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甲醛固定对Live/Dead BacLight Bacterial Viability Kit死活细菌染液荧光显微计数海洋细菌的影响 被引量:2
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作者 张瑜斌 崔焱芸 +1 位作者 郑运 孙省利 《生态科学》 CSCD 北大核心 2013年第5期636-641,共6页
利用Live/Dead BacLight Bacterial Viability Kit死活细菌染液对采自湛江东海大堤海水、沉积物细菌和大型海藻拟刚毛藻(Cladophoropsis zollingeri)内生细菌数量进行了甲醛固定处理前后的荧光显微计数对比分析。结果表明,新鲜样品(不... 利用Live/Dead BacLight Bacterial Viability Kit死活细菌染液对采自湛江东海大堤海水、沉积物细菌和大型海藻拟刚毛藻(Cladophoropsis zollingeri)内生细菌数量进行了甲醛固定处理前后的荧光显微计数对比分析。结果表明,新鲜样品(不加甲醛固定)、甲醛刚固定样品、甲醛固定1周样品和甲醛固定2周样品中海洋细菌数量差异不显著(p>0.05)。甲醛固定对Live/Dead BacLight Bacterial Viability Kit死活细菌染液荧光显微计数海洋细菌数量无显著影响,固定后的样品可在2周内完成计数。 展开更多
关键词 甲醛固定 LIVE dead BacLight bacterial Viability Kit染液 细菌荧光显微计数
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EMA结合PCR技术有效鉴别副溶血弧菌死活细胞 被引量:11
2
作者 李青 钟青萍 王丽 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期108-111,共4页
将EMA(Ethidium monoazide)选择渗透性和PCR技术相结合,建立检验副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus死活细胞的EMA-PCR新方法.研究表明,25μg/mL或更高质量浓度的EMA可以抑制2.0×107CFU/mL的副溶血弧菌死细胞DNA的扩增,未经EMA... 将EMA(Ethidium monoazide)选择渗透性和PCR技术相结合,建立检验副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus死活细胞的EMA-PCR新方法.研究表明,25μg/mL或更高质量浓度的EMA可以抑制2.0×107CFU/mL的副溶血弧菌死细胞DNA的扩增,未经EMA处理的对应样品PCR反应呈阳性;而用相同浓度EMA处理2.0×107CFU/mL的活细胞菌悬液能扩增出目的产物.同时,对EMA处理中卤素灯的曝光时间进行优化,确定EMA处理的最佳曝光时间为5~10 min.结果证明,该方法是一种快速有效的检测死活细胞的新方法,能有效避免PCR检测假阳性结果的出现. 展开更多
关键词 EMA PCR 副溶血弧菌 死活细胞
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血链菌死菌在生物膜再形成中的作用观察 被引量:10
3
作者 马瑞 朱敏 刘正 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2002年第1期37-39,共3页
目的 探讨血链菌死菌在生物膜更新形成中的作用。方法 利用激光共聚焦扫描显微镜和死菌 /活菌荧光染色技术相结合 ,对人工口腔内覆盖死菌 (实验组 )和未覆盖死菌 (对照组 )盖玻片表面血链菌生物膜的形成进行动态观察。结果 血链菌生... 目的 探讨血链菌死菌在生物膜更新形成中的作用。方法 利用激光共聚焦扫描显微镜和死菌 /活菌荧光染色技术相结合 ,对人工口腔内覆盖死菌 (实验组 )和未覆盖死菌 (对照组 )盖玻片表面血链菌生物膜的形成进行动态观察。结果 血链菌生物膜形成 3 0min时 ,实验组生物膜厚度和对照组相比 ,无显著性差异 ;但其细菌密度明显大于对照组 (P <0 .0 5 ) ,至 60min ,12 0min ,2 4 0min时 ,实验组生物膜厚度和对照组相比 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,但其细菌密度几乎一致。结论 在生物膜的形成初期 ,死菌具有一定的促进作用。 展开更多
关键词 死菌 生物膜 菌斑控制剂 口腔病理学
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柑橘溃疡病菌EMA-PCR快速活体检测技术的建立 被引量:5
4
作者 熊书 王中康 +1 位作者 卢小林 殷幼平 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期78-84,共7页
传统PCR方法不能诊断柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp.citri Gabriel)的死活状态,往往导致假阳性检测结果。本研究将特异性核酸染料叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)与PCR技术结合,旨在建立柑橘溃疡病活菌的快速检... 传统PCR方法不能诊断柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp.citri Gabriel)的死活状态,往往导致假阳性检测结果。本研究将特异性核酸染料叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)与PCR技术结合,旨在建立柑橘溃疡病活菌的快速检测技术。根据柑橘溃疡病菌独有的保守蛋白基因设计特异性引物扩增出278bp的靶带,PCR反应的检测下限为25个细胞/25μL或2.75pg/25μL。EMA-PCR结果表明:当卤钨灯曝光时间1min,EMA终浓度为1.0mg/L时,能有效抑制1.0×108 cfu/mL死菌的扩增;当EMA的浓度小于30mg/L时,EMA对上述相同浓度活菌靶基因的扩增没有明显的抑制。EMA-PCR对死活混合菌的扩增表明,活菌数在6.875×101~6.875×105 cfu/PCR范围时,荧光强度与混合体系中活菌的对数值有线性关系。基于以上建立的EMA-PCR活体检测技术,对疑似带病柑橘材料进行检测,结果发现能降低柑橘溃疡病菌检测过程中的假阳性,有望为柑橘溃疡病的检疫检验提供更科学的技术手段。 展开更多
关键词 柑橘溃疡病菌 EMA-PCR 死菌与活菌 检疫
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EMA-PCR检测金黄色葡萄球菌活菌的方法 被引量:4
5
作者 赵素君 李江凌 +6 位作者 谢晶 曹冶 王秋实 叶勇刚 罗丹丹 叶健强 廖党金 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第3期18-20,共3页
根据金黄色葡萄球菌(SA)耐热核酸酶编码基因(nuc基因)设计特异性引物,对试验菌株进行PCR检测,结果显示,金黄色葡萄球菌扩增出大小为480bp的特异性条带,而其他对照菌株未扩增出条带。由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,从... 根据金黄色葡萄球菌(SA)耐热核酸酶编码基因(nuc基因)设计特异性引物,对试验菌株进行PCR检测,结果显示,金黄色葡萄球菌扩增出大小为480bp的特异性条带,而其他对照菌株未扩增出条带。由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,从而使检测结果往往出现很高的假阳性。本试验利用EMA能穿过死细菌的细胞膜并在光激活的作用下能与基因组DNA共价结合,从而能抑制死菌DNA进行PCR扩增的特性,建立了一种快速、有效的检测金黄色葡萄球菌活菌的EMA-PCR方法,较传统PCR大大提高了检测的准确性和可靠性,该方法检测灵敏度可达15CFU/mL。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 flue基因 EMA—PCR法 死细菌 活细菌
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肠出血性大肠杆菌O157∶H7 EMA-PCR检测技术的建立 被引量:5
6
作者 赵素君 谢晶 +6 位作者 曹冶 李江凌 王秋实 叶勇刚 罗丹丹 叶健强 廖党金 《中国草食动物科学》 CAS 2012年第4期50-53,共4页
肠出血性大肠杆菌O157∶H7是一种重要的人畜共患传染病病原菌。为建立一种特异、灵敏的O157∶H7新型检测技术,以O157抗原基因(rfbE基因)为模板设计特异性引物,利用叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)处理菌液,沸水浴法制备... 肠出血性大肠杆菌O157∶H7是一种重要的人畜共患传染病病原菌。为建立一种特异、灵敏的O157∶H7新型检测技术,以O157抗原基因(rfbE基因)为模板设计特异性引物,利用叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)处理菌液,沸水浴法制备细菌裂解液,优化PCR条件,建立一种快速、有效的O157∶H7活菌EMA-PCR检测方法。结果显示:EMA-PCR可从rfbE基因阳性菌株CVCC248和两株临床分离菌株cd0912、cd0803中扩增出大小为495 bp的特异性条带,检测灵敏度可达12 CFU/mL。经EMA处理,从含有1%~100%O157∶H7 CVCC248活菌混合悬液制备的DNA中均可扩增出目的片段。因此,成功建立了肠出血性大肠杆菌O157∶H7的EMA-PCR检测方法;该方法可避免因分析的样品中含有死细菌而造成的假阳性检测结果,检测的准确性和真实性较传统PCR大大提高。O157∶H7 EMA-PCR技术的建立为O157∶H7的临床诊断提供了新的方法,具有重要的实际应用价值和良好的应用前景。 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌 rfbE基因 EMA-PCR 死细菌 活细菌
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松材线虫病死木中真菌和细菌的分离 被引量:9
7
作者 张建平 赵博光 谢立群 《南京林业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期87-89,共3页
从来自江苏省和浙江省几个疫区的松材线虫(PWN)病病死木的木质部中分离出111个真菌菌株,经鉴定种类为木霉(Trichodermaspp.)、轮枝霉(Verticilliumspp.)、青霉(Penicilliumspp.)、镰孢霉(Fusariumspp.)、曲霉(Aspergillusspp.)、毛壳菌(... 从来自江苏省和浙江省几个疫区的松材线虫(PWN)病病死木的木质部中分离出111个真菌菌株,经鉴定种类为木霉(Trichodermaspp.)、轮枝霉(Verticilliumspp.)、青霉(Penicilliumspp.)、镰孢霉(Fusariumspp.)、曲霉(Aspergillusspp.)、毛壳菌(Chaetomiumspp.)、茎点菌(Phomaspp.)、短梗单孢霉(Dicoccumsp.)、头孢霉(Cephalosporiumsp.)、交链孢霉(Alternariasp.),这些真菌约占分离真菌总数的60%;在43%的未鉴定菌中,除3个菌株为有孢菌外,其余均是无孢菌。可以分离出真菌的病死木占56.42%,从病死木中可分离出细菌的比例达86%,可同时分离到真菌和细菌的比例为43.6%。 展开更多
关键词 松材线虫 病死木 真菌 细菌分离 发生规律
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血链菌生物膜中死菌/活菌的空间分布 被引量:3
8
作者 马瑞 朱敏 +2 位作者 刘正 马健 于毅 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第8期826-828,共3页
目的研究血链菌生物膜形成中死菌/活菌的空间分布。方法在模拟人口腔环境的简易人工口腔模型内,形成血链菌生物膜,应用激光共聚焦扫描显微镜和死菌/活菌荧光染色方法,对血链菌生物膜形成中死菌/活菌的空间分布进行观察。结果生物膜底部... 目的研究血链菌生物膜形成中死菌/活菌的空间分布。方法在模拟人口腔环境的简易人工口腔模型内,形成血链菌生物膜,应用激光共聚焦扫描显微镜和死菌/活菌荧光染色方法,对血链菌生物膜形成中死菌/活菌的空间分布进行观察。结果生物膜底部的活菌百分比为20%;随着生物膜厚度的增加,活菌百分比达到70%,其间存在许多黑色气泡样的间隙;随后活菌百分比逐渐减少,至生物膜顶部时几乎全部为死菌。结论生物膜的底部和顶部主要由死细菌组成,而中间层主要是由围绕在黑色气泡样孔和通道周围的活细菌组成。 展开更多
关键词 生物膜 人工口腔 死菌/活菌 激光共聚焦扫描显微镜
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实时荧光定量RT-PCR检测沙门氏菌活菌 被引量:5
9
作者 张冲 刘祥 陈计峦 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期91-94,共4页
沙门氏菌是引起食物中毒的最常见致病菌,而基于DNA水平的常规PCR(DNA-PCR)检测法虽然快速、灵敏,但在检测时无法区分死活菌,死亡的细菌会出现假阳性结果,严重影响日常检测结果的判断。提取沙门氏菌总RNA之后,采用一步法逆转录聚合酶链... 沙门氏菌是引起食物中毒的最常见致病菌,而基于DNA水平的常规PCR(DNA-PCR)检测法虽然快速、灵敏,但在检测时无法区分死活菌,死亡的细菌会出现假阳性结果,严重影响日常检测结果的判断。提取沙门氏菌总RNA之后,采用一步法逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),以沙门氏菌invAmRNA为检测对象,发现只有活的沙门氏菌显阳性,死亡的沙门氏菌呈阴性。而且RT-PCR法的稳定性良好,能够准确定量活的沙门氏菌,在纯培养时,检出限可达1CFU/3mL。实验表明,建立的RT-PCR法是一种能够快速、精确检测沙门氏菌活菌的方法。 展开更多
关键词 沙门氏菌 RT-PCR 死活菌 常规PCR
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复合极端嗜热菌高温处理病死猪的氨基酸降解效果分析 被引量:2
10
作者 缪伏荣 李兆龙 +1 位作者 董志岩 刘景 《福建农业学报》 CAS 北大核心 2018年第9期893-898,共6页
为探明复合极端嗜热菌对高温病死猪处理中氨基酸降解效果,采集发酵处理前样品(Q组)及无菌处理组样品Wj组(无添加菌处理后再堆肥发酵60d)为对照,设置4个不同添加量的嗜热菌混合菌样品处理(0.05%、0.08%、0.10%、0.12%),分析样品的氨基酸... 为探明复合极端嗜热菌对高温病死猪处理中氨基酸降解效果,采集发酵处理前样品(Q组)及无菌处理组样品Wj组(无添加菌处理后再堆肥发酵60d)为对照,设置4个不同添加量的嗜热菌混合菌样品处理(0.05%、0.08%、0.10%、0.12%),分析样品的氨基酸种类和含量变化情况,运用Illumina MiSeq对样品微生物群落进行测序,将所得的16S基因测序数据与代谢功能已知的微生物参考基因组数据库相对比,预测细菌代谢功能。结果表明添加0.08%~0.12%复合嗜热菌组处理可明显促进高温处理中病死猪的氨基酸降解,显著降低病死猪样品的氨基酸总量和各氨基酸组分含量;和0.05%添加量处理组相比,氨基酸总量下降了7.04%~8.49%(P<0.05),天冬氨酸、苏氨酸、甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸等7种氨基酸的量显著降低;谷氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、精氨酸等5种氨基酸的降解效果与堆肥60d处理Wj组没有显著差异。处理前和处理后病死猪菌群氨基酸代谢功能差异明显,添加嗜热菌混合菌组与无菌处理后堆肥Wj组的菌群氨基酸代谢功能接近,两者差异不明显。说明添加0.08%~0.12%复合极端嗜热菌促进了高温病死猪处理过程中氨基酸的代谢和降解,与长时间堆肥发酵处理的病死猪降解效果相似。 展开更多
关键词 复合极端嗜热菌 病死猪 氨基酸 16S测序 降解
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自然水体生物膜细菌细胞对铅镉吸附规律研究 被引量:2
11
作者 赵宇侠 《淮海工学院学报(自然科学版)》 CAS 2005年第4期55-57,65,共4页
研究了长春南湖水中生物膜上优势茵种细胞体对铅和镉的吸附规律,通过Freundlich和 Langmuir等温吸附曲线描述了生物膜吸附铅、镉的热力学过程。实验结果表明,两种金属在细菌细胞体上的吸附均遵守Langmuir和Freundlich热力学方程,就金属... 研究了长春南湖水中生物膜上优势茵种细胞体对铅和镉的吸附规律,通过Freundlich和 Langmuir等温吸附曲线描述了生物膜吸附铅、镉的热力学过程。实验结果表明,两种金属在细菌细胞体上的吸附均遵守Langmuir和Freundlich热力学方程,就金属铅和镉的竞争吸附而言,镉的存在对铅的吸附有一定影响,能减少微生物细胞对铅的吸附,而铅的存在对镉的吸附影响很小。 展开更多
关键词 微生物死体细胞 吸附 重金属
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实时逆转录聚合酶链式反应检测活的金黄色葡萄球菌
12
作者 张冲 刘祥 陈计峦 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期170-175,共6页
针对基于DNA水平的聚合酶链式反应(DNA-PCR)检测食品中金黄色葡萄球菌时会出现假阳性结果的缺点,建立一种能够区分死、活金黄色葡萄球菌的检测方法。根据金黄色葡萄球菌的femA基因,自设计Taqman探针、引物,采用一步法逆转录聚合酶链式反... 针对基于DNA水平的聚合酶链式反应(DNA-PCR)检测食品中金黄色葡萄球菌时会出现假阳性结果的缺点,建立一种能够区分死、活金黄色葡萄球菌的检测方法。根据金黄色葡萄球菌的femA基因,自设计Taqman探针、引物,采用一步法逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),以femA mRNA为检测对象,发现只有活的金黄色葡萄球菌显阳性,死亡的则呈阴性;纯培养时,重复检测变异系数为0.15,灵敏度为9×102CFU/mL,检出限可达1/3 CFU/3 mL。实验表明,该研究所建立的一步法逆转录聚合酶链式反应检测法,不仅灵敏度高、特异性强,而且能够有效地区分死、活金黄色葡萄球菌。 展开更多
关键词 逆转录聚合酶链式反应 金黄色葡萄球菌 死活菌 普通聚合酶链式反应
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不同温度对病死猪生物降解效果的影响 被引量:5
13
作者 杜少甫 韦光辉 +2 位作者 柳东阳 谢红兵 魏刚才 《安徽农业科学》 CAS 2015年第35期170-171,173,共3页
[目的] 探讨不同温度下病死猪的生物降解效果。[方法] 将2头病死猪进行粉碎处理后随机分为3组:试验Ⅰ组(60~70 ℃发酵)、试验Ⅱ组(75-85 ℃发酵)、对照组(常规自然发酵),测定各处理组细菌、病毒、重金属及主要营养成分含量。[... [目的] 探讨不同温度下病死猪的生物降解效果。[方法] 将2头病死猪进行粉碎处理后随机分为3组:试验Ⅰ组(60~70 ℃发酵)、试验Ⅱ组(75-85 ℃发酵)、对照组(常规自然发酵),测定各处理组细菌、病毒、重金属及主要营养成分含量。[结果] 发酵第3天试验Ⅰ组和Ⅱ组大肠杆菌数分别比对照组减少30.37%和43.24%, 第8天试验Ⅰ组和Ⅱ组大肠杆菌数分别比对照组减少54.08%和76.13%,差异极显著(P<0.01)。第3天,试验Ⅰ组和Ⅱ组霉菌数分别比对照组减少52.47%和64.14%,第8天试验Ⅰ组和Ⅱ组分别比对照组减少57.89%和98.90%。试验Ⅰ组、Ⅱ组放线菌数在第5天和第8天都比对照组明显减少。第5 天试验Ⅱ组病毒检测结果均为阴性;试验Ⅱ组各重金属含量均比对照组低,而干物质、氮、钙、磷含量均比对照组高。采用75~85 ℃发酵病死猪的生物降解效果最好。[结论] 该研究结果可为进一步研究病死猪的生物降解作用提供理论依据。 展开更多
关键词 病死猪 温度 生物降解 菌群 重金属
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基于微生物发酵技术的病死猪尸体资源化利用研究 被引量:2
14
作者 张德 葛大兵 《湖南生态科学学报》 CAS 2017年第2期36-42,共7页
近年来,大量的规模化养猪场的不断出现,任意排放的病死猪尸体已成为一个较为突出的环境污染问题,不仅对生态环境和人体健康产生危害,还影响畜牧业的可持续发展.试验利用sq复合菌剂、病死猪、米糠、泥炭土作为原材料,在发酵箱内,经过7 d... 近年来,大量的规模化养猪场的不断出现,任意排放的病死猪尸体已成为一个较为突出的环境污染问题,不仅对生态环境和人体健康产生危害,还影响畜牧业的可持续发展.试验利用sq复合菌剂、病死猪、米糠、泥炭土作为原材料,在发酵箱内,经过7 d反复发酵搅拌后生产有机肥的工艺流程,从微生物接种浓度、原材料的投放C/N比例、原材料的含水率、反应时的翻堆间隔时间方面进行单因子试验,探究复合菌剂在工艺流程中的最优反应参数.结果表明,微生物复合菌剂在接种浓度为2%,微生物与原材料碳氮比例为28∶1,原材料含水率保持在50~60%,12 h堆翻一次的工艺条件下反应效果最佳. 展开更多
关键词 sq复合菌剂 病死猪 接种浓度 含水率
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病死动物腐败过程中优势菌种的筛选与分离鉴定
15
作者 于迪 王振 +5 位作者 张皓淳 董筱萍 李慧 李冰 曲祖乙 刘孝刚 《现代畜牧兽医》 2014年第8期34-36,共3页
本研究旨在筛选出病死动物无害化处理罐中参与动物尸体腐败的优势菌种,为研发加速动物尸体腐败的微生物制剂提供理论依据。收集病死动物无害化处理罐中动物尸体腐败液,按照10倍递增稀释方法,在参与动物尸体腐败的微生物菌群中成功筛选... 本研究旨在筛选出病死动物无害化处理罐中参与动物尸体腐败的优势菌种,为研发加速动物尸体腐败的微生物制剂提供理论依据。收集病死动物无害化处理罐中动物尸体腐败液,按照10倍递增稀释方法,在参与动物尸体腐败的微生物菌群中成功筛选出一株优势菌种,采用传统分离鉴定方法和分子生物学鉴定方法对优势菌种进行鉴定。结果表明,优势腐败菌种为芽孢杆菌属的枯草芽孢杆菌,其16S rRNA基因序列与Bacillus subtilis strain 22(FJ435215.1)的同源性为99.53%。 展开更多
关键词 病死动物无害化处理罐 优势腐败菌 分离鉴定 筛选
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EMA与PCR结合检测沙门氏菌方法的研究 被引量:6
16
作者 赵瑜 李金磊 +2 位作者 董鹏 狄元冉 高延玲 《畜牧与饲料科学》 2013年第11期113-116,共4页
为了建立一种快速区分样品中沙门氏菌的死细菌与活细菌的检测方法,将叠氮溴化乙锭(EMA)与PCR技术相结合,以沙门氏菌的invA为靶基因,以沙门氏菌的纯培养细胞做模板进行扩增,并进行灵敏度、特异性、曝光时间及EMA浓度试验。结果显示,灵敏... 为了建立一种快速区分样品中沙门氏菌的死细菌与活细菌的检测方法,将叠氮溴化乙锭(EMA)与PCR技术相结合,以沙门氏菌的invA为靶基因,以沙门氏菌的纯培养细胞做模板进行扩增,并进行灵敏度、特异性、曝光时间及EMA浓度试验。结果显示,灵敏度为14 CFU/mL,最佳曝光时间为2 min,当EMA的浓度小于18μg/mL时,EMA对活菌靶基因的扩增没有明显的抑制,而终浓度为1μg/mL的EMA,能有效抑制1×108CFU/mL沙门氏菌死菌的扩增。EMA-PCR能有效降低沙门氏菌检测过程中的假阳性。 展开更多
关键词 沙门氏菌 EMA—PCR 检测 死菌与活菌
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一种双通道荧光扫描同步探测系统的设计 被引量:1
17
作者 陈盟 祁建城 +3 位作者 李玲君 杜耀华 程智 李抄 《医疗卫生装备》 CAS 2020年第7期41-46,68,共7页
目的:设计一种双通道荧光扫描同步探测系统,以实现对活/死菌的快速检测。方法:基于双色荧光染色技术,针对检测对象的荧光特性设计双光源同步激发的荧光探测系统;采用空间错位的共焦设计方法,解决双光源同步激发探测中互相干扰的问题;通... 目的:设计一种双通道荧光扫描同步探测系统,以实现对活/死菌的快速检测。方法:基于双色荧光染色技术,针对检测对象的荧光特性设计双光源同步激发的荧光探测系统;采用空间错位的共焦设计方法,解决双光源同步激发探测中互相干扰的问题;通过MATLAB编程编写阈值分割结合边缘检测的目标提取算法实现对细菌荧光信号的准确提取与计数。采用荧光探测性能测试、荧光显微镜对照试验和活/死菌混合样本扫描检测对系统的性能进行验证。结果:该系统能实现红绿荧光信号的同步扫描探测;与荧光显微镜检测获得的图像特征完全匹配,且扫描检测视野远大于荧光显微镜检测视野;测得的活/死菌比例值与已知样本的活菌含量的相关程度高(R2=0.9708)。结论:该系统可快速完成对活/死菌的准确识别和定量分析,在微生物活性检测和定量分析领域具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 活/死菌区分检测 荧光染色技术 荧光探测 细菌检测
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枯树翘皮的一个解释
18
作者 魏恩东 王三英 王俊杰 《甘肃林业科技》 2022年第4期43-44,56,共3页
枯死木风吹雨淋中树皮翘裂剥落,斑驳残败,看似有失尊严。利用树木解剖学知识以及活细胞、死细胞概念解释树木翘皮的机制。分析认为,树木翘皮的机制在于形成层随着树木枯死后,留下丰富营养,滋养霉菌等腐生菌繁衍,形成层因此解体,丧失对... 枯死木风吹雨淋中树皮翘裂剥落,斑驳残败,看似有失尊严。利用树木解剖学知识以及活细胞、死细胞概念解释树木翘皮的机制。分析认为,树木翘皮的机制在于形成层随着树木枯死后,留下丰富营养,滋养霉菌等腐生菌繁衍,形成层因此解体,丧失对树皮和木质部的粘合作用,树皮因表层与内层在风吹雨淋过程中吸湿膨胀-干燥收缩不均而翘裂,最终剥落。总结指出,木材本质是大树剥去浮荣留下的不朽尊严。 展开更多
关键词 枯树 树皮 形成层 细胞壁 腐生菌 尊严
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Bacterial viability assessment by flow cytometry analysis in soil
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作者 Ido SHAMIR Eran ZAHAVY Yosef STEINBERGER 《Frontiers in Biology》 CSCD 2009年第4期424-435,共12页
Soil microhabitats and their heterogeneity are often considered to be among the most important factors affecting soil biotic communities.The microbial commu-nity has become one of the most important links in soil nutr... Soil microhabitats and their heterogeneity are often considered to be among the most important factors affecting soil biotic communities.The microbial commu-nity has become one of the most important links in soil nutrient cycles and trophic components due to its role in biological processes,spatial and temporal dynamics,and physiological adaptation.Sandy-soil desert systems are characterized by fast water infiltration during the rainy season,high salinity,and low moisture availability in the upper soil layers.Plants have developed different ecophy-siological adaptations in order to cope with this harsh environment.The Tamarix aphylla is known to be one of the most commonly adapted plants,exhibiting a mechan-ism for secretion of excess salts as aggregates through its leaves.These leaves aggregate beneath the plant,creating'islands of salinity'.Soil biotic components are,therefore,exposed to extreme abiotic stress conditions in this niche.The goal of this study was to examine the effect of T.aphylla on the live/dead bacterial population ratio on a spatial and temporal scale.The results emphasize the effect of abiotic factors,which changed on temporal as well as spatial scales,and also on the size of the active soil bacterial community,which fluctuated between 1.44%and 25.4%in summer and winter,respectively.The results of this study elucidate the importance of moisture availability and the'island-of-salinity'effect on the active microbial community in a sandy desert system. 展开更多
关键词 DESERT islands of salinity live/dead bacteria ratio microbial community SOIL flow cytometry
原文传递
西安市冬季霾污染过程生物气溶胶浓度变化及其影响因素研究
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作者 杨柳 沈振兴 +1 位作者 魏军强 才让什加 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期233-243,共11页
生物气溶胶对人体健康的潜在危害不容忽视,但霾污染过程中生物气溶胶变化规律及其影响因素仍不明确.本文利用六级生物气溶胶采样器及大气颗粒物采样器开展了一次典型霾污染过程样品的采集,通过恒温培养测定可培养细菌和真菌浓度,采用4&#... 生物气溶胶对人体健康的潜在危害不容忽视,但霾污染过程中生物气溶胶变化规律及其影响因素仍不明确.本文利用六级生物气溶胶采样器及大气颗粒物采样器开展了一次典型霾污染过程样品的采集,通过恒温培养测定可培养细菌和真菌浓度,采用4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)和LIVE/DEAD BacLightTM试剂染色-荧光显微镜计数方法测定总微生物及死/活细菌浓度,并通过其与颗粒物中水溶性离子、金属元素、气象因素及大气氧化性的关系探讨了生物气溶胶分布的影响因素.结果表明,霾污染过程中,可培养细菌和总微生物在轻度污染时浓度最低,随着污染加重其浓度逐渐升高.可培养真菌浓度在霾发生初期大幅增加,平均浓度为污染发生前2.5倍.活菌和死菌浓度在霾过程均呈现先急剧下降后逐渐上升的趋势.可培养细菌粒径分布在霾污染过程中呈现偏态分布(0.65~1.1μm,除中度污染外)和双峰分布(>7.0μm和1.1~2.1μm,中度污染),可培养真菌粒径在整个污染过程中呈单峰分布,峰值分别为0.65~1.1μm(污染发生前、中度污染和污染结束)和1.1~2.1μm(轻度污染和重度污染).Pearson相关性分析显示,轻度及重度污染条件下,Mg2+和Fe对细菌产生正相关影响.冗余分析(RDA)结果表明,大气氧化能力(Ox)增强会抑制可培养细菌的生长,但会有利于可培养真菌的繁殖. 展开更多
关键词 可培养细菌真菌 总微生物 活死细菌 粒径分布 水溶性离子 金属元素 大气氧化性
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