培养细胞生产生物碱 ,以碳源、pH值、接种量等为影响因子进行研究。结果 蔗糖为最佳碳源 ,细胞接种量以鲜重 1 5～ 2 0g/L、培养液初始pH值 5 5～ 6 0对曼陀罗悬浮培养细胞生长和生物碱合成最有利 ,加入苯丙氨酸能促进生物碱的合成。

洋金花的化学成分研究(Ⅳ)

目的:分离、鉴定洋金花提取物中的化学成分。方法:采用硅胶柱、ODS开放柱和制备液相等色谱方法分离,并通过NMR和MS等谱学技术确定结构。结果与结论:从提取物中分离得到5个酚酸类化合物,分别为托品酸甲酯(1),托品酸(2),苯甲酸甲酯(3),4-羟基苯乙酮(4),3,4-二羟基甲苯(5)。

洋金花果皮中生物碱成分及抗肿瘤活性研究

目的:研究洋金花果皮中生物碱成分及抗肿瘤活性。方法:采用硅胶、Sephadex-LH20及HPLC等色谱方法对化合物进行分离和纯化,并利用1H-NMR、13C-NMR及MS波谱方法鉴定化合物的结构,以肝癌Hep G-2、肺癌A549及胃癌SGC-7901肿瘤细胞为受试细胞,采用MTT法评价化合物的抗肿瘤活性。结果:该研究从洋金花果皮70%乙醇回流提取物的乙酸乙酯部位中共分离得到10个生物碱类化合物,分别鉴定为cyclo(Phe Tyr)(1)、9-hydroxycanthin-6-one(2)、(2,5-dioxo-4-imidazolidinyl)-carbamic acid(3)、1-ribityl-2,3-diketo-1,2,3,4-tetrahydro-6,7-dimethyl-quinoxaline(4)、grossamide(5)、cannabisin F(6)、hyoscyamine(7)、trans-N-p-coumaroyl tyramine(8)、N-transferuloyloctopamine(9)和(2S,E)-N-[2-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]ferulamide(10);体外抗肿瘤实验表明,1~10号化合物均具有潜在肿瘤细胞抑制活性。结论:化合物1~4首次从茄科植物中分离得到,且化合物1、2、5、6和8表现为较强的抗肿瘤活性。

白花曼陀罗植株再生及快繁体系的建立

目的:探索白花曼陀罗植株再生与快繁体系的最佳培养条件。方法:以白花曼陀罗的茎段、叶片为外植体,建立以叶片为材料的植株再生体系和以茎段为材料的快繁体系。结果:白花曼陀罗不同外植体的最优消毒方法为:叶片采用75%酒精浸泡6 s,0.1%HgCl2浸泡6 min;茎段采用75%酒精浸泡8 s,0.1%HgCl2浸泡7 min。叶片的愈伤组织最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,丛生芽的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;茎段的快繁体系最佳培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA。组培苗生根的最佳培养基为MS+0.5 mg/L IBA;组培苗经驯化及移栽,成活率达90%以上。结论:建立了白花曼陀罗植株再生及快繁体系。

薄层扫描法测定复方洋金花擦剂中氢溴酸东莨菪碱的含量

目的:建立复方洋金花擦剂中东莨菪碱的含量测定方法。方法:采用CS-930双波长薄层扫描法测定。样品用氯仿提取,并在硅胶-G板上以氯仿—甲醇—氨水(9:1:0.05)作展开剂,用碘化铋钾显色,展开后的东莨菪碱斑点用CS-930型双波长薄层扫描仪在λ_s=495nm,λ_R=610nm的条件下进行扫描测定。结果:样品的分离和含量测定都较满意,在5～25μg范围内线性关系良好,r=0.9978,样品的回收率为97.1％,RSD为1.4％。结果:本法简单、准确、可靠,适用于常规分析。

基于肠-免疫-皮肤轴探讨洋金花对银屑病小鼠肠道Th17/Treg轴的影响

目的探讨洋金花醉茄内酯类化合物对银屑病小鼠肠道中Th17/Treg细胞功能的影响。方法采用经典的银屑病小鼠模型,即咪喹莫特乳膏(IMQ)诱导小鼠背部皮肤产生银屑病样病理模型,并随机分为四组,即空白组、模型组、洋金花组和雷公藤阳性药物组。采用Psoriasis area and severity index(PASI)分析各组皮损严重程度;应用流式细胞法检测小鼠肠系膜淋巴结中Th17/Treg细胞数量表达;应用酶联免疫吸附法(ELISA法)依次检测肠粘膜中Th17/Treg细胞相关因子的含量。结果洋金花组能减少IMQ诱导的PASI评分,降低肠系膜中Th17细胞表达及相关细胞因子,而升高Treg细胞的表达及相关细胞因子。结论洋金花醉茄内酯类化合物可降低银屑病小鼠肠道Th17细胞功能,同时升高Treg细胞功能,进一步提示在肠-免疫-皮肤轴中,洋金花醉茄内酯类化合物通过影响肠道中的Th17/Treg细胞免疫平衡而达到防治银屑病的作用。

洋金花的化学成分研究(Ⅴ)

目的:分离鉴定洋金花(Datura metel L.)中的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、ODS反相柱色谱等分离方法,对洋金花甲醇提取物进行分离纯化,分离得到了2个化合物,并通过理化性质及UV、NMR和MS等波谱学方法鉴定结构。结果:分离得到的2个化合物,分别是:Alkesterol B(1),睡茄素B(Lucium substance B,2)。结论:化合物1为首次从曼陀罗属植物中分离得到,化合物2为首次从该植物中分离得到。

洋金花叶化学成分及其抗炎活性研究

目的 研究洋金花Datura metel L.叶化学成分及其抗炎活性。方法 采用大孔吸附树脂、硅胶、ODS、HPLC法对洋金花叶70%乙醇提取物进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构,采用RAW264.7模型评价其体外抗炎活性。结果 从中分离得到28个化合物,分别鉴定为7,27-dihydroxy-1-oxowitha-2,5,24-trienolide(1)、acnistoferin(2)、baimantuoluoline K(3)、daturafoliside G(4)、daturafoliside H(5)、daturafoliside I(6)、daturafoliside R(7)、daturafoliside S(8)、daturametelin A(9)、daturametelin I(10)、daturametelin J(11)、daturataturin A(12)、baimantuoluoside H(13)、(22R)-27-hydroxy-7α-methoxy-1-oxowitha-3,5,24-trienolide(14)、柯里拉京(15)、desmethylagrimonolide 6-O-β-D-glucopyranoside(16)、仙鹤草内酯-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(17)、丁香脂素(18)、丁香脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(19)、1,6-di-O-coumaroyl glucopyranoside(20)、滨蒿内酯(21)、东莨菪内酯(22)、野蔷薇亭(23)、(-)-loliolide(24)、(+)-isololiolide(25)、邻苯二甲酸二丁酯(26)、对羟基苯甲醛(27)、没食子酸乙酯(28)。化合物9、20能抑制LPS诱导细胞释放NO,IC_(50)分别为25.14、16.26μmol/L。结论 化合物15~17、20、23、28为首次从茄科植物中分离得到,化合物2、19、24、27首次从曼陀罗属植物中分离得到。化合物9、20具有较强的抗炎活性。