梵净山石斛快速繁殖技术研究

为研究梵净山石斛快速繁殖技术,对其保育提供基础资料,本实验分别以梵净山石斛茎段、种子为外植体进行组培快速繁殖技术研究。结果表明,以茎段为外植体,最佳消毒方法为:75%乙醇消毒30 s,0.1%HgCl_(2)消毒13 min,腋芽诱导最佳组合为:1/2 MS/B_(5)+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,不定芽诱导和增殖最佳组合为:1/2 MS+0.5 mg/L NAA+1 mg/L 6-BA,以种子为外植体,种子萌发和原球茎诱导最佳组合为:MS+1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+1 g/L活性炭,原球茎增殖最佳组合为:MS+0.5 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA,无菌小苗增殖最佳为:MS+0.5 mg/L NAA+1.0/2.0/3.0 mg/L 6-BA。生根壮苗最佳组合为:MS+0.5 mg/L NAA+1/0.1/0.5 mg/L IBA。

五种药用石斛快速繁殖的研究

为解决石斛的快速繁殖和提高组培苗的成活率,以MS为基本培养基,把《中华人民共和国药典(2000版)》(以下简称中国药典)收载的5种药用石斛的茎段作为外植体进行了组培和快繁,并根据石斛的生物学特性,配制了多种基质进行炼苗。结果表明:不同种类的石斛在诱导侧芽萌发时所需培养基不同,但是在增殖、壮苗生根以及炼苗移栽时所需基质却具有相似性。环草石斛、铁皮石斛、束花石斛、马鞭石斛和金钗石斛在诱导侧芽萌发时的最适培养基分别为:MS+NAA0.1mg/L+6BA1.0mg/L、MS+NAA0.1mg/L+6BA1.5mg/L、MS+NAA0.5mg/L+6BA2.0mg/L、MS+NAA1.0mg/L+6BA2.0mg/L、MS+NAA0.1mg/L+6BA2.0mg/L。这5种石斛增殖、壮苗生根的最适培养基分别为:MS+NAA0.1mg/L+6BA3.0mg/L、1/2MS+NAA0.7mg/L。移栽最适基质为:碳酸盐小石子∶木屑=1∶2,再覆盖1cm厚的苔藓,幼苗移栽成活率达95%以上。本文首次报道了在实验室里获得马鞭石斛和束花石斛这两个种的组培苗,并初步解决了石斛试管苗脱瓶移栽成活率低的问题,使下一步进行大面积人工栽培成为可能。

环草石斛(D.loddigesii Rolfe.)快速繁殖研究

用环草石斛的茎段作为外植体进行组织培养,以MS培养基为基本培养基,通过形成丛生芽的形式快速繁殖试管苗,改变了过去通过原球茎诱导途径进行繁殖的方式,简化了操作步骤。结果表明:芽诱导、芽增殖与继代培养基、壮苗与生根培养基分别以MS+NAA0 1mg/L+6-BA1 0mg/L、MS+NAA0 1mg/L+6-BA3 0mg/L、1/2MS+NAA0 7mg/L为最好;移栽最适基质以碳酸盐小石子∶杉木屑=1∶2,上面铺盖1cm厚的苔藓为最好,幼苗的成活率达95%;取材的位置不同对环草石斛出芽也有一定的影响,茎尖部位明显要高于其它部位,茎中部次之,而茎基部几乎不能萌发;茎段外植体苗比种子苗成株快,茎粗,苗壮,易成活;外植体苗分段增殖时基部茎段的增殖系数比上部茎段大,生长速度快。继代增殖苗段比野生植株增殖快。同时还总结了环草石斛的组织培养和快速繁殖过程,并对其工业化生产进行了初步讨论。

GC-MS法分析不同部位仿野生与组培快繁铁皮石斛中的挥发性成分

目的分析仿野生与组织培养快速繁殖(组培快繁)铁皮石斛茎、根和叶中的挥发性成分。方法铁皮石斛茎、根和叶液氮研磨成粉,气质联用(GC-MS)仪分析提取液中的成分和其相对含有量。结果铁皮石斛中共鉴定出90种挥发成分,主要为醛类、醇类、酯类、萜烯类、酮类、烷烃与芳香烃及其衍生物。其中,仿野生鉴定出72种,茎中24种、根中29种、叶中19种;组培快繁鉴定出68种,茎中23种、根中29种、叶中16种。其共有成分在茎中有11种,根中有10种,叶中有5种。此外,萘在铁皮石斛不同部位中的含有量都较高。结论仿野生与组培快繁铁皮石斛不同部位中挥发性成分的差异很大。

金钗石斛茎段培养再生绿色植株

报道了用金钗石斛 (DendrobiumnobileLindl)的茎段作离体培养和快速繁殖 ,已诱导出丛生芽并发育形成试管苗 ,试管苗经过“炼苗处理” ,移栽成活。同时还试验了

齿瓣石斛茎段快繁技术研究

本文对齿瓣石斛茎段快繁技术进行研究,结果表明:齿瓣石斛最佳诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L;芽增殖培养基以MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L较好;生根培养基以MS+IBA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L较好。

铁皮石斛同源四倍体工厂化快繁工艺研究

以实验室前期诱导的铁皮石斛四倍体为研究材料,利用气孔、叶绿体、染色体计数及流式细胞仪等方法,对铁皮石斛同源四倍体株系的纯合性进行鉴定,在此基础上利用茎段扩繁和原球茎诱导、增殖、分化两种方案比较增殖效率,并对原球茎的倍性稳定性进行再鉴定。结果表明:(1)实验室的‘花自-2’株系为纯合同源四倍体。(2)茎段扩繁最佳增殖培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+15%香蕉汁,茎段诱导原球茎最佳培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+0.2mg/L KT,诱导率达到76.66%;原球茎增殖最佳培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+15%马铃薯提取液,原球茎分化最佳培养基为1/2 MS+0.5mg/L 6-BA+20%马铃薯提取液,原球茎分化率达到85.70%;生根最佳培养基为1/2MS+0.5mg/L NAA+15%香蕉汁,生根率达到92.77%。(3)原球茎根尖鉴定结果表明,诱导的倍性可以稳定遗传。(4)瓶苗移栽的最佳炼苗时间为5d,移栽成活率达92.30%。该试验建立了铁皮石斛同源四倍体株系新的快繁技术体系,为四倍体试管苗的工厂化生产和推广奠定了技术基础。