大亳菊总黄酮的提取及其颗粒剂制备工艺研究

优选大亳菊总黄酮的提取及其颗粒剂制备工艺。采用正交试验,以总黄酮提取率为判断标准,优选大亳菊总黄酮的提取工艺;以成型率为判断标准,优选大亳菊总黄酮颗粒剂的制备工艺。结果表明,优选的大亳菊总黄酮提取工艺为:液料比为25∶1,乙醇体积分数75%,提取温度85℃,回流时间1.25h;优选的制粒工艺为:可溶性淀粉∶糊精=1∶1,浸膏粉∶辅料=1∶3,干燥温度60℃,干燥时间2h。该工艺简便、稳定,可以用于大亳菊总黄酮的提取及其颗粒剂的制备。

湖南省双峰县金丝皇菊规范化种植关键技术

近年来,湖南省双峰县加快菊花基地建设和产业发展,做大做强菊花产业,不断完善基础设施建设,打造花海景观,探索休闲、观光旅游农业的发展路径,逐步实现一二三产业融合发展,真正将小菊花打造成乡村振兴大产业。围绕金丝皇菊高产、高效栽培技术,以及深加工技术,分别从种植地块选择、扦插、移栽技术、生长期管理、病虫草害绿色防治及深加工技术等方面进行了论述。

响应面法优化金丝皇菊多酚提取工艺及其抗氧化活性评价

以金丝皇菊为试验对象,采用超声波辅助法提取多酚。在单因素试验的基础上,采用响应面法对金丝皇菊多酚的提取工艺进行优化。通过考察其对ABTS^(+)·、·O_(2)^(-)、·OH和DPPH·的清除作用,评价多酚的体外抗氧化活性。结果表明:提取金丝皇菊多酚的最佳工艺为料液比1:30(g/mL)、乙醇体积分数85%、超声温度54℃,在此条件下多酚得率为9.34mg/g。自由基清除试验表明,金丝皇菊多酚的清除能力与其质量浓度呈正相关,对ABTS^(+)·、·O_(2)^(-)、DPPH·、和·OH的IC_(50)分别为0.796、0.354、0.574、0.768mg/mL。

金丝皇菊组培快繁体系建立

金丝皇菊药用价值高,属于重要的茶菊生产品种。为建立苗株快速繁殖体系,以金丝皇菊为研究对象,采用组织培养的方法,研究NAA、6-BA 2种激素对金丝皇菊愈伤组织、茎尖诱导、丛生芽诱导、根系诱导等试验的影响。结果表明:培养基MS+30 g·L^(-1)蔗糖+0.5 mg·L^(-1) NAA+1.0 mg·L^(-1)6-BA最适合诱导叶片形成愈伤组织,30 d后愈伤诱导率达到100%;培养基MS+30 g·L^(-1)蔗糖+0.1 mg·L^(-1)NAA+1.5 mg·L^(-1)6-BA适用于茎尖诱导培养,培养的不定芽活性强,分化率高;不定芽增殖试验中,最佳增殖培养基为MS+30 g·L^(-1)蔗糖+1.0 mg·L^(-1)6-BA+0.1 mg·L^(-1) NAA;不添加任何激素的MS培养基15 d生根率达到100%,且叶绿、茎段粗壮,植株长势好。综上,本研究为金丝皇菊的无毒苗繁育研究奠定基础,对乡村茶用菊花产业可持续发展有重要意义。

自然状态下黄山贡菊植株挥发性化学物质成分及生态功能

对黄山贡菊植株采用动态顶空套袋采集法结合GC-MS分析技术,成功地采集和分析了黄山贡菊在自然状态下挥发性化学物质的成分。共确定了59种有机化学物质,包括30种烷烃类、5种酯类、4种醇类、3种醛类、4种烯烃类、1种醚类及3种酮类等。室内Y型管选择行为测试结果表明,α-蒎烯≥600 ng/μL时,对3龄若蚜具有显著的驱避作用(P<0.05)。研究为基于植物化学物质的黄山贡菊蚜虫综合治理提供了理论基础。

4种药剂浸种处理对金丝皇菊功能成分及抗氧化活性的影响

为探究不同药剂浸种处理金丝皇菊扦插种苗对其功能成分及抗氧化活性的影响,确定最适宜的浸种处理药剂。本研究采集清水(Q_1)、生根粉(Q_2)、百菌清(Q_3)、生根粉+百菌清(Q_4)4种药剂处理后的金丝皇菊头状花序样品,采用福林-酚法、苯酚硫酸法和硝酸铝法测定其功能成分的含量;从DPPH、Fe~(3+)和ABTS等3个方面来评价4种药剂浸种处理金丝皇菊的抗氧化活性。结果表明,不同药剂浸种处理对金丝皇菊多糖、总酚和黄酮含量有显著的影响,多糖含量在Q_3时最高(26.81 mg/g),高于滁菊,低于含量较高的枣;总酚和黄酮含量在Q_2时最高(48.59 mg/g和61.88 mg/g),与滁菊基本一致,高于其他品种菊花和蓝莓、黑莓等小浆果食物。不同药剂浸种处理对金丝皇菊多糖和总酚的Fe~(3+)还原能力有显著的影响,多糖的Fe~(3+)还原能力在Q_2时最高(138.34μmol/g),为滁菊的38.6倍;总酚的Fe~(3+)还原能力在Q_3时最高(86.77μmol/g),约为滁菊的3/8。不同药剂浸种处理对金丝皇菊总酚和多糖的DPPH、ABTS自由基清除能力差异不显著。综合药剂浸种处理与金丝皇菊功能成分和抗氧化能力的差异,最适宜浸种处理药剂应确定为生根粉(Q_2)。

4个菊花品种对干旱胁迫的生理响应及抗旱性评价

以国内常见的4个菊花Dendranthema morifolium栽培品种为试验材料,研究干旱胁迫下不同品种菊花的抗旱能力。结果表明:干旱胁迫下,4个菊花的气孔面积差异不显著,气孔密度、叶片厚度、栅栏组织和角质层厚度存在着显著差异,叶片总含水量、自由水含量、相对含水量和束缚水含量也存在显著差异。随胁迫强度的增加,叶片质膜透性持续增大,而叶绿素含量持续下降,4个菊花品种叶片内过氧化物酶的含量都随着干旱胁迫的增加呈现先升高后降低的趋势,“梦幻”的MDA含量在干旱胁迫下的变化不大,“红星”、“雪雁”、“落金钱”的MDA含量一直增加。隶属函数法综合评价4品种菊花抗旱性大小顺序为“雪雁”>“落金钱”>“红星”>“梦幻”。

CCC和B9对乒乓菊小盆栽生长及开花的影响

以紫乒乓菊小盆栽为研究对象,使用400~600 mg/kg CCC(矮壮素)与1000~5000 mg/kg B9(丁酰肼)组合处理乒乓菊,通过测定其株高、节间距、茎粗、单株侧蕾数、花冠直径、叶绿素含量等指标,比较不同配比的CCC和B9对盆栽乒乓菊生长及开花的调控效果。结果表明,低浓度的CCC与B9混合处理乒乓菊可达到单独使用高浓度B9的矮化效果从而降低成本。随着单独喷施CCC浓度增加,乒乓菊植株单株侧蕾数有减少的趋势,CCC和B9混合施用与单独B9施用相比单株侧蕾数也有减少的趋势。不同浓度CCC和B9混合喷施,均在一定程度上使乒乓菊花期延迟,花瓣颜色变浅,且高浓度混合时此现象更明显。600 mg/kg CCC与5000 mg/kg B9混合处理乒乓菊,会使其花瓣变成白色。1000 mg/kg B9与500 mg/kg CCC混合施用时作用效果最佳,其盛花期花朵直径最大,茎粗最粗,株高、节间长、叶厚中等。综上可知,CCC和B9对盆栽乒乓菊具有双重效应,500 mg/kg CCC与1000 mg/kg B9混合施用利于乒乓菊生长及开花调控,初步实现减少B9使用量,用低浓度CCC与B9混合施用对乒乓菊生长及开花的调控,为乒乓菊小盆栽规模化生产提供依据和实践指导。

皇菊元气茶的冲泡工艺与生物活性研究

目的 以金丝皇菊为主要原料,辅以玫瑰花、枸杞子、红枣、桂圆,研制皇菊元气茶,确定最佳复配比例和最佳冲泡工艺,并评价其抗氧化和降血糖活性。方法 以茶汤的感官评分为评价指标,确定最佳的复配比例;通过单因素和正交试验确定茶水比、冲泡温度、冲泡时间对茶品质的影响,以此获得皇菊元气茶的最佳冲泡工艺。通过测定茶对DPPH、ABTS和超氧阴离子自由基的清除率以及α-葡萄糖苷酶的抑制率,评价其抗氧化和降血糖活性。结果 皇菊元气茶的感官评价得分最高的原料配比为金丝皇菊0.9 g,玫瑰花0.8 g,红枣1.0 g,枸杞子1.2 g,龙眼肉1.2 g。选用80 mL 90℃的蒸馏水冲泡皇菊元气茶15 min时,茶汤中黄酮、多酚等有效成分的含量最高,且对DPPH、ABTS和超氧阴离子的清除率分别为46.36%、44.44%、44.00%,对α-葡萄糖苷酶的抑制率为40.00%。结论 优化复配比例与冲泡工艺得到的黄菊元气茶各项指标最佳,具有一定的抗氧化和降血糖功效。

茎叶处理除草剂对菊花田杂草防除效果及安全性评价

杂草是菊花田主要有害生物之一,为筛选菊花田适用除草剂,采用室内盆栽法测定不同茎叶处理除草剂对菊花的安全性。选择安全性高的除草剂进行防除菊花田杂草田间药效试验,确定其田间实际防效,为菊花田杂草防除提供技术支撑。安全性试验表明,茎叶处理除草剂精喹禾灵对移栽后菊花安全性较好;噻吩磺隆等7种药剂药害较严重,导致菊花黄化、枯死;乳氟禾草灵等5种除草剂导致菊花不开花。田间药效试验结果表明,精喹禾灵在30~45 g·hm^(-2)的有效剂量下,对菊花田一年生禾本科杂草防除效果较好,持效期在30 d以上。综上,精喹禾灵可作为防除菊花田禾本科杂草的优选药剂。

基于ISSR分子标记的金丝皇菊遗传多样性分析

为了评价引种金丝皇菊品种群体遗传多样性,推动金丝皇菊遗传选育工作的开展,构建并优化了金丝皇菊ISSR分子标记的PCR反应体系,得出20μL体系中最佳的Buffer、dNTPs、DNA模板量、Taq酶含量、引物浓度分别为2.5μL、1.5μL、2μL、0.3μL、2.0μL。5个ISSR标记引物统计分析表明,Nei’s基因多样性指数(Ne)为0.4998~0.0726,Shannon多态性信息指数(I)为0.6929~0.1082,多态性条带比率值为95.45%,引种群体具有较高的遗传多样性,本研究为引种群体的遗传选育研究提供一定借鉴。

中药复方肥料对金丝皇菊田土壤特性和病害的影响

为探索无公害防治金丝皇菊连作障碍的方法,采用田间试验方法研究以百部、苦参、薄荷、紫苏和青蒿组方不同配比中药复方肥料对金丝皇菊田土壤特性的影响。结果表明,与对照相比施用中药复方肥料增加金丝皇菊全生育期土壤有机质和有效氮磷钾含量。生长旺盛期,施用中药复方肥料土壤细菌数量比对照增加8.24%~31.68%,土壤真菌数量降低6.06%~18.09%,T2(即苦参:百部:薄荷:紫苏用量比为2:1:2:1)细菌数量比其它处理增加17.54%~24.08%,蔗糖酶和过氧化氢酶活性比其它处理高14.47%~32.69%和12.45%~25.42%。采收期,T2处理金丝皇菊根腐病发病率最低、产量最高。可见,施用中药复方肥料能够增加土壤有机质和土壤养分,调控土壤微生物区系,是防治连作障碍、生产优质金丝皇菊的一种可行方法,其中T2效果最佳。

干旱胁迫对菊花不同阶段生长发育影响的研究

文章以菊花和菊花种子为研究材料进行了研究,采用盆栽控水法进行土培,探讨了干旱胁迫对菊花不同阶段生长发育的影响。研究结果表明:随着干旱胁迫程度加剧,菊花种子的发芽率、发芽势和发芽指数等呈现下降趋势;菊花苗的株高、根长和干物质量等也呈现下降趋势。随着干旱胁迫程度加剧,菊花植株的生长发育受到的抑制程度加深,观赏价值显著下降。实验证明,菊花在盆栽条件下,每6天浇一次水就可满足其基本生长的需要。

干旱胁迫下叶面喷施褪黑素对滁菊幼苗生理生化特性的影响

以滁菊品种"金玉"幼苗为材料,通过日光温室内盆栽实验,在中度干旱胁迫条件下(土壤田间持水量的40%),研究叶面喷施外源褪黑素(MT,100μmol·L-1)对滁菊幼苗生长及生理生化特性的影响,探讨提高滁菊耐干旱性的新途径。结果表明:(1)与对照相比,干旱胁迫处理降低了滁菊叶片叶绿素含量、净光合速率和水分利用效率,提高了可溶性蛋白质、可溶性糖和脯氨酸含量,而叶片MDA含量和相对电导率显著增加,显著抑制了滁菊幼苗的生长。(2)在干旱胁迫条件下,外源MT可显著提高滁菊幼苗叶片脯氨酸、可溶性蛋白质和可溶性糖的含量,并显著降低了叶片相对电导率和MDA含量,使幼苗保持较高叶绿素含量和净光合速率。(3)与干旱胁迫处理相比,外源MT处理的滁菊地上部和根系干重、鲜重均显著增加。研究发现,外源褪黑素(MT)在一定程度上可通过促进滁菊幼苗渗透调节物质的积累,有效降低干旱胁迫对其细胞膜的伤害,维持其正常的细胞膜功能,保持其较高的光合速率和水分利用效率,从而增加其对干旱环境的适应性。

菊花外植体再生体系的研究

以不同小菊品种的叶片、茎段、花瓣及子房为外植体进行再生培养。实验结果表明 :不同品种、不同外植体对相同激素水平的反应是不同的。以叶片为外植体时 ,品种Rm 2 7 2的分化率高于Rm 6 4 ;Rm 2 7 2最适培养基为MS +BA 0 .5mg/L +NAA 0 .5mg/L和MS +BA 2 .0mg/L +NAA 0 .2mg/L ,而品种Rm 6 4为MS +BA 6 .0mg/L +NAA 0 .4mg/L ;茎段分化率高于叶片 ,叶片基部分化率高于中上部。子房培养较适宜的培养基为MS +BA 1.0mg/L +NAA 1.0mg/L和MS +BA 2 .0mg/L +NAA 2 .0mg/L ;MS +BA 2 .0mg/L +NAA 0 .2mg/L培养基可有效诱导花瓣产生愈伤组织及芽的分化。并对细胞分裂素、生长素在再生中的作用及适宜浓度作了探讨。

三个药用菊品种的细胞学研究

对原产中国的３个药用菊品种——杭白菊、滁菊、怀菊的核型及减数分裂行为进行了研究。结果表明：杭白菊２ｎ＝４ｘ＝３６＝２Ｍ＋１８ｍ＋１６ｓｍ（２ＳＡＴ），减数分裂中期Ⅰ（ＭⅠ）平均每个花粉母细胞（ＰＭＣ）有０．２０Ⅰ＋１７．７０Ⅱ＋０．１０Ⅳ；滁菊２ｎ＝６ｘ＝５４＝２４ｍ（２ＳＡＴ）＋２２ｓｍ＋６ｓｔ＋２ｔ，在ＭⅠ平均每个ＰＭＣ有０．４４Ⅰ＋２６．６６Ⅱ＋０．０６Ⅳ；怀菊２ｎ＝６ｘ＋１＝５５＝６Ｍ＋２６ｍ＋１２ｓｍ＋２ｓｔ＋９ｔ，在ＭⅠ平均每个ＰＭＣ有１．１２Ⅰ＋２６．６７Ⅱ＋０．０９Ⅳ。３个药用菊均为异源多倍体，但某些染色体可能存在易位或倒位等结构变异。

高效液相色谱法测定金菊花中绿原酸的含量

目的 测定金菊花中绿原酸的含量。方法 采用waters 515高效液相色谱仪，色谱栓（4μm，4．6mm×250mm），流动相为0．1mol／L磷酸二氢钠的缓冲溶液（pH2．65）-甲醇（76：24）；流速1．0ml／min；柱温为室温；检测系统waters2487紫外检测器；检测波长为328nm。结果 绿原酸浓度线性范围在0．095-0．475μg内与峰面积呈良好的线性关系，相关系数为0．9999。结论 该法操作简便。准确，重复性好，可作为全菊花的定量分析方法。

高效液相色谱法同时测定滁菊样品中的9种酚酸

建立了高效液相色谱同时测定滁菊样品中9种酚酸类化合物(水杨酸、苯乙酸、对羟基苯甲酸、香草醛、对香豆酸、阿魏酸、苯甲酸、丁香酸和肉桂酸)的方法。采用Symmetry C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5!m)分离,流动相为乙腈和0.02 mol/L磷酸盐缓冲溶液,以冰醋酸调至pH 2.8,进样量20!L,采用梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长280 nm。各组分的质量浓度与其峰面积具有良好的线性关系,相关系数均大于0.999,且9种酚酸组分在35 min内得到了较好分离。9种酚酸的检出限介于0.01～0.08 mg/L,平均回收率在97.8%～102.5%之间,相对标准偏差为0.2%～3.6%。本方法可用于滁菊样品中酚酸类化合物的快速分析。

杭白菊提取液对抗缺血再灌注引起的离体大鼠心肌收缩功能下降

目的 :观察杭白菊水提取液在缺血再灌注和缺氧 /复氧过程中对离体心脏和心室肌细胞的影响 ,并探讨其作用机制。方法 :采用Langendorff离体灌流心脏模型 ,观察心室收缩功能 ;用视频跟踪系统和细胞内双波长荧光系统分别记录单个心肌细胞收缩和 [Ca2 + ]i;测定心肌丙二醛 (MDA)和超氧化物歧化酶 (SOD)水平。结果 :杭白菊 (0 5g/L)可明显减轻缺血再灌注引起的离体灌流心脏左室发展压、最大收缩 /舒张速率、冠脉流量和左室发展压与心率乘积的抑制作用 ;并明显减弱缺氧 /复氧抑制心室肌细胞收缩幅度、最大收缩 /舒张速度和细胞钙瞬态的作用。杭白菊处理的缺血再灌注组心肌SOD水平明显升高 ,MDA含量显著降低。结论 :杭白菊可能通过对抗自由基的作用 ,从而减轻缺血再灌注和缺氧 /复氧对心肌收缩功能的抑制。

菊花病虫害综合防治研究

系统调查了菊花病毒病、霜霉病、叶斑病、叶面害虫，蚜虫天敌种类及其流行规律，研究了组培脱毒苗，地膜覆盖移栽，与高秆作物套作、摘顶稍、利用昆虫天敌及化学防治等综合治理效果，测定了农药残留量，结果表明，菊花组培苗脱毒率在60％左右，脱毒苗增产50％以上，叶枯病，霜霉病病叶率下降28％－30％，虫口密度下降40％，在收菊花前1个月使用拟菊酯杀虫剂，农药残留量低于允许值，不会对菊花和和环境造成污染。