首乌益智胶囊对血管性痴呆大鼠Notch/Delta信号通路TACE、PS1mRNA表达的影响

目的观察中药首乌益智胶囊对血管性痴呆大鼠Notch/Delta信号通路TACE、PS1mRNA的影响,探讨其可能的作用机制。方法用改良Pulsinelli四血管阻断法制备血管性痴呆大鼠模型,随机分为首乌益智胶囊组、脑复康组、模型组,每组14只,并设假手术组14只。分别给予相应的药物,20天后利用实时荧光定量PCR检测Notch/Delta信号通路TACE、PS1mRNA的表达。结果首乌益智胶囊组、脑复康组、模型组与假手术组比较,TACE、PS1基因相对定量表达差异有统计学意义(P<0.01);首乌益智胶囊组较脑复康组和模型组TACE、PS1基因表达明显增高(P<0.05,P<0.01)。结论首乌益智胶囊的有效成分可能通过激活Notch/Delta信号通路发挥作用,促进神经干细胞向星形胶质细胞分化,从而使得星形胶质细胞增殖,合成和分泌更多的神经营养因子、生长因子和其他活性物质。

首乌益智胶囊对血管性痴呆大鼠Notch/Delta信号通路基因表达的影响

目的探讨首乌益智胶囊治疗血管性痴呆的作用机制。方法用改良Pulsinelli四血管阻断法制造血管性痴呆大鼠模型42只,随机分为首乌益智胶囊组、脑复康组、模型组,每组14只,并设假手术组14只。造模后7天,首乌益智胶囊组灌胃给予首乌益智胶囊溶液(0.08g/ml),脑复康组灌胃给予脑复康溶液(0.02g/ml),模型组与假手术组均灌胃生理盐水。20天后利用实时荧光定量PCR检测Notch/Delta信号通路HES1、Mash1、β淀粉样前体蛋白(β-APP)的mRNA表达。结果与模型组、脑复康组比较,首乌益智胶囊组HES1基因表达明显增高(P<0.05),而Mash1和β-APP基因表达的下降无统计学意义(P>0.05)。结论首乌益智胶囊能有效激活Notch/Delta信号通路上HES1、Mash1、β-APP基因的相互作用,这可能是首乌益智胶囊治疗血管性痴呆的作用机制之一。

“失荅剌知丸”对大鼠脑缺血再灌注后Notch/Delta信号通路相关因子表达的影响

目的探讨失荅刺知丸对大鼠脑缺血再灌注后脑组织损伤血管修复及Notch/Delta信号通路相关蛋白Notch1、Notch4、Delta样配体4表达的影响。方法将102只SD大鼠随机分为17组,每组6只,分别为:空白组、假手术组、模型组、尼莫地平组、失荅剌知丸低剂量组、失荅剌知丸中剂量组、失荅剌知丸高剂量组,其中模型组和给药组又根据再灌注时间分为1d、3d、7d组。以上各组除空白、假手术组外,均采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO)。各组在观察饲养相应天数后取材;电镜观察大鼠因脑缺血受损血管的恢复情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),测定缺血再灌注损伤大鼠脑组织中Notch1、Notch4、Delta样配体4蛋白与基因的相对表达量。结果Western blot、PCR结果显示,失荅剌知丸各组Notch1、Notch4、Delta样配体4蛋白和基因表达显著升高,表达量与给药剂量和治疗时间成正相关(P<0.01)。结论团队既往研究得出失荅剌知丸对大鼠脑缺血再灌注后血管损伤修复有促进作用;该修复作用可能与激活了Notch/Delta信号通路有关。

VEGF-Notch/Delta级联信号通路对脑缺血后血管新生的影响

血管新生在脑缺血组织中具有重要的神经保护作用,血管内皮生长因子(VEGF)可促进血管新生,而由其激活的Notch/Delta信号通路可负反馈抑制血管新生,二者共同精确调节血管的生成。

基于DLL4/Notch1信号通路探讨人参皂苷Rg-3对AOM/DSS诱导的炎症相关性结直肠癌小鼠血管形成机制

目的基于Delta样配体4(delta-like ligand 4,DLL4)/Notch1信号通路探究人参皂苷Rg-3对氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠(azoxymethane/dextran sulphate sodium,AOM/DSS)诱导的炎症相关性结直肠癌小鼠血管形成机制。方法48只C57BL/6J APCMin/+小鼠随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rg-3组(10 mg/kg),每组16只。建立AOM/DSS诱导的结直肠癌模型,采集腹主动脉血与完整结直肠组织,检测血常规与炎症指标,HE染色观察肠组织形态,免疫组化、Western blotting检测肠组织DLL4、Notch1表达。肿瘤细胞、人脐静脉内皮细胞(human umbilical vascular endothelial cells,HUVECs)分为对照组、人参皂苷Rg-3组、人参皂苷Rg-3+DLL4组,通过MTT、克隆形成、划痕、Transwell与血管形成实验检测细胞增殖、迁移、血管形成能力,Western blotting检测DLL4/Notch信号通路、血管形成相关分子表达情况。结果与对照组相比,模型组、人参皂苷Rg-3组RBC、Hct、Hb水平降低(P<0.05),IL-1β、IL-6、TNF-α、DLL4、Notch1表达水平升高(P<0.05);与模型组相比,人参皂苷Rg-3组RBC、Hct、Hb水平提高(P<0.05),IL-1β、IL-6、TNF-α、DLL4、Notch1表达水平下降(P<0.05),肿瘤数量、2~3.5 mm及>3.5 mm的肿瘤数量减少(P<0.05)。细胞实验结果显示,与对照组相比,人参皂苷Rg-3组肿瘤细胞、HUVECs增殖、克隆形成、迁移、血管形成能力下降(P<0.05),DLL4、Notch1、VEGF、VEGFR2、转录因子重组信号结合蛋白Jκ(recombination signal binding protein-Jκ,RBP-Jκ)、Hes1表达水平降低(P<0.05)。结论人参皂苷Rg-3通过抑制DLL4/Notch1信号通路促进血管形成,抑制AOM/DSS诱导结直肠癌进展。

NLK的信号转导和生物学效应的研究进展

NLK是一种进化保守的丝裂原活化蛋白激酶类似的激酶,属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。近年来大量研究表明,NLK的信号转导在低等动物和哺乳动物细胞中发挥着重要的生物学效应。NLK能够调控许多转录因子,如T细胞因子/淋巴细胞增强因子、c-Myb、转录激活因子3、Notch/Delta等,从而导致一系列的生物学效应。正是由于NLK本身具有对多种转录因子的调节功能,使其在细胞的增殖、分化和凋亡、肿瘤发生和免疫反应中都发挥重要的作用。