基于药效学优选达原饮颗粒的提取工艺

目的结合药效学和正交试验优选达原饮颗粒的提取工艺。方法将小鼠随机分为模型组、阳性对照组、工艺(1)样品组、工艺(2)样品组,工艺(3)样品组,以对二甲苯致小鼠耳肿胀程度的影响作为指标考察不同提取工艺路线。再通过正交试验考察溶剂用量、提取时间、提取次数,利用综合评分法优选提取工艺并进行验证。结果最佳提取工艺为全方水提取,提取次数2次,提取时间1 h,加溶剂量依次为10倍、8倍。结论基于药效学优选得到的提取工艺经验证重复性高,结果稳定。

基于代谢组学研究经典名方达原饮对RSV寒湿郁肺证小鼠模型的作用机制

目的 基于超高液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱法(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole electrostatic field orbital trap mass spectrometry, UHPLC-QE-MS)研究达原饮对模型小鼠的干预及肺组织代谢物的影响,以探究达原饮治疗呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus, RSV)寒湿郁肺证的作用机制。方法 采用寒湿刺激加RSV滴鼻感染的方法建立RSV寒湿郁肺证小鼠模型,综合小鼠活动状态、肺指数和肺组织病理,结合肺组织中白介素-6(Interleukin-6,IL-6)和白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)炎症因子的含量,初步评价达原饮对RSV寒湿郁肺证小鼠的治疗效果。利用UHPLC-QE-MS技术检测正常组、模型组、达原饮中剂量组小鼠肺组织代谢物,以正交偏最小二判别分析进行多元统计分析模式识别,以P<0.05且VIP值>1为条件筛选差异代谢物,并借助MetaboAnalyst 5.0数据库富集代谢通路。结果 达原饮可以显著改善RSV寒湿郁肺证小鼠的一般状态,降低肺指数,改善肺组织病理,并降低肺组织中IL-6、IL-1β的含量。代谢组学结果显示,与达原饮调控相关的差异代谢物共有35个,主要涉及嘌呤代谢、花生四烯酸、甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢等代谢通路。结论 从代谢组学角度分析了达原饮治疗RSV寒湿郁肺证的作用机制,为达原饮抗病毒研究及临床应用奠定了基础。

UPLC-MS/MS法同时测定达原饮中28种成分

目的建立UPLC-MS/MS法同时测定达原饮中没食子酸、原儿茶酸、新芒果苷、儿茶素、咖啡酸、芒果苷、异芒果苷、芍药内酯苷、芍药苷、牡荆素、甘草苷、野黄芩苷、黄芩苷、甘草素、知母皂苷BⅡ、槲皮素、汉黄芩苷、苯甲酰芍药苷、异甘草素、和厚朴酚、厚朴酚、去甲槟榔次碱、槟榔次碱、槟榔碱、表儿茶素、黄芩素、甘草酸铵、汉黄芩素的含量。方法分析采用Syncronis C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温30℃;电喷雾离子源;正负离子扫描;选择反应监测模式。结果28种成分在各自范围内线性关系良好(R 2≥0.9910),平均加样回收率95.60%[WTBZ]~103.53%[WTBZ],RSD 0.60%[WTBZ]~5.45%[WTBZ]。结论该方法快速简便,选择性好,准确可靠,可用于达原饮的质量控制。

疫病名方达原饮临床应用概况

达原饮作为疫病学说代表方剂在中医疫病领域十分重要,自其创制后于后世应用广泛,现对其近年应用经验做一综述,供诸同道参考。

从“膜腠三焦–玄府”论析达原饮

“邪伏膜原”是温病学的一个重要概念,也是温病中的一个重要病机,而达原饮是治疗“邪伏膜原”证的重要方剂。文章通过结合膜腠三焦理论与玄府学说,认为“邪伏膜原”证的病机本质是湿浊阻滞三焦,玄府郁闭,郁而化热。达原饮通过巧妙的药物配伍,使全方具有祛湿浊、通玄府、宣郁热的功效,故能针对“邪伏膜原”证的病机取得显著的治疗效果。

从温病“先入后出,从阴引阳”理论探讨达原饮类方的中医思维

达原饮为明末清初医家吴又可首创,在瘟疫盛行之时,其影响范围遍布全国,吴又可在总结大量临床经验教训的基础上,创《温疫论》一书,其中达原饮可称众方之首。后世温病学派如叶天士、吴鞠通、王孟英、薛生白、雷少逸、俞根初等众多医家,灵活变通,对达原饮有不同程度的继承和创新。本文通过分析达原饮及其变方的用药逻辑,以此为例提出温病学派用药规律的创新性认知,即“先入后出”、“从阴引阳”为主的用药理论。

达原饮合升降散加减治疗不明原因发热验案举隅

不明原因发热是临床常见的疑难杂症,病因病机复杂多变,病情缠绵难愈,给患者造成极大的生活负担。达原饮对于邪伏膜原所致的温病,有开达膜原、辟秽降浊作用;升降散功擅升清降浊,宣畅气机,给邪热上通下达之出路。两者合用对于湿热内伏膜原导致的不明原因发热具有明确疗效。高祥福教授系浙江省名中医,应用中医药治疗肾脏疾病、风湿免疫病及疑难杂症颇有经验。

基于网络药理学和动物实验探讨达原饮治疗幽门螺杆菌阳性口周痤疮作用机制

目的 基于网络药理学和动物实验探讨达原饮治疗幽门螺杆菌(Hp)阳性口周痤疮的作用机制。方法 通过TCMSP获取达原饮的有效活性成分及其对应靶点,从GeneCards、OMIM、TTD数据库检索Hp和口周痤疮靶点,取药物与疾病的交集靶点作为达原饮治疗Hp阳性口周痤疮靶点,采用Cytoscape3.7.2及STRING数据库构建交集靶点蛋白相互作用网络,筛选核心靶点,利用DAVID数据库与微生信平台对核心靶点进行GO和KEGG通路富集分析。采用Hp菌液灌服和痤疮丙酸杆菌混悬液皮内注射建立Hp阳性口周痤疮大鼠模型,观察达原饮干预效果,并对核心靶点及相关通路进行初步验证。HE染色观察口周皮肤及胃组织形态,ELISA检测大鼠口周皮肤组织Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB(NF-κB)表达及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量。结果 筛选出达原饮活性成分145个,对应靶点253个,药物与疾病交集靶点57个,达原饮治疗Hp阳性口周痤疮核心靶点为IL6、TNF、IL1B、AKT1、TP53等,KEGG通路富集分析得到153条信号通路,主要涉及癌症信号通路、脂质与动脉粥样硬化、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、TLR信号通路、TNF信号通路等。达原饮能够下调Hp阳性口周痤疮大鼠口周皮肤组织TLR4、MyD88、NF-κB表达及血清TNF-α、IL-6含量(P<0.01)。结论 达原饮可能通过调控TLR4/NF-κB信号通路,降低炎症因子TNF-α、IL-6水平,减轻口周皮肤的炎症损伤,发挥对Hp阳性口周痤疮的治疗作用。

基于网络药理学及实验验证探讨达原饮治疗幽门螺杆菌阳性口疮作用机制

目的基于网络药理学和实验验证探究达原饮治疗幽门螺杆菌(Hp)阳性口疮的作用机制。方法利用TCMSP数据库收集达原饮的活性成分及其作用靶点,通过GeneCards数据库获取Hp阳性口疮的相关靶点,利用Venny2.1.0在线平台对药物活性成分靶点与疾病靶点取交集,使用STRING11.0数据库构建蛋白相互作用网络,并运用Cytoscape3.7.1软件筛选核心靶点,利用DAVID数据库对交集靶点进行GO和KEGG通路富集分析。采用标准Hp菌液灌胃联合冰醋酸灼烧口腔黏膜构建Hp阳性口疮大鼠模型并予达原饮干预,观察模型大鼠口腔、胃黏膜组织形态,检测核心靶点在大鼠血清及口腔、胃黏膜组织中的表达。结果经数据库检索和筛选得到达原饮治疗Hp阳性口疮靶点165个,主要活性成分为槲皮素、山柰酚、5,8,2'-三羟基-7-甲氧基黄酮等,核心靶点有AKT1、IL6、TP53、TNF等。GO和KEGG通路富集分析提示达原饮治疗Hp阳性口疮主要集中于炎症反应相关通路。动物实验显示,与空白组比较,模型组大鼠口腔和胃黏膜组织结构紊乱,炎性细胞浸润明显,血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量升高(P<0.05),口腔、胃黏膜组织Toll样受体4(TLR4)、NLRP3含量升高(P<0.05),口腔黏膜组织TLR4、核因子-κB(NF-κB)蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,达原饮各剂量组大鼠口腔和胃黏膜组织病理形态明显改善,血清IL-6、TNF-α及口腔、胃黏膜组织TLR4、NLRP3含量降低,口腔黏膜组织TLR4、NF-κB蛋白表达降低(P<0.05)。结论达原饮可能通过下调TLR4、NF-κB水平调节Hp阳性口疮的炎症发展,改善其症状。

达原饮对Hp感染模型大鼠胃组织和口周皮肤TLR4/NF-κB/NLRP3通路的影响

目的:观察达原饮对幽门螺杆菌(Hp)感染模型大鼠胃组织和口周皮肤Toll样受体4/核因子-κB/NOD样受体蛋白3(TLR4/NF-κB/NLRP3)信号通路,以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素-1β(IL-1β)等炎症因子的影响,探讨达原饮治疗Hp感染的机制。方法:选取44只雄性SD大鼠,随机分为空白组8只及造模组36只,造模组予以Hp菌液灌胃造模,造模成功后,将造模组随机分为模型组、达原饮高剂量组、达原饮低剂量组、西药组,每组各8只,分别予以相应药物灌胃,空白组、模型组予以等量生理盐水灌胃,灌胃2周。观察大鼠造模前后一般情况改变,苏木精-伊红(HE)染色观察口周皮肤和胃组织病理学变化,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠口周皮肤和胃组织TLR4、NF-κB、NLRP3表达以及血清中TNF-α、IL-1β表达水平。结果:给药干预后,与模型组相比,西药组、达原饮高剂量组、达原饮低剂量组大鼠皮毛柔顺光泽,饮食水量增加,大便逐渐成型,胃黏膜上皮细胞层次基本分明,排列较整齐,炎症细胞浸润减少,口周皮肤角化过度、棘层增厚、毛囊周围轻度炎症细胞浸润等情况均有不同程度改善。与模型组相比,西药组、达原饮高剂量组、达原饮低剂量组大鼠胃组织和口周皮肤TLR4、NF-κB、NLRP3蛋白表达水平均有不同程度的下调(P<0.05或P<0.01),血清炎症因子TNF-α、IL-1β表达明显下降(P<0.01)。结论:达原饮可能通过干预TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路,抑制TLR4、NF-κB、NLRP3及下游炎症因子的表达,减轻Hp感染模型大鼠胃组织和口周皮肤炎症损伤。

达原饮治疗病毒性疾病的化学成分生物活性研究进展

新型冠状病毒感染(Corona virus disease,COVID-19)疫情的暴发对人类健康与社会稳定造成了巨大威胁。随着病毒在全球的迅速蔓延,针对新型冠状病毒的药物开发及其相关研究成为医药领域的迫切问题。达原饮作为治疗瘟疫初起,邪伏膜原的传统名方,在新型冠状病毒感染的防治中发挥了重要作用,国家卫健委于2020年发布的《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第三版)》中首次将达原饮推荐用于湿邪郁肺证的治疗。研究通过综合相关文献,从化学成分及生物活性方面对达原饮化学成分的研究现状进行综述,探讨病毒性感染治疗靶点组和达原饮有效成分组的可能组成模式,以期为充分发挥该经典名方的临床价值与抗病毒机制的研究提供科学依据,同时为该复方的研发提供参考。

王庆国教授运用柴胡达原饮治疗一例特殊疑似COVID-19分析

柴胡达原饮出自清代俞根初所著《重订通俗伤寒论》,是在吴又可《瘟疫论》达原饮方加减化裁而来,治疗湿热阻遏膜原之证。COVID-19患者多表现为湿热阻遏膜原,患者西药常规治疗11天,病情逐步加重,王庆国教授予柴胡达原饮加减治疗,症状得到迅速改善。通过病案来分析探讨COVID-19湿热阻遏膜原证的治疗。

基于VOSviewer的达原饮抗疫前景分析

目的:对达原饮相关的文献数据进行分析,挖掘达原饮的研究热点,探讨达原饮的抗疫研究前景。方法:以“达原饮”为关键词在CNKI中检索,收集研究达原饮的文献,用VOSviewer对文献数据进行分析,绘制可视化图谱。结果:共检索出469篇文献,纳入符合标准研究文献437篇,312个机构发表了达原饮相关文章,文献分布在145种期刊中。VOSviewer可视化分析表明“达原饮”“新型冠状病毒肺炎”是突显强度最高的关键词,聚类重点体现在达原饮抗疫理论溯源、相关数据挖掘、现代药理研究及临床应用四个方面。结论:通过知识图谱可视化分析,得到达原饮研究的热点领域集中在新型冠状病毒肺炎为代表的的疫病领域。达原饮作为治疗疫病的基础方剂之一治疗湿浊疫毒的本质值得我们进一步探索。

经典名方达原饮的古今文献分析

达原饮出自《温疫论》,原名达原散,为明代中医吴又可所创,由槟榔、厚朴、草果仁、知母、芍药、黄芩、甘草等7味药组成,功效为开达膜原、辟秽化浊,主治温疫秽浊毒邪伏于膜原,是国家公布的首批百首经典名方之一。后世医家对其组方加减,衍生出柴胡达原饮、逍遥达原饮等多个方并应用于临床。以“达原饮”为关键词,在中国知网进行检索发现,共有271篇相关文献,近五年相关文献仅85篇,多集中在药学研究和临床研究。达原饮具有抗病毒、抗炎、解热等作用,现代临床应用于发热、慢性肾功能衰竭、小儿上呼吸道感染、失眠等多种系统疾病,2020年更是在治疗新型冠状病毒感染中发挥了重要作用。达原饮在临床具有很大的应用价值,通过对其进行古今文献综述,分析并确定其关键信息,以期为达原饮的临床合理应用及后续深入研究开发提供参考。

高效液相色谱法测定达原饮中槟榔生物碱的含量

目的:采用高效液相色谱法测定达原饮中槟榔生物碱的含量。方法:色谱条件为:Venusil SCX色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm,300Å),流动相:甲醇:0.2%磷酸(氨水调节pH值至3.8)=60:40,检测波长:210 nm,柱温:30℃,流速:1.0 mL•min^(-1)。结果:4种槟榔生物碱分离度良好,各组分在浓度范围内线性关系良好,加标回收率(n=9)在98.37%~102.11%,RSD值均小于2%。达原饮药液中去甲槟榔碱、槟榔碱、去甲槟榔次碱和槟榔次碱的含量分别为0.014 mg•mL^(-1)、0.046 mg•mL^(-1)、0.036 mg•mL^(-1)和0.018 mg•mL^(-1)。结论:该方法准确度高、稳定性强、灵敏度和重复性良好,简便可靠,可用于达原饮中槟榔生物碱的含量测定及质量控制。

达原饮对RSV寒湿郁肺证小鼠肺部损伤和肠道菌群的影响

目的探讨达原饮对RSV寒湿郁肺证小鼠肺部损伤和肠道菌群的影响。方法将36只BALB/c小鼠分为正常组(NC组)、模型组(MC组)、阳性对照组(LBM组,利巴韦林57.59 mg/kg)和达原饮低、中、高剂量组(LDYY、MDYY、HDYY组,达原饮按生药量计1.67、3.34、6.68 g/kg),每组6只。除NC组外,其余各组小鼠采用“寒湿造模+RSV感染”的方式建立RSV寒湿郁肺证小鼠模型;于第2次寒湿刺激结束后,鼻腔滴注50倍半数细胞培养物感染量的RSV液,每天1次,连续3 d;各药物组于每次滴鼻4 h后灌胃相应药液,每天1次,连续5 d。检测小鼠血清中胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)水平,肺组织上清液中白细胞介素6(IL-6)、IL-1β水平,外周血淋巴细胞百分比;观察肺组织病理形态变化并分析肠道菌群变化。结果与MC组比较,达原饮各组小鼠血清中MTL水平(HDYY组除外)和肺组织上清液中IL-6、IL-1β水平均显著降低,血清中GAS水平(HDYY组除外)均显著升高(P<0.05或P<0.01),肺组织病理状态均改善;LDYY组外周血中T淋巴细胞的百分比和MDYY组外周血中T、B淋巴细胞的百分比均显著升高(P<0.05或P<0.01)。与NC组比较,MC组中拟杆菌门、放线菌门、拟杆菌属、另枝菌属、拟杆菌纲、产酸拟杆菌、拟普雷沃氏菌属等呈高丰度表达,厚壁菌门、变形菌门、毛螺菌属NK4A136组、丝状菌属、未分类的Clostridiales等呈低丰度表达;经中剂量达原饮干预后,各菌群相对丰度均有回调趋势,其差异物种包括Lachnospiraceae_UCG-006、瘤胃球菌属Ruminococcus等。结论达原饮能够减轻RSV寒湿郁肺证小鼠的肺部损伤,其机制可能与减轻炎症、调节胃肠激素水平和淋巴细胞百分比以及肠道有益菌和有害菌的相对丰度有关。

加味小青龙汤合达原饮治疗新型冠状病毒感染的疗效总结及网络药理学研究

目的分析加味小青龙汤合达原饮治疗新型冠状病毒感染(COVID-19)的临床效果,探讨其活性成分、潜在靶点和作用机制。方法比较常规治疗和加味小青龙汤合达原饮治疗COVID-19的中医证候疗效、炎症指标及不良反应,评价加味小青龙汤合达原饮治疗COVID-19的临床效果。应用TCMSP数据库收集加味小青龙汤合达原饮中活性成分,使用SwissTargetPrediction工具预测其潜在靶点;利用Pubchem,Immport等数据库获取COVID-19相关的疾病靶点,取药物-疾病交集靶点;对交集靶点进行蛋白相互作用(PPI)分析与网络构建;对交集靶点进行GO和KEGG分析;利用Autodock vina软件对其重要成分及关键靶点进行分子对接。结果经加味小青龙汤合达原饮治疗后,COVID-19患者的临床症状和炎症指标改善均优于对照组。加味小青龙汤合达原饮治疗COVID-19的相关靶点共34个,其中核心靶点有EGFR、RELA、RELA、ICAM-1、MMP9等。主要通路涉及PI3K-Akt信号通路、Ras信号通路、MAPK信号通路等。结论加味小青龙汤合达原饮可通过多成分-多靶点治疗新型冠状病毒引起的“寒湿疫”。

达原饮、三消饮辨证治疗新冠病毒感染经验刍议

新冠病毒感染属中医疫病,位在膜原,性偏寒湿,治以开达膜原、散寒化湿,以达原饮及三消饮为代表方。《温疫论》中载疫有9种传变,而临床中主要可分邪伏膜原、传表、传里3种证型,辨别重在舌苔。邪伏膜原证,舌苔白厚腻、或如积粉,治宜达原饮透达膜原。疫伏膜原,分而传表证,舌苔黄白相间,治宜三消饮透达膜原,解表通里,并据大便情况进行加减。疫伏膜原,分而传里证,苔黄,宜达原饮加大黄疏达膜原,清泻里热。

亲水作用色谱法测定达原饮中槟榔生物碱的含量

采用亲水作用色谱法(HILIC)测定达原饮中槟榔生物碱的含量,4种槟榔生物碱分离度良好,各组分在浓度范围内线性关系良好,加标回收率(n=9)98.77%~102.87%,RSD值均小于2.0%。经过样品测试,达原饮药液中去甲槟榔碱含量为0.0209 mg•mL^(-1),槟榔碱含量为0.0679 mg•mL^(-1),去甲槟榔次碱含量为0.0545 mg•mL^(-1),槟榔次碱含量为0.0269 mg•mL^(-1)。该检测方法简便、准确、灵敏、重复性好,可用于测定达原饮中槟榔生物碱的含量。

基于“邪伏膜原”探讨达原饮治疗IgA肾病的理论基础

IgA肾病是常见的原发性肾小球疾病之一,其起病隐匿,临床表现以肾性血尿为主,伴或不伴有蛋白尿。有研究表示,在我国肾活检病理结果IgA肾病占比高达50.7%~58.2%,且发病率有逐年上升趋势[1,2]。中医认为该病的发病特点与伏邪致病的特点具有高度的相似性,病机为本虚标实,本虚为先天不足,标实多为外感六淫邪气,浊邪伏藏于体内,不及时发病,日久正气内伤,邪气内陷,伺机发病。