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Distribution and variability of deformed wing virus of honeybees (Apis mellifera) in the Middle East and North Africa
1
作者 Nizar Jamal Haddad Adjlane Noureddine +13 位作者 Banan Al-Shagour Wahida Loucif-Ayad Mogbel A. A. El-Niweiri Eman Anaswah Wafaa Abu Hammour Dany El-Obeid Albaba Imad Mohamed A. Shebl Abdulhusien Sehen Almaleky Abdullah Nasher Nagara Walid Mohamed Fouad Bergigui Orlando Yanez Joachim R. de Miranda 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2017年第1期103-113,共11页
Three hundred and eleven honeybee samples from 12 countries in the Middle East and North Africa (MENA) (Jordan, Lebanon, Syria, Iraq, Egypt, Libya, Tunisia, Algeria, Morocco, Yemen, Palestine, and Sudan) were anal... Three hundred and eleven honeybee samples from 12 countries in the Middle East and North Africa (MENA) (Jordan, Lebanon, Syria, Iraq, Egypt, Libya, Tunisia, Algeria, Morocco, Yemen, Palestine, and Sudan) were analyzed for the presence of deformed wing virus (DWV). The prevalence of DWV throughout the MENA region was pervasive, but variable. The highest prevalence was found in Lebanon and Syria, with prevalence dropping in Palestine, Jordan, and Egypt before increasing slightly moving westwards to Algeria and Morocco Phylogenetic analysis of a 194 nucleotide section of the DWV Lp gene did not identify any significant phylogenetic resolution among the samples, although the sequences did show consistent regional clustering, including an interesting geographic gradient from Morocco through North Africa to Jordan and Syria. The sequences revealed several clear variability hotspots in the deduced amino acid sequence, which furthermore showed some patterns of regional identity. Furthermore, the sequence variants from the Middle East and North Africa appear more numerous and diverse than those from Europe. 展开更多
关键词 Apis mellifera deformed wing virus Middle East North Africa PREVALENCE VARIABILITY
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蜜蜂残翅病毒分子机制研究进展
2
作者 龚沛勋 王斌 张炫 《蜜蜂杂志》 2024年第3期17-22,共6页
蜜蜂残翅病毒(Deformed Wing Virus,DWV)与蜜蜂体壁寄生虫大蜂螨(Varroa destructop)联合危害是导致蜂群大蜂螨症的主要原因。目前研究显示蜜蜂残翅病毒具广泛的寄主特性并对蜜蜂属多个蜂种健康产生危害。文章回顾近年来蜜蜂残翅病的研... 蜜蜂残翅病毒(Deformed Wing Virus,DWV)与蜜蜂体壁寄生虫大蜂螨(Varroa destructop)联合危害是导致蜂群大蜂螨症的主要原因。目前研究显示蜜蜂残翅病毒具广泛的寄主特性并对蜜蜂属多个蜂种健康产生危害。文章回顾近年来蜜蜂残翅病的研究数据,试从病毒分子机制上阐述DWV研究取得的进展,为之后研究提供参考。 展开更多
关键词 残翅病毒 分子结构 表达及调控
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蜜蜂残翅病及其防制技术研究进展
3
作者 孟雅苹 颜伟玉 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第5期222-233,共12页
蜜蜂残翅病病毒(DWV)是感染蜜蜂最常见、传播最广泛的病毒之一,通常以隐性感染的形式存在。在蜜蜂的各个发育阶段都能检测到DWV,严重时会导致感染蜜蜂表现出典型的发病症状并且使蜜蜂寿命缩短。DWV在其传播媒介狄斯瓦螨Varroadestructo... 蜜蜂残翅病病毒(DWV)是感染蜜蜂最常见、传播最广泛的病毒之一,通常以隐性感染的形式存在。在蜜蜂的各个发育阶段都能检测到DWV,严重时会导致感染蜜蜂表现出典型的发病症状并且使蜜蜂寿命缩短。DWV在其传播媒介狄斯瓦螨Varroadestructor的作用下传播范围更为广泛,在32个国家的蜂群中DWV的平均感染率至少为55%。DWV的大肆流行是导致蜂群损失的重要原因,给养蜂业造成了巨大损失,严重影响了我国养蜂业的健康发展。本文将从DWV的流行与分布、发病特征及危害、传播途径、遗传多样性以及其防制措施等方面对蜜蜂残翅病病毒近年来的研究进展进行综述。为我国进一步开展蜜蜂病毒学研究提供参考,为开发防治技术方法提供新思路。 展开更多
关键词 蜜蜂 残翅病病毒 防制措施 研究进展
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蜜蜂残翅病毒基因组全长克隆及其克隆不稳定性
4
作者 李润琳 金朗 黄伟峰 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2023年第4期519-526,共8页
利用长片段PCR技术,以单一病蜂的cDNA为模板,扩增出完整蜜蜂残翅病毒基因组并构建感染性克隆。结果表明,该基因组在某些大肠杆菌内难以稳定克隆,说明蜜蜂残翅病毒分离株具有克隆不稳定性,克隆不稳定性可能仅存在于部分蜜蜂残翅病毒分离... 利用长片段PCR技术,以单一病蜂的cDNA为模板,扩增出完整蜜蜂残翅病毒基因组并构建感染性克隆。结果表明,该基因组在某些大肠杆菌内难以稳定克隆,说明蜜蜂残翅病毒分离株具有克隆不稳定性,克隆不稳定性可能仅存在于部分蜜蜂残翅病毒分离株和亚型。国内的蜜蜂残翅病毒分离株在亲缘关系上非常接近,国外的蜜蜂残翅病毒分离株也可能存在克隆不稳定性。 展开更多
关键词 残翅病毒 克隆不稳定性 病毒基因组全长克隆
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瓦螨(Varroa destructor)寄生密度与蜜蜂卷翅病毒动态复制相关性研究 被引量:5
5
作者 张炫 周丹银 +1 位作者 赵文正 和绍禹 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期192-197,共6页
病毒复制动态变化对揭示病毒病致病的机理具有重要意义。本研究以蜜蜂卷翅病毒(deformed wing virus,简写为DWV)为模型,使用荧光反转录定量PCR方法检测DWV病毒隐性感染蜂群在体壁寄生螨侵袭压力下工蜂体内病毒基因表达量的变化动态,以... 病毒复制动态变化对揭示病毒病致病的机理具有重要意义。本研究以蜜蜂卷翅病毒(deformed wing virus,简写为DWV)为模型,使用荧光反转录定量PCR方法检测DWV病毒隐性感染蜂群在体壁寄生螨侵袭压力下工蜂体内病毒基因表达量的变化动态,以揭示外界生物压力与隐性感染蜜蜂体内病毒动态复制的相关性。结果显示:弱群势蜜蜂体内DWV基因表达量与引入瓦螨密度呈显著正相关(第3天:R2=0.82;第7天:R2=0.99;双向方差分析F=5.059,P=0.0171);在瓦螨密度增至30%,处理后第7天时DWV浓度达最大值;强群势的蜜蜂群体引入瓦螨后,蜜蜂体内DWV基因表达量在处理后第3天表现出与弱群相似的变化规律(R2=0.88;双向方差分析F=11.74,P=0.001 3),但在处理后第7天时,供试蜜蜂体内DWV浓度整体下降,且不同瓦螨处理水平试验组间的DWV浓度差异不明显(R2=0.66)。结果显示,强群势蜂群的工蜂可有效抑制病毒拷贝量的持续增长,从而表现较强抗病性,而弱群势蜜蜂因病毒动态复制的不可逆激增而导致病毒病暴发。该研究结果在一定程度上解释了弱群势蜜蜂高病毒病易感性和年周损失的原因。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 卷翅病毒 瓦螨 蜂群群势
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蜜蜂残翼病研究进展 被引量:5
6
作者 郑言 杨倩 +2 位作者 宋战昀 王振国 李敏思 《动物医学进展》 北大核心 2015年第3期96-101,共6页
蜜蜂残翼病病毒(DWV)是引起蜜蜂残翼病的病原体,可侵染各发育阶段的蜜蜂,在蛹期危害不明显,但羽化后出现翅膀残缺并迅速死亡;成年蜜蜂发病后翅膀畸形、腹部萎缩和褪色。呈隐性感染的蜜蜂虽然无明显临床症状,但其寿命也会缩短。由于DWV... 蜜蜂残翼病病毒(DWV)是引起蜜蜂残翼病的病原体,可侵染各发育阶段的蜜蜂,在蛹期危害不明显,但羽化后出现翅膀残缺并迅速死亡;成年蜜蜂发病后翅膀畸形、腹部萎缩和褪色。呈隐性感染的蜜蜂虽然无明显临床症状,但其寿命也会缩短。由于DWV与传播媒介瓦螨密切相关而被大量研究。近年来的研究表明,DWV是引发"蜂群崩溃失调症"(CCD)的主要病毒之一,DWV在全球范围的流行已成为蜜蜂蜂群非正常消失的一个重要原因。论文结合近年来对残翼病的最新研究成果,综述了蜜蜂残翼病的病原学、流行病学、临床症状及检测与防控方面的最新研究进展。 展开更多
关键词 蜜蜂残翼病毒 流行病学 检测与防控
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应用等温环介导扩增方法检测蜜蜂残翅病毒的研究 被引量:1
7
作者 庄明亮 牛庆生 +3 位作者 陈东海 王志 李志勇 梁勤 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2016年第6期1192-1198,共7页
本文的目的在于建立用于临床检测残翅病病毒(Deformed wing virus,DWV)的等温环介导扩增技术(Loopmediated isothermal amplification,LAMP),为该疾病的预防和控制提供理论依据。在DWV基因保守序列设计4条引物,探究LAMP扩增的最优条件,... 本文的目的在于建立用于临床检测残翅病病毒(Deformed wing virus,DWV)的等温环介导扩增技术(Loopmediated isothermal amplification,LAMP),为该疾病的预防和控制提供理论依据。在DWV基因保守序列设计4条引物,探究LAMP扩增的最优条件,并与常规的PCR(polymerase chain reaction)检测方法进行比较。建立的LAMP方法检测下限为0.89 pg,灵敏度比PCR高100倍而且特异性好。临床检测显示建立的LAMP方法可行、准确、方便、灵敏。针对DWV的LAMP建立的检测方法为养蜂生产第一线检测和预防DWV提供了技术支持,有一定的应用价值。 展开更多
关键词 残翅病毒 环介导等温扩增 检测
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蜜蜂残翼病病毒PCR检测及5′-UTR基因序列分析 被引量:1
8
作者 郑言 宋战昀 +5 位作者 杨倩 王向辉 隋佳辰 张健 王振国 李敏思 《动物医学进展》 北大核心 2015年第5期52-55,共4页
从吉林省某蜂场疑似蜜蜂残翼病病料中分离到一株蜜蜂残翼病病毒(DWV),命名为DWVJL1,提取该分离株的总RNA,采用RT-PCR技术扩增其基因组的5′-UTR并测序。测序结果与GenBank公布道的DWV 5′-UTR序列同源性在95%~99%之间。将测序结果与Ge... 从吉林省某蜂场疑似蜜蜂残翼病病料中分离到一株蜜蜂残翼病病毒(DWV),命名为DWVJL1,提取该分离株的总RNA,采用RT-PCR技术扩增其基因组的5′-UTR并测序。测序结果与GenBank公布道的DWV 5′-UTR序列同源性在95%~99%之间。将测序结果与GenBank上公布的9个相关序列进行系统遗传进化树分析,证实其与JX878304同源性最近,而与GU109335、KJ437447同源性最远。 展开更多
关键词 蜜蜂残翼病病毒 5′-UTR 克隆和测序分析
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狄斯瓦螨和蜜蜂残翅病毒对蜜蜂健康的协同影响 被引量:11
9
作者 蔺哲广 秦瑶 +3 位作者 李利 王帅 郑火青 胡福良 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期775-784,共10页
世界各地大范围的西方蜜蜂Apis mellifera蜂群损失现象已引起科学界和公众的持续关注。狄斯瓦螨Varroa destructor和蜜蜂残翅病毒(Deformed wing virus,DWV)是西方蜜蜂群中最主要的两大生物威胁。尽管二者侵害蜜蜂均已有较长历史,但直... 世界各地大范围的西方蜜蜂Apis mellifera蜂群损失现象已引起科学界和公众的持续关注。狄斯瓦螨Varroa destructor和蜜蜂残翅病毒(Deformed wing virus,DWV)是西方蜜蜂群中最主要的两大生物威胁。尽管二者侵害蜜蜂均已有较长历史,但直至近十年来的研究才发现两者间的协同效应对蜂群健康的影响远超过其单独作用时所造成的危害:(1)蜜蜂残翅病毒可在狄斯瓦螨体内大量复制,继而进一步传播;(2)狄斯瓦螨的刺吸行为使病毒粒子跨越寄主的生理屏障而直接进入蜜蜂血淋巴;(3)狄斯瓦螨的寄生促使蜜蜂残翅病毒的高毒力毒株在蜂群中优势扩增和盛行;(4)狄斯瓦螨影响蜜蜂个体发育与免疫系统等生理机能,以致降低了蜂群对病毒的抵抗力;(5)蜜蜂残翅病毒对宿主造成的免疫抑制有利于狄斯瓦螨的寄生与繁殖。狄斯瓦螨、蜜蜂残翅病毒和西方蜜蜂间的关系已经成为昆虫外寄生物、病原体与寄主相互作用研究的一个典型模型。本文对近十年该领域的相关研究进行综述,以期为蜂群损失的原因调查以及昆虫寄生虫、病原微生物与寄主间关系的研究提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 狄斯瓦螨 蜜蜂残翅病毒 协同效应 蜂群健康 寄生虫-病原-寄主相互作用
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影响越冬期意大利蜜蜂健康的病毒种类研究 被引量:5
10
作者 陈功文 温政胜 +3 位作者 秦瑶 许瑛瑛 胡福良 郑火青 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期223-229,共7页
通过比较分析3个蜂场共48群意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)越冬前与越冬后的病毒感染情况,及其中1个蜂场8群蜜蜂越冬期间病毒感染情况的变化,探究与越冬期蜜蜂健康紧密相关的病毒种类。结果表明,残翅病毒(Deformed wing... 通过比较分析3个蜂场共48群意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)越冬前与越冬后的病毒感染情况,及其中1个蜂场8群蜜蜂越冬期间病毒感染情况的变化,探究与越冬期蜜蜂健康紧密相关的病毒种类。结果表明,残翅病毒(Deformed wing virus,DWV)、黑蜂王台病毒(Black queen cell virus,BQCV)和以色列蜜蜂麻痹病毒(Israeli acute paralysis virus,IAPV)在越冬意蜂群中感染率很高。与越冬后正常蜂群相比,濒临死亡蜂群的IAPV基因组拷贝数极显著提高,达到了1×10~9左右;出现蜂群死亡的蜂场在越冬期间,蜂群DWV基因组拷贝数呈下降趋势,IAPV基因组拷贝数呈上升趋势。以上结果表明,IAPV是影响越冬期意蜂健康的最主要病毒。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 越冬期 残翅病毒 黑蜂王台病毒 以色列蜜蜂麻痹病毒
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蜜蜂残翅病毒在中华蜜蜂及其蜂箱奇露尾甲的发生与进化分析 被引量:2
11
作者 张丽娜 邓炎春 侯春生 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2021年第5期1107-1112,共6页
蜜蜂残翅病毒(Deformed wing virus,DWV)广泛存在于我国规模化养殖的蜂群中,具有明显的季节流行特征。近年来,DWV不断向野生授粉昆虫及其它昆虫传播,包括蜜蜂新的寄生性病害蜂箱奇露尾甲Aethina tumida。前期本实验室已鉴定来源于中华蜜... 蜜蜂残翅病毒(Deformed wing virus,DWV)广泛存在于我国规模化养殖的蜂群中,具有明显的季节流行特征。近年来,DWV不断向野生授粉昆虫及其它昆虫传播,包括蜜蜂新的寄生性病害蜂箱奇露尾甲Aethina tumida。前期本实验室已鉴定来源于中华蜜蜂Apis cerana与意大利蜜蜂Apis mellifera的蜂箱奇露尾甲均感染了蜜蜂病毒,但未调查来源于同一群的蜜蜂与蜂箱奇露尾甲是否感染了同一病毒,且在进化上有无差异。本研究调查了来源于同一群的中蜂及蜂箱奇露尾甲感染病毒情况,发现只感染了蜜蜂残翅病毒A型(DWV-A),未发现其它病毒。对DWV-A的3个片段进化分析表明,虽然DWV-A同时感染了中华蜜蜂和蜂箱奇露尾甲,但是VP3基因在不同的寄主中呈现明显不同的亲缘关系。这一结果为蜜蜂残翅病毒在蜜蜂及寄生病害中的进化提供了数据,为进一步研究病毒在不同寄主间的传播与进化奠定了基础。 展开更多
关键词 蜜蜂残翅病毒 中华蜜蜂 蜂箱奇露尾甲 进化特征 共同感染
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锦州地区一例蜜蜂残翼病的RT-PCR诊断与蜜蜂残翼病毒的鉴定及同源性分析 被引量:2
12
作者 张皓淳 张鑫 +3 位作者 杨作丰 马建山 邓文超 王冰 《现代畜牧兽医》 2017年第8期17-22,共6页
为确诊锦州某蜂场蜜蜂大量死亡病因,本试验采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,收集病死蜜蜂提取总RNA,进行反转录,获得c DNA。然后,以c DNA为模板,利用检测常见蜜蜂病毒的引物进行PCR扩增。结果表明,从蜜蜂病料中扩增出编码蜜蜂残翅... 为确诊锦州某蜂场蜜蜂大量死亡病因,本试验采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,收集病死蜜蜂提取总RNA,进行反转录,获得c DNA。然后,以c DNA为模板,利用检测常见蜜蜂病毒的引物进行PCR扩增。结果表明,从蜜蜂病料中扩增出编码蜜蜂残翅病毒Helicase蛋白酶的基因片段,大小约702 bp,将分离毒株命名为DWV-JZ。测序结果通过BLAST比对以及与Gen Bank中获得的7个序列进行遗传进化分析,证实DWV-JZ与Gen Bank中的DWV-JL1(KP096414.1)同源性达到95%,亲缘关系最近。 展开更多
关键词 蜜蜂残翼病毒(dwv) RT-PCR 诊断 遗传进化分析
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蜜蜂残翼病毒RT-PCR检测及衣壳蛋白VP1基因的序列分析
13
作者 隋佳辰 于寒松 +5 位作者 代佳宇 王向辉 郑言 杨倩 宋战昀 张建 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第12期157-159,共3页
为了研究蜜蜂残翼病毒(DWV)的遗传变异特点,试验从吉林某地蜂场疑似蜜蜂残翼病的病蜂中初步分离得到1株DWV毒株,采用RT-PCR技术扩增VP1基因并对其进行检验分析。结果表明:基因测序结果与Gen Bank中的DWV毒株衣壳蛋白VP1基因序列同源性为... 为了研究蜜蜂残翼病毒(DWV)的遗传变异特点,试验从吉林某地蜂场疑似蜜蜂残翼病的病蜂中初步分离得到1株DWV毒株,采用RT-PCR技术扩增VP1基因并对其进行检验分析。结果表明:基因测序结果与Gen Bank中的DWV毒株衣壳蛋白VP1基因序列同源性为99%左右;将此分离毒株DWV的VP1基因核苷酸序列与Gen Bank中的10个序列进行系统遗传进化树分析,证实其与AB070959.1、NC_005876.1的同源性最近,而与HM067437.1、KJ437447.1的同源性最低。 展开更多
关键词 蜜蜂残翼病毒(dwv) VP1基因 RT—PCR 克隆 序列分析 进化树分析
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蜜蜂残翅病毒两步法荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:3
14
作者 王红坤 王艺桦 +2 位作者 周丹银 董坤 张炫 《河南农业科学》 北大核心 2022年第3期154-161,共8页
为了建立一种灵敏度更高的蜜蜂残翅病毒两步法荧光定量PCR检测方法,根据残翅病毒保守基因片段设计引物,采取反转录过程与荧光定量PCR过程分步进行的方式,建立基于SYBR染料法检测残翅病毒的两步法实时荧光定量PCR检测方法,并对其特异性... 为了建立一种灵敏度更高的蜜蜂残翅病毒两步法荧光定量PCR检测方法,根据残翅病毒保守基因片段设计引物,采取反转录过程与荧光定量PCR过程分步进行的方式,建立基于SYBR染料法检测残翅病毒的两步法实时荧光定量PCR检测方法,并对其特异性、灵敏性、稳定性和可行性进行验证。结果显示,建立的两步法荧光定量PCR检测方法采用的引物特异性良好,在6.58×10^(1)~6.58×10^(8)拷贝/μL质粒标准品间具有良好线性关系,R^(2)为0.9997,扩增效率为100.8%。该方法的灵敏度为6.58拷贝/μL,与蜜蜂黑蜂王台病毒和以色列急性麻痹病毒不发生交叉反应,组内变异系数为0.20%~0.66%,组间变异系数为0.08%~0.98%,对蜜蜂样品残翅病毒的阳性检出率明显高于普通PCR,具有良好的特异性、重复性和实用性。综上,成功建立了一种灵敏度高、适用性好的残翅病毒两步法实时荧光定量PCR检测方法,为我国蜜蜂残翅病的流行病学调查、疫情监测和预警机制的构建提供新的技术支持。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 东方蜜蜂 残翅病毒 两步法荧光定量PCR SYBR染料法 灵敏度
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蜜蜂残翅病研究进展 被引量:2
15
作者 王红坤 王艺桦 +1 位作者 周丹银 张炫 《蜜蜂杂志》 2021年第10期9-14,共6页
蜜蜂残翅病毒(Deformed Wing Virus,DWV)是引发蜜蜂残翅病的病原体,常以隐性感染方式普遍存在于饲养蜂群中,在特定条件下发病,危害幼虫或羽化失败,感染蜜蜂表现翅膀残疾的典型发病症状。DWV是造成蜜蜂蜂群崩溃综合征(CCD)和越冬蜂群损失... 蜜蜂残翅病毒(Deformed Wing Virus,DWV)是引发蜜蜂残翅病的病原体,常以隐性感染方式普遍存在于饲养蜂群中,在特定条件下发病,危害幼虫或羽化失败,感染蜜蜂表现翅膀残疾的典型发病症状。DWV是造成蜜蜂蜂群崩溃综合征(CCD)和越冬蜂群损失(0CL)的主要病因,在世界范围的流行已严重危害蜂群健康。综合近年蜜蜂残翅病的研究数据,试从病原学、流行病学、临床症状及防控等方面阐述DWV研究取得的进展。 展开更多
关键词 蜜蜂残翅病 残翅病毒 流行病学 防控
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北京地区六种蜜蜂病毒病的流行病学研究 被引量:16
16
作者 贾慧茹 刘进祖 +2 位作者 王星 吴艳艳 周婷 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期772-780,共9页
【目的】对蜜蜂的6种病毒:以色列急性麻痹病毒(Israeli acute paralysis virus,IAPV)、残翅病毒(Deformed wing virus,DWV)、囊状幼虫病病毒(Sacbrood virus,SBV)、急性蜜蜂麻痹病毒(Acute bee paralysis virus,ABPV)、黑蜂王台病毒(Bla... 【目的】对蜜蜂的6种病毒:以色列急性麻痹病毒(Israeli acute paralysis virus,IAPV)、残翅病毒(Deformed wing virus,DWV)、囊状幼虫病病毒(Sacbrood virus,SBV)、急性蜜蜂麻痹病毒(Acute bee paralysis virus,ABPV)、黑蜂王台病毒(Black queen cell virus,BQCV)、慢性麻痹病毒(Chronic bee paralysis virus,CBPV)在北京地区的流行情况进行调查,以期为该地区蜜蜂病毒病的防控提供一定的理论依据。【方法】应用多重RT-PCR法确定上述6种病毒在该地区的感染情况,并通过序列分析确定特异性。【结果】在所有检测样本中均未检测到急性麻痹病病毒和慢性麻痹病病毒,感染率最高的是以色列急性麻痹病毒,其次是残翅病毒。检测的样本普遍存在混合感染。【结论】以色列急性麻痹病毒、残翅病毒、囊状幼虫病病毒、黑蜂王台病毒4种病毒可能在北京地区广泛分布。 展开更多
关键词 蜜蜂病毒 多重RT-PCR 以色列急性麻痹病毒 蜜蜂卷翅病毒 蜜蜂囊状幼虫病病毒 黑蜂王台病毒
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蜜蜂羽化温度与卷翅病毒动态复制相关性研究 被引量:1
17
作者 张炫 陈彦平 +1 位作者 周丹银 和绍禹 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1341-1347,共7页
病毒复制动态变化对于病毒病的研究有着重要意义。选用蜜蜂卷翅病毒(deformed wing virus,以下简称DWV)作为研究模型,检测DWV隐性感染蜂群在不同温度条件下羽化工蜂体内的病毒浓度,以了解不适温度压力这一非生物因子对蜜蜂羽化率及蜜蜂... 病毒复制动态变化对于病毒病的研究有着重要意义。选用蜜蜂卷翅病毒(deformed wing virus,以下简称DWV)作为研究模型,检测DWV隐性感染蜂群在不同温度条件下羽化工蜂体内的病毒浓度,以了解不适温度压力这一非生物因子对蜜蜂羽化率及蜜蜂体内DWV病毒复制动态的影响。实验结果显示不适羽化温度不仅会明显降低蜜蜂羽化成功率,而且新羽化的带毒蜜蜂体内DWV病毒拷贝量增加极显著。部分解释了冬季和早春低温环境下因病毒病暴发造成人工饲养蜂群非正常损失的原因。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 卷翅病毒 羽化温度 病毒浓度
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蜜蜂残翼病毒VP2基因密码子优化、原核表达及免疫原性分析 被引量:1
18
作者 郭亚茜 王灏琦 +5 位作者 费东亮 马跃宇 樊琼 黄思超 王琛 马鸣潇 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期255-263,共9页
蜜蜂残翼病毒(Deformed wing virus,DWV)是引发世界各地大范围蜂群损失的主要嫌疑对象,间接给农业生产带来了巨大的经济损失。为了探究DWV结构蛋白VP2的免疫原性,深入研究该蛋白的功能和为制备DWV单克隆抗体提供可靠的免疫原,本研究从DW... 蜜蜂残翼病毒(Deformed wing virus,DWV)是引发世界各地大范围蜂群损失的主要嫌疑对象,间接给农业生产带来了巨大的经济损失。为了探究DWV结构蛋白VP2的免疫原性,深入研究该蛋白的功能和为制备DWV单克隆抗体提供可靠的免疫原,本研究从DWV分离株(GenBank登录号:MF770715)扩增得到VP2基因,同时根据大肠杆菌密码子的偏嗜性对VP2基因进行优化并合成,分别将优化前和优化后的VP2基因克隆到pET-28a载体上,获得重组质粒pET-28a-VP2和pET-28a-opti-VP2,分别转化至宿主菌BL21(DE3)中诱导表达,经SDS-PAGE和Western Blot检测,显示仅优化后的opti-VP2基因高效表达,然后对最佳表达条件进行摸索。在此基础上,对重组蛋白纯化后分3次免疫6周龄的雌性BALB/c小鼠,同时设置纯化病毒组和空白对照组,对免疫小鼠的抗体水平和淋巴细胞增殖指数(SI)以及干扰素(IFN-γ)、白介素IL-2和IL-4水平进行检测。结果表明,重组VP2蛋白能够诱导产生特异性抗体,促进淋巴细胞增殖,提高IFN-γ、IL-2和IL-4水平,具有良好的免疫原性,为深入研究DWV VP2蛋白功能和开发防治DWV的生物制剂提供了帮助。 展开更多
关键词 蜜蜂残翼病毒(dwv) VP2基因 优化 原核表达 免疫原性
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蜜蜂残翼病毒TaqMan-MGB探针荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量:5
19
作者 王琛 马跃宇 +6 位作者 黄思超 孙莉 李明 韩喜彬 高志峰 费东亮 马鸣潇 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期686-694,共9页
蜜蜂残翅病毒(Deform wing virus,DWV)已成为世界上最著名、分布最广、研究最为深入的昆虫病原。虽然DWV以前存在于蜜蜂种群中,但一种新的媒介—外寄生螨Varroa破坏体的到来和全球传播,极大地促进了DWV的流行病学。为了建立快速、准确... 蜜蜂残翅病毒(Deform wing virus,DWV)已成为世界上最著名、分布最广、研究最为深入的昆虫病原。虽然DWV以前存在于蜜蜂种群中,但一种新的媒介—外寄生螨Varroa破坏体的到来和全球传播,极大地促进了DWV的流行病学。为了建立快速、准确且能定量分析的蜜蜂残翅病毒,DWV检测方法,本研究参照GenBank中已登录的DWV高度保守的3C-RdRp基因区域,设计了1对特异性引物和带有羧基荧光素(Fast Auxiliary Memory,FAM)与淬灭基团(Eclipse)标记的TaqMan探针,并对反应条件进行优化,建立了检测DWV的TaqMan-MGB探针荧光定量RT-PCR检测方法(TaqMan qRT-PCR),同时对该检测方法的特异性、敏感性、重复性进行了试验,并对临床样品进行检测。结果显示:该方法最佳上下游引物和探针浓度分别为12.5μmol/L和10μmol/L,最佳退火温度为59℃;敏感性试验中,对DWV质粒标准品检测下限为2.58×10^(1)拷贝/μL;本方法特异性较好,对蜜蜂常见病毒—蜜蜂慢性麻痹病毒(Chronic bee paralysis virus,CBPV)、蜜蜂急性麻痹病毒(Acute paralysis virus,ABPV)、黑蜂王台病毒(Black queen cell virus,BQCV)、囊状幼虫病毒(Sacbrood virus,SBV)、以色列急性麻痹病毒(Israeli acute paralysis virus,IAPV)和中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)无交叉反应;且批内变异系数和批间变异系数均小于2%。利用该方法对49份临床疑似样本进行检测,其中DWV阳性样本为35份,检出率高于常规RTPCR方法,且病毒载量大于1×10^(7)拷贝/只样本数共24份,表明辽宁和河北部分地区感染DWV蜂群中病毒载量较高,流行情况比较严重。因此,本研究建立的TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,能够用于DWV病原监测、流行病学调查和病毒定量分析等相关研究。 展开更多
关键词 蜜蜂残翼病毒(dwv) TAQMAN-MGB探针 qRT-PCR方法 临床检测
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Effects of Imidacloprid and Varroa destructor on survival and health of European honey bees, Apis mellifera 被引量:1
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作者 Pendo M. Abbo Joshua K. Kawasaki +5 位作者 Michele Hamilton Steven C. Cook Gloria DeGrandi-Hoffman Wen Feng Li Jie Liu Yan Ping Chen 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2017年第3期467-477,共11页
There has been growing concern over declines in populations of honey bees and other pollinators which are a vital part to our food security. It is imperative to identify factors responsible for accelerated declines in... There has been growing concern over declines in populations of honey bees and other pollinators which are a vital part to our food security. It is imperative to identify factors responsible for accelerated declines in bee populations and develop solutions for reversing bee losses. While exact causes of colony losses remain elusive, risk factors thought to play key roles are ectoparasitic mites Varroa destructor and neonicotinoid pesticides. The present study aims to investigate effects of a neonicotinoid pesticide Imidacloprid and Varroa mites individually on survivorship, growth, physiology, virus dynamics and immunity of honey bee workers. Our study provides clear evidence that the exposure to sublethal doses of Imidacloprid could exert a significantly negative effect on health and survival of honey bees. We observed a significant reduction in the titer ofvitellogenin (Vg), an egg yolk precursor that regulates the honey bees development and behavior and often are linked to energy homeostasis, in bees exposed to lmidacloprid. This result indicates that sublethal exposure to neonicotinoid could lead to increased energy usage in honey bees as detoxification is a energy-consuming metabolic process and suggests that Vg could be a useful biomarker for measuring levels of energy stress and sublethal effects of pesticides on honey bees. Measurement of the quantitative effects of different levels of Varroa mite infestation on the replication dynamic of Deformed wing virus (DWV), an RNA virus associated with Varroa infestation, and expression level of immune genes yields unique insights into how honey bees respond to stressors under laboratory conditions. 展开更多
关键词 deformed wing virus honey bees IMIDACLOPRID innate immunity VARROA
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