叠鞘石斛组织培养及植株再生体系优化

以叠鞘石斛成熟种子为材料,使用IBA、6-BA和NAA共3种生长调节剂与香蕉泥和椰子汁有机物等组合,采用3因素3水平正交设计及单因素设计进行组织培养研究.结果显示,最佳叠鞘石斛原球茎培养基为MS+50 g/L椰子汁+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂,40 d增殖系数为6.75,分化率为84.38%;最佳叠鞘石斛壮苗生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂.通过该技术,可以在较短时间获得大批量优质叠鞘石斛种苗,为大规模叠鞘石斛药材生产提供基础.

叠鞘石斛化学成分研究

目的研究叠鞘石斛化学成分。方法叠鞘石斛乙酸乙酯部位采用硅胶柱层析、重结晶等方法分离纯化,并通过理化性质和波谱技术鉴定化合物结构。结果从叠鞘石斛中分离得到10个化合物,分别鉴定为松柏醛(1)、香兰素(2)、香草酸(3)、丁香醛(4)、丁香酸(5)、5-乙酰氧甲基糠醛(6)、5-羟甲基糠醛(7)、邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(8)、草木樨苷甲酯(9)、4,5-二羟基-2-甲氧基-9,10-二氢菲(10)。结论所有化合物均为首次从叠鞘石斛中分离得到。

叠鞘石斛与石斛药典收载品种脂溶性成分GC-MS对比研究

目的运用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法研究叠鞘石斛与石斛药典收载品种的脂溶性成分,为叠鞘石斛的开发利用提供参考。方法采用有机溶剂法提取脂溶性成分,运用GC-MS进行分离测定,结合质谱库检索技术对化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果初步鉴定出95种化合物,其中分别从叠鞘石斛、金钗石斛、鼓槌石斛、流苏石斛中分析鉴定出33、55、37、36种化合物,四者脂溶性成分在组成和相对含量上均有一定差异。结论首次采用GC-MS联用技术对叠鞘石斛与药典收载品种金钗石斛、鼓槌石斛、流苏石斛进行对比研究,为叠鞘石斛的进一步开发利用提供了一定的理论基础。

川产道地药材叠鞘石斛茎叶花脂溶性成分气相色谱-质谱联用分析

目的研究叠鞘石斛茎、叶和花脂溶性成分,为叠鞘石斛的综合开发利用提供科学依据。方法运用GC-MS法对叠鞘石斛不同药用部位脂溶性成分进行分离测定,结合质谱库检索系统对化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果叠鞘石斛茎中鉴定出33个化学成分,占总含量的75.84%;叶中鉴定出41种化学成分,占总含量的61.56%;花中鉴定出53种化学成分,占总含量的81.90%。结论首次对川产道地药材叠鞘石斛不同部位脂溶性成分进行定性定量研究,共鉴定出93种成分。不同药用部位脂溶性成分有较大差异,主要成分均为脂肪酸类、酯和烃类。

川产叠鞘石斛与石斛药典收载品种指纹图谱对比研究

目的:对叠鞘石斛与石斛药典收载品种金钗、鼓槌和流苏石斛HPLC-DAD-ELSD指纹图谱进行对比研究。方法:采用Dikma C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;乙腈-0.5%冰醋酸水溶液梯度洗脱;柱温:30℃;流速:1 mL/min;DAD串联蒸发光散射检测器检测。结果:首次建立了石斛的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱鉴别方法,并对9个指纹峰进行了标定。首次对叠鞘石斛和石斛药典收载品种金钗、鼓槌、流苏石斛指纹图谱进行对比研究。结论:建立的方法稳定、可靠、重现性好,可直接了解石斛品种与化学成分变化的关系。叠鞘石斛与石斛药典收载品种有一定相似性,但相似度较低。

川产叠鞘石斛挥发油化学成分的GC-MS分析

目的:采用GC-MS联用法对叠鞘石斛挥发油化学成分进行研究,为叠鞘石斛的综合利用提供参考。方法:采用有机溶剂-水蒸气蒸馏法提取挥发油,并运用GC-MS进行分离测定,结合质谱库检索技术对化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果:叠鞘石斛挥发油中分离出115种成分,鉴定出70种化学成分。结论:首次对叠鞘石斛挥发油化学成分进行定性定量研究,主要为烷烃类、醛类和醇类。

叠鞘石斛与药典收载石斛品种鞣质含量对比

目的:对叠鞘石斛与药典收载品种金钗、鼓槌和流苏石斛的鞣质含量进行对比研究。方法:以没食子酸为对照,对不同品种石斛药材中鞣质含量进行测定。结果:对叠鞘石斛及药典收载品种的鞣质含量进行了测定,金钗石斛含量最高,叠鞘石斛与流苏石斛含量较为接近。结论:建立的方法稳定、可靠、重复性好,可作为石斛药材中鞣质的含量测定方法。

叠鞘石斛的化学成分研究

目的研究叠鞘石斛Dendrobium aurantiacum var.denneanum药材的化学成分。方法应用硅胶、大孔吸附树脂AB-8、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及高效液相制备色谱等方法进行分离纯化,根据质谱和波谱数据鉴定化合物的结构,同时采用MTT法进行抗肿瘤活性筛选。结果从叠鞘石斛茎中分离鉴定了9个化合物,分别为(-)-(7R,7′R,8R,8′S)-4,4′-二羟基-3,3′,5,5′-四甲氧基-7,9′-环氧木脂烷-7′,9-内酯()、(-)-丁香脂素()、(-)-开环异落叶松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷()、拖鞋状石斛素()、石斛酚()、杓唇石斛素()、(+)-柚皮素()、反式肉桂酸甲酯-2-O-β-D-葡萄糖苷()、香草酸()。其中,化合物对A549、Hep G2、A2780肿瘤细胞增殖具有不同程度的抑制作用,IC50分别为5.49、51.2、119.3μmol/L。结论化合物为新化合物,命名为石斛脂素;且对3种人肿瘤细胞具有一定的细胞毒作用。