PHI对Burkitt淋巴瘤Daudi细胞株组蛋白甲基化和乙酰化调控的实验研究

本研究观察异硫氰酸苯己酯(PHI)在体外对Burkitt淋巴瘤Daudi细胞株的作用及对淋巴瘤细胞表观遗传学调控的影响,初步探讨其可能的机制。用流式细胞术检测PHI处理后的细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法检测PHI处理后的细胞的组蛋白H3、H4乙酰化和H3K4、H3K9甲基化状态改变。结果表明,PHI诱导细胞凋亡并提高组蛋白H3、H4乙酰化水平,组蛋白H3K4甲基化增强,而H3K9甲基化减弱。结论:PHI能上调与转录激活相关的组蛋白H3乙酰化水平及甲基化H3K4,下调转录抑制相关的组蛋白甲基化H3K9,促进肿瘤细胞凋亡,PHI可作为淋巴瘤的靶向治疗药物。

PHI对Burkitt淋巴瘤Daudi细胞株凋亡调控的实验研究

目的:研究PHI在体外对伯基特淋巴瘤淋巴瘤Daudi细胞株的作用,观察PHI对诱导淋巴瘤细胞凋亡的影响,初步探讨其可能的机制。方法:用MTT比色法检测体外Daudi细胞在PHI作用后增殖率的变化。用流式细胞术观察PHI诱导Daudi细胞凋亡。用蛋白免疫印迹法(Western Blot)观察在PHI作用下凋亡相关蛋白Bcl-2、proCaspase-9、proCaspase-3、McL-1、XIAP、Cyt-C表达的变化。结果:经PHI处理的Daudi细胞增殖受到明显抑制;PHI可下调Daudi细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、McL-1、XIAP、Cyt-C,proCaspase-9、proCaspase-3的表达,诱导Daudi细胞凋亡。结论:PHI抑制伯基特淋巴瘤淋巴瘤细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、McL-1、XIAP、Cyt-C、proCaspase-9、proCaspase-3的表达,可能通过影响线粒体凋亡途径促进Daudi细胞凋亡,抑制其细胞增殖,可能是治疗淋巴瘤的潜在新药。

hsa-miR-150再表达对Burkitt淋巴瘤增殖与凋亡的影响

目的探讨hsa-miR-150在正常人B淋巴细胞群及人Burkitt淋巴瘤(Burkitt’s lymphoma,BL)中的表达,分析hsa-miR-150再表达对人BL细胞株Daudi及Raji体外增殖及凋亡的影响。方法采用流式细胞技术(flow cytometry,FCM)从扁桃体炎标本中分选出正常B淋巴细胞群,应用qRT-PCR技术检测hsa-miR-150在细胞群中的表达,同时检测hsa-miR-150在BL细胞株Daudi及Raji中的表达;将载有hsa-miR-150的慢病毒稳定转染Daudi及Raji,采用FCM、MTT及IP染色法观察hsa-miR-150再表达对Daudi及Raji细胞增殖与凋亡的影响。结果 FCM从扁桃体组织中分选出4群正常的B淋巴细胞群,分别为nave细胞(NC)、中心母细胞(CB)、中心细胞(CC)、记忆B细胞(MC),hsa-miR-150在NC、CB、CC、MC中的表达呈动态性,相对于NC,CB及CC低表达hsa-miR-150(P<0.001)。与正常B淋巴细胞相比,hsa-miR-150在Daudi及Raji中明显低表达(P<0.001)。与对照组相比,实验组细胞增殖明显受抑制(P<0.001),凋亡明显增加(P<0.001)。结论 hsa-miR-150对正常B淋巴细胞的分化具有重要作用,与BL的发生、发展可能存在一定关系;hsa-miR-150再表达可抑制Daudi及Raji细胞增殖,诱导其凋亡,为后续诱导分化治疗研究打下基础。