铁皮石斛药材HPLC指纹图谱研究

目的建立铁皮石斛药材的RP-HPLC指纹图谱。方法采用梯度洗脱的方法,以KromasilKR100-5C18(250mm×4.6mm,5μm)为分析用色谱柱,以乙腈-0.4%磷酸溶液为流动相建立了铁皮石斛药材的指纹图谱,并进行了相似度的计算。结果该方法可使铁皮石斛中各成分得到较好的分离,并根据检测结果确定了15个共有指纹峰。结论该指纹图谱检测方法简便、重现性好,可作为铁皮石斛药材质量控制的重要方法。

添加剂对铁皮石斛组织培养和快速繁殖的影响

1/2MS培养基添加活性炭、植物激素及香蕉汁、苹果汁、土豆汁等对铁皮石斛DendrobiumcanducumWall exLindl 快速繁殖的影响研究 ,结果表明 :适量的活性炭和 1 0mg/LNAA比较适合铁皮石斛原球茎的增殖 ;1/2MS及添加 0 5mg/LNAA和 0 5 %活性炭比较适于原球茎的分化 ;添加 0 5 %活性炭和香蕉汁、苹果汁能促进试管苗根的生成和生长。

液-质联用法测定铁皮石斛和西洋参及制剂中多菌灵残留

用高效液相色谱-质谱联用法定量检测铁皮石斛、西洋参药材及其制剂中的多菌灵残留。在酸性条件下以甲醇提取中药材和制剂中的残留多菌灵，分析色谱柱为Diamonsil C18（4．6mmi．d.×250mm，5μm），以4％四氢呋喃水溶液-甲醇梯度洗脱，采用选择离子监测模式，以m／z192为检测定量离子。多菌灵出峰时间在27min左右，线性范围为0．22—33ng，相关系数0．9993；方法检出限为0．015mg／L；定量限为0.022ms／L；平均回收率在95．6％以上。该方法灵敏、准确、可靠，定量范围宽，耐用性强，可作为中药中多菌灵残留的可靠检测方法。

铁皮石斛根茎中菲类化学成分分析

目的:研究铁皮石斛根茎的菲类化学成分。方法:运用各种柱色谱方法进行化学成分的分离纯化,并根据其理化性质、波谱解析、对照品比较以及文献报道对比鉴定化合物结构。结果:从其乙醇提取物中经反复纯化得到6个化合物,分别鉴定为2,3,4,7-四甲氧基菲(Ⅰ)、1,5-二羧基-1,2,3,4-四甲氧基菲(Ⅱ)、2,5-二羟基-3,4-二甲氧基菲(Ⅲ)、2,7-二羧基-3,4,8-三甲氧基菲(Ⅳ)、2,5-二羧基-3,4-二甲氧基菲(Ⅴ)、3,5-二羧基-2,4-二甲氧基菲(Ⅵ)。结论:其中化合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ为首次从石斛属植物中分离得到。

铁皮石斛原球茎液体悬浮培养的研究

目的研究铁皮石斛Dendrobiumcandidum原球茎液体悬浮培养的可行性以及接种量和培养液体积对原球茎生长的影响。方法利用完全随机实验设计和正交试验设计研究不同基本培养基、接种量和培养液体积对原球茎生长的影响。结果无论鲜重还是干重,铁皮石斛原球茎在液体培养基上均极显著好于固体培养基(P<0.001)。不同基本培养基对铁皮石斛原球茎生长影响的研究表明,培养天数为30d时,对于鲜重67-V极显著好于B5(P<0.01),B5极显著好于1/2MS(P<0.01),1/2MS显著好于MS(P<0.05);对于干重67-V与B5没有显著性差异(P>0.05),B5极显著好于1/2MS(P<0.01),1/2MS极显著好于MS(P<0.01)。接种量和培养液体积对原球茎生长影响的研究表明,接种量影响最大,体积其次,互作最小,若不考虑互作,对于鲜重和干重,最佳处理为接种量6.194g/瓶+培养液体积150mL/瓶或100mL/瓶;对于干重,若考虑互作,接种量为6.194g/瓶时,应选培养液体积150mL/瓶或100mL/瓶,接种量为3.102g/瓶时,应选培养液体积150mL/瓶或100mL/瓶,接种量为1.693g/瓶时,应选150mL/瓶或50mL/瓶。结论液体悬浮培养对铁皮石斛原球茎的生长有利,获得了最佳基本培养基、接种量和培养液体积的最佳搭配方案,表明通过液体悬浮培养生产铁皮石斛原球茎具有较好的开发应用前景。

不同培养条件对铁皮石斛原球茎增殖的影响

[目的]为了找到适合原球茎增殖的培养条件,为工厂化育苗提供技术支撑。[方法]以铁皮石斛茎段诱导出的原球茎为实验材料,研究了不同基本培养基、不同碳源、不同浓度的脱落酸(ABA)和培养方式对其增殖的影响。[结果]在5种培养基中,原球茎增殖倍数均呈上升的趋势,其中改良MS的增殖倍数明显高于其他培养基;在低浓度的条件下,随ABA浓度的增加,原球茎的增殖速度加快,当浓度为0.5 mg/L时,增殖最大;蔗糖为碳源时原球茎增殖的效果比葡萄糖、果糖好;固体培养和液体振荡培养时原球茎增殖倍数最高。[结论]在改良MS中加入30 mg/L蔗糖和0.5 mg/L ABA,进行固体培养或液体振荡培养,铁皮石斛原球茎增殖的效果好。

不同培养基对铁皮石斛组培快繁的影响（英文）

【目的】探讨铁皮石斛种子萌发、芽增殖和生根的适宜培养基,为铁皮石斛组织快繁技术提供依据。【方法】以铁皮石斛种子为外植体进行培养,研究6-BA(0-3.0mg/L)、NAA(0.1-0.3mg/L)、香蕉泥(15%～25%)和马铃薯泥(15%～25%)对铁皮石斛种子萌发、芽增殖和生根壮苗的影响。【结果】适宜种子萌发的较好培养基为MS+20%马铃薯泥,芽增殖最适培养基为MS+2.0mg/L6-BA,增殖率达282.7%;最适生根培养基为MS+15%香蕉泥,生根率达100%。【结论】经马铃薯泥、香蕉泥培养的铁皮石斛组培苗,生长健壮,能为生产提供大量的种苗,因而此类培养基可用于大规模生产铁皮石斛组培苗。

袋式培养在铁皮石斛组培苗生根中的应用研究和效率评价

以铁皮石斛分化苗为供试材料,采用常规瓶式培养方式和袋式培养方式进行生根培养。结果显示,两种培养方式生产的组培苗生长状况无明显差异,均表现出生根快且根系发达,生根率达到100%,苗健壮,质量好,移栽成活率高达90%以上;但在培养基灭菌和接种效率、污染率、移植成活率、培养空间利用率和炼苗效率等方面,袋式培养优于常规瓶式培养,可提高生产效率,达到节能增效目的。

福建铁皮石斛人工繁育技术研究

以福建铁皮石斛种子为材料,开展种子萌芽、壮苗生根适宜培养基配方试验研究,并对组培苗的移栽基质进行筛选。结果表明:以MS+蔗糖30g.L-1+琼脂7g.L-1为培养基,种子萌芽快,萌芽率高;1/4MS+蔗糖40g.L-1+马铃薯提取液100mg.L-1+琼脂7g.L-1是壮苗生根的最佳培养基;木屑∶泥炭(1∶2)的基质,组培苗移栽成活率、平均新芽数及大于3cm平均新芽数等3项指标最好。

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生长的影响

目的研究固体培养条件下2种真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生长的影响。方法筛选获得铁皮石斛原球茎的继代培养基及其生长曲线。根据生长曲线,在原球茎生长的不同时期加入真菌诱导子,考察诱导子对原球茎鲜质量和干质量的影响。结果铁皮石斛原球茎继代培养基:1/2MS+20%土豆+3%蔗糖+0.8%琼脂。与对照相比,第11周和第13周加入MF23诱导子使原球茎鲜质量分别提高了16.4%(P<0.01)和23.4%(P<0.01),干质量分别提高了6.7%(P<0.05)和17.9%(P<0.01),继代培养基中加入MF23诱导子使原球茎干质量降低了9.9%(P<0.01)。与对照相比,第11周和第13周加入MF24诱导子使原球茎鲜质量分别提高了17.7%(P<0.01)和12.0%(P<0.05),第11周加入MF24诱导子使原球茎干质量提高了9.2%(P<0.05),继代培养基中加入MF24诱导子使原球茎干质量降低了13.9%(P<0.01)。结论在原球茎培养的早期加入真菌诱导子,对原球茎的生长有一定抑制作用;在原球茎培养的后期加入真菌诱导子,对原球茎的生长有促进作用。

声波刺激对铁皮石斛组培苗多糖含量的影响

目的:测定特定的声波刺激对铁皮石斛组培苗多糖含量的影响程度。方法:以苯酚-硫酸比色法测定多糖的含量。结果:连续刺激24天后多糖含量明显高于对照组。结论:特定的声波刺激可以明显地促进铁皮石斛多糖的合成,对石斛多糖代谢途径有显著的影响。

铁皮石斛RNA提取及RT-PCR检测

目的 有效地提取铁皮石斛高质量的RNA,为研究环境胁迫对铁皮石斛生长与代谢影响的分子表达机制奠定基础.方法 建立声波处理的刺激组与对照组,改良苯酚-氯仿法制备的RNA,分光光度法检测其量,1.0%变性琼脂糖凝胶电泳检测其完整性;所得的总RNA经过RT PCR扩增,6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染检测显示其差异cDNA片段.结果 提取的总RNA A260/A230为3.16,A260/A280为1.96,产量达0.27μg/mg,电泳条带清晰,完整性良好,可筛选出明显的差异cDNA片段,分子质量在240～600 bp.结论 用该方法能高质高量地提取富含多糖的药用植物总RNA.

铁皮石斛离体培养体细胞胚发生的组织细胞学研究

【目的】探索离体条件下铁皮石斛体细胞胚发生过程,为铁皮石斛的快速繁殖生产和种质资源保存提供技术依据。【方法】取继代培养30 d的铁皮石斛类原球茎作接种材料,以N6为基本培养基,加入植物激素,并以真菌提取物作诱导子,对类原球茎和愈伤组织进行诱导培养。【结果】显微观察结果表明铁皮石斛体细胞胚的形成可由愈伤组织的表皮细胞或内部细胞产生。【结论】铁皮石斛通过类原球茎和愈伤组织的诱导培养能获得大量的丛芽。

多效唑对铁皮石斛试管苗培养的影响

[目的]研究多效唑对铁皮石斛试管苗壮苗培养的影响。[方法]利用组织培养技术进行研究。[结果]结果表明,MS培养基中加入多效唑处理后对铁皮石斛试管苗生长有极显著影响,多效唑处理后试管苗矮化、节间变短、叶变小,苗高是对照的32.1%,茎粗是对照的161.0%,与对照相比都达到极显著差异;叶片数与对照无显著差异,叶长与叶宽显著减小;根长减小,根数显著增加,根粗增加不明显。[结论]多效唑可明显促进试管苗生长,有利于试管苗生根,提高移栽成活率。

铁皮石斛茎、叶挥发性成分研究

利用水蒸汽蒸馏提取铁皮石斛挥发性成分，用GC／MS进行分离测定，铁皮石斛茎中分离出24个成分，鉴定出14个化学成分，占挥发油总量的91．76％；铁皮石斛叶中分离出20个成分，鉴定出18个化学成分，占挥发油总量的97．40％。铁皮石斛茎、叶挥发性成分中，含有11种相同成分。铁皮石斛的不同部位其挥发油化合物组成和含量不尽相同，为铁皮石斛的综合利用提供参考数据。

铁皮石斛人工种子包衣技术研究

以铁皮石斛未萌发原球茎、萌发原球茎为繁殖体,利用蔗糖、淀粉、ABA、NAA、活性炭、多菌灵、海藻酸钠设计了36种人工胚乳并研究它们对铁皮石斛人工种子萌发及生长状态的影响,筛选出适宜的繁殖体和胚乳配方,在此基础上进行包衣制作。结果表明:以萌发原球茎为繁殖体的人工种子萌发率和成活率较高。适宜的人工胚乳组合为蔗糖3.0%、ABA 1.0mg/L、活性炭浓度0.5%、多菌灵3.0%、海藻酸钠3.0%。在铁皮石斛人工种子外层制作包衣,自然条件下可获得较高的萌发率和成活率。

铁皮石斛茎段诱导丛生芽的研究

以铁皮石斛 Dendrobium candidum Wall.ex L indl.的茎段作外植体 ,比较不同的培养基、激素等因素对茎段分化丛生芽的影响 ,以及不同浓度的香蕉汁和活性炭对试管苗生根的影响。结果表明 :1/ 2 MS较好 ,BA作用优于 KT、ZT,最适浓度为 2 .0 mg/ L ;丛生芽培养于 1/ 2 MS+10 %香蕉汁 +0 .5 %AC的培养基上 ,生根效果最好。

铁皮石斛原球茎增殖条件的研究

研究了不同基本培养基、不同浓度的脱落酸和培养方式对铁皮石斛原球茎增殖的影响。结果表明在改良MS中加入0.5 mg.L-1脱落酸,进行固体培养或液体振荡培养,原球茎增殖的效果都比较好。

铁皮石斛组织培养与栽培技术研究进展

结合铁皮石斛的生物学特性,从不同因素对铁皮石斛种子萌发、原球茎增殖与分化、不定芽诱导与增殖、生根与壮苗的影响等方面综述了铁皮石斛组织培养技术研究概况,从栽培技术和田间管理两大方面总结了铁皮石斛的栽培管理技术研究进展,并对铁皮石斛的组织培养与栽培管理技术发展方向进行了展望。

促进铁皮石斛试管苗移栽成活的研究

目的有效加速铁皮石斛试管苗的人工繁殖。方法 :对铁皮石斛试管苗在移植时期进行不同基质 (有无伴生植被 )、根长和营养液浓度等方面的研究。结果 :最适宜的基质是 1/ 3泥炭 +1/ 3锯末 +1/ 3珍珠岩 ,覆以苔藓类伴生植被可大大提高移栽成活率。组培苗根长在 0 .5～ 1.0cm时是移植的最佳时期 ,移植半个月后施放 1/ 2倍营养液为最好。结论