Chemical Constituents from the Flowers of Dendrobium chrysanthum

[Objective] This study aimed to investigate the chemical constituents from the flowers of Dendrobium chrysanthum and determine its bioactive compounds.[Method] The compounds were extracted by 95% alcohol and isolated by column chromatography on silica gel and Sephadex LH-20. Their structures were identified by spectroscopic analysis(1H NMR,13 CNMR and EIMS). [Result] Nine compounds were obtained and identified as stigmasterol(1), β-sitosterol(2), linoleic acid(3),stigmast-4-en-3-one(4), dibutyl phthalate(5), moscatilin(6), ergosterol(7), ergosterol peroxide(8) and daucosterol(9). [Conclusion] All compounds were isolated from its flowers for the first time.

不同干燥方法对束花石斛的质量和抗氧化活性的影响

为研究不同干燥方法对束花石斛质量及抗氧化活性的影响,找出束花石斛最佳干燥方法,为束花石斛的产地加工提供科学依据。本文采用晒干、阴干、微波干燥和不同温度(50~90℃)热风烘干等8种干燥方法对束花石斛进行处理,利用分光光度法测量多糖含量和总黄酮含量,选取1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除能力、羟自由基清除能力和超氧阴离子自由基清除能力评价其抗氧化活性。结果表明,不同温度烘干均比其他干燥方式的浸出物含量高,以70℃烘干的浸出物含量最高,为30.87%;多糖含量以阴干最高,为7.85%;总黄酮含量以微波干燥最高,为4.79%。DPPH清除率、羟自由基清除率和超氧阴离子自由基清除率均以阴干最高,分别为81.92%,17.71%和94.13%。实验证明,不同干燥方法对束花石斛质量和清除自由基活性的影响较大。束花石斛阴干是较优的产地干燥方法,本研究为束花石斛产地加工提供理论和技术指导。

束花石斛的繁育生物学特性

为了探究束花石斛(Dendrobium chrysanthum)的繁育生物学特性,对其开花习性、花粉活力、柱头分泌特性、人工授粉结实率、自然结实种子育性和贮藏特性进行研究,结果表明:(1)束花石斛花芽萌动期为19d,现蕾期为23 d,群体花期为28 d,单花寿命10~15 d;(2)开花1~3 d花粉活力保持在90%左右,开花至第9天时花粉活力仅为23.7%,初始3 d开花的花粉活力与其他时间取样的活力差异均达极显著水平(P<0.01),花粉活力随开花时间延长呈由强到弱的趋势;(3)束花石斛的柱头腔从开花第2天开始有分泌物,第6 d时分泌物最多,柱头过氧化氢染色结果表明在开花5~6 d时柱头可授性最强,柱头可授性随开花时间延长呈由弱到强再到弱的趋势;(4)选取花朵开放4 d的花粉和柱头人工授粉,同株异花和同花授粉未见结实。野外结实果质量2.02~4.83 g,种子长0.628~0.845 mm,宽0.082~0.110 mm,长宽比为7.798,成胚率达97.35%,种子活力为90.80%,室温条件保存6个月的种子活力维持在73.20%。上述结果说明,束花石斛单花花期不长,开花初期花粉活力最高,柱头发育要滞后于花粉的发育;束花石斛不存在无融和生殖,人工同株自花授粉不育。但自然状况下能正常结实,种子发育良好,胚活力较高,干燥种子在自然条件下有一定的耐贮特性。本研究揭示了束花石斛的开花生物学特性和雌雄蕊异熟特点,其交配系统应为自交不亲和,为其野生种质资源的保育和人工精准授粉提供科学依据。

束花石斛化学成分研究

目的 :对束花石斛抗凝血活性部位乙酸乙酯部分进行化学成分研究。方法 :色谱和光谱分析法分离鉴定结构。结果 :从乙酸乙酯部分分离得到 9个化合物 ,分别鉴定为鼓槌联苄 (1)、玫瑰石斛素 (2 )、moscatilin(3)、dengibsin(4)、dendroflorin(5 )、大黄素 (6 ) ,大黄素甲醚 (7) ,大黄酚 (8)和 β 谷甾醇 (9)。 结论 :以上化合物除moscatilin外 。

药用植物束花石斛、流苏石斛及其形态相似种的PCR-RFLP鉴别研究

目的建立简易的采用rDNAITS区作为分子标记对中药石斛的基源植物进行分子鉴定的技术。方法用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCRRFLP)方法获得ITS片段的限制性图谱。束花石斛及其形态相似种的PCR扩增产物用ClaI和ApaLI酶切,流苏石斛及其形态相似种的PCR扩增产物用SphI酶切。结果根据预测的PCRRFLP图谱,可以鉴别药用植物束花石斛、流苏石斛及它们的形态相似种。用这种方法鉴定了市场上收集的25件商品束花石斛、流苏石斛新鲜药材的原植物。结论rDNAITS的PCRRFLP可用于鉴定石斛药材的原植物,具有简便、费用低的优点。

束花石斛种质资源的ISSR分析

采用ISSR分子标记技术对9个居群束花石斛的遗传多样性和亲缘关系进行分析。结果显示,从60条ISSR引物中共筛选出的5条有效引物,每个引物的扩增位点为9～13个,共56个位点,多态性位点49个(87.90%)。束花石斛种内遗传多态性水平较高,遗传变异较丰富,9个居群的总扩增条带为242个,平均每个居群为26.90个,其中多态性条带占179个(72.90%)。野生束花石斛种质资源减少的主要原因在于人为过度采收和其赖以生长的环境被破坏,聚类分析结果表明,云南思茅和文山居群的遗传距离最近,而云南景洪居群与其它居群之间的遗传距离相对较大,说明束花石斛种内亲缘关系的远近可能与其地理分布也有一定的联系。

束花石斛抗凝血作用的初步研究

目的初步研究束花石斛DendrobiumchrysanthumWallexLindl的抗凝血作用。方法在研究比较束花石斛、金钗石斛DendrobiumnobileLindl、球花石斛DendrobiumthyrsiflorumRchbf和鼓槌石斛DendrobiumchrysotoxumLindl的乙醇提取物对小鼠全血凝血时间的影响基础上,观察束花石斛乙酸乙酯部位、生物碱部位和正丁醇部位对小鼠全血凝血时间和小鼠出血时间的影响,进一步对束花石斛乙酸乙酯部位用小鼠凝血因子和大鼠颈总动脉颈外静脉血流旁路实验性血栓法进行测定研究。结果在全血凝血时间实验中束花石斛乙醇提取物与其他三种石斛乙醇提取物相比对凝血时间的延长作用最为显著;而束花石斛乙酸乙酯部位与其他两个部位相比,对全血凝血时间和出血时间的延长作用最为显著,并能抑制大鼠颈总动脉颈外静脉血流旁路实验性血栓的形成,但对凝血因子没有显著作用。结论束花石斛乙酸乙酯部位可能主要通过抑制血小板聚集来发挥抗凝血作用的。

流苏石斛与束花石斛挥发油成分

为探明黔产流苏石斛茎与束花石斛茎中的挥发油组成及差异,采用固相微萃取技术分别提取贵州兴义野生流苏石斛茎与束花石斛茎中的挥发油,GC-MS法对其化学成分进行分析鉴定和计算相对百分含量。结果表明:从黔产流苏石斛茎与束花石斛茎中分离鉴定出化学成分62个和54个,其相对含量占挥发油总量的97.66%和96.65%;两者具有相同的挥发性化学成分40个,其主要成分均含有β-波旁烯、δ-杜松烯、反-2-辛烯醛等;其中,流苏石斛茎挥发油中相对含量最高的为β-波旁烯(47.53%),而束花石斛中相对含量最高的为依兰油烯(19.397%)。

3种石斛药材氢核磁共振谱特征图谱的研究

目的建立3种石斛药材的氢核磁共振谱(1HNMR)特征图谱。方法首先采用溶剂萃取法或硅胶色谱分离法获得3种石斛(束花石斛D.chrysanthum Wall.,铁皮石斛D.candidum Wall.ex Lindl和金钗石斛D.nobile Lindl.)的特征提取物及其主要成分,然后利用FT-1HNMR(300MHz)技术测定得1HNMR特征图谱并对特征信号进行归属。结果束花石斛、金钗石斛的SCE-B和铁皮石斛的SCEA特征提取物的1HNMR特征图谱可作为该药材基源鉴定的相对标准图谱。结论建立的1HNMR特征图谱方法在鉴别中药石斛上具有指导意义。

束花石斛降血糖活性及化学成分研究

目的研究兰科石斛属植物束花石斛Dendrobium chrysanthumLindl.各部位的降血糖活性及活性部位的化学成分。方法采用胰岛素抵抗Hep G2细胞模型筛选束花石斛降血糖活性部位,并应用多种柱色谱及重结晶的方法对活性部位进行分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果加药质量浓度为2.0 mg/mL时,三氯甲烷部位的胰岛素抵抗Hep G2细胞葡萄糖消耗量达到了模型组的442.4%,细胞存活数为模型组的62.9%。从三氯甲烷部位分离并鉴定了10个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇（1）,moscatin（2）,对羟基反式肉桂酸三十烷基酯（3）,1,3,5-三甲氧基苯（4）,isonuatigentin（5）,香豆素（6）,2,4,7-三羟基-5-甲氧基-9-芴酮（7）,大黄素甲醚（8）,丁香酸（9）,胡萝卜苷（10）。结论综合考虑降血糖活性及对细胞的毒性,束花石斛三氯甲烷部位活性优于其他部位,其中化合物2～6、9为首次从该植物中分离得到,化合物4、5为首次从该属植物中分离得到。

云南药用植物束花石斛提取物的体外抗氧化活性研究

目的研究药用植物束花石斛提取物的体外抗氧化活性.方法采用DPPH自由基清除法对束花石斛提取物的体外自由基清除作用进行研究.结果束花石斛的乙醇粗提物、乙酸乙酯和正丁醇提取物活性较好,IC50分别为0.39,0.27,0.40 mg/mL.结论各提取部分均比芦丁(IC50=0.063 mg/mL)抗氧化活性弱.

束花石斛化学成分研究

目的对束花石斛三氯甲烷部位进行化学成分研究。方法采用硅胶柱层析、ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及重结晶等方法对束花石斛三氯甲烷部位进行分离纯化,并通过理化性质与核磁、质谱等光谱分析方法鉴定化合物的结构。结果分离鉴定出10个单体化合物,分别为纽替皂苷元-26-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、2,7-二羟基-4-甲氧基-9-芴酮(2)、dengibsinin(3)、chrysotoxone(4)、丁香醛(5)、对羟基苯甲醛(6)、香草酸(7)、三十一烷醇(8)、十六烷酸(9)、大黄酚(10)。结论化合物1为首次从石斛属植物中分离得到,也是首次在束花石斛中发现变形螺甾烷醇类甾体皂苷。

云南束花石斛的化学成分

目的研究云南束花石斛化学成分,发现其活性成分.方法束花石斛全草经溶剂提取、硅胶柱层析和Sephadex LH-20柱层析进行分离纯化,波谱分析(核磁共振氢谱、碳谱、和质谱)确定结构.结果从该药用植物分离并鉴定了8个化合物,分别为:(1)2,5-dihydroxy-4,9-dimethoxyphenanthrene;(2)2,7-dihydroxy-4-meth oxy-9,10-dihy-drophenanthrene;(3)2,7-dihydroxy-4-methoxyphenanthrene;(4)Moscatin;(5)Gigantol;(6)Batatasin III;(7)Tristin;(8)Stigmasterol.结论化合物2为首次从束花石斛中得到.

束花石斛快繁育苗技术的研究

目的 寻找束花石斛快繁育苗的有效途径。方法 采用组织培养和野生自然栖息的束花石斛诱导高位腋芽萌发等途径进行探索。结果 在组织培养中,改良1/2MS培养基的原球茎形成效果最好,调整不同浓度的N、P、K及外源激素对诱导束花石斛原球增殖、生根壮苗极为明显;外源激素对诱导束花石斛的高位腋芽萌发无明显效果,高位芽萌发与茎株生理年龄和营养状况有关。结论 人工种植束花石斛采用现代生物技术组培育苗和腋芽繁殖是目前快繁育苗的最有效途径,不仅育苗量大、周期短,且生长快、成活率高,两条途径对于束花石斛的产业化发展有重要意义。

黄草石斛的药源变迁

黄草石斛商品种类多,植物来源种类不断变化,先后有石斛属、金石斛属、石仙桃属、石豆兰属、毛兰属、贝母兰属及蜂腰兰属共计7属51种兰科植物作为黄草石斛使用,药源状况混乱。文章结合长期从事石斛生产的经验,通过开展广泛的市场调查研究及查阅文献资料,探讨了黄草石斛药源的变迁状况,以期为保护石斛野生资源,发展石斛产业提供科学依据。

束花石斛种子超低温保存的研究

以濒危兰科物种野生束花石斛(Dendrobium chrysanthum)的成熟种子为材料,研究了PVS2植物玻璃化液对其萌发的作用,以及快速冷冻法和玻璃化法对种子超低温保存的影响。结果表明,种子的萌发率随着PVS2处理时间的延长而下降。PVS2预处理能明显地增加种子的超低温耐性。当预处理时间为15～45min时,种子的超低温耐性随预处理时间的延长而增加;当预处理时间长于60min后,种子的超低温耐性随预处理时间的延长而下降。经液氮保存后,存活的种子能萌发成为正常的幼苗。结论是经PVS2预处理45min后,成熟的束花石斛种子能成功地进行超低温保存。

束花石斛中1个新的菲类化合物

目的研究束花石斛Dendrobium chrysanthum降血糖活性的氯仿部位中的菲类成分。方法采用Sephadex LH-20、半制备高效液相色谱等多种色谱及重结晶方法进行分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定结构。结果从束花石斛茎的氯仿部位中分离得到4个菲类化合物,分别鉴定为2,5-二羟基-4-甲氧基-9,10-二氢菲(1)、2,4-二羟基-5-甲氧基-9,10-二氢菲(2)、2,4,5-三羟基-9,10-二氢菲(3)、美花石斛酚A(4)。结论化合物2为新化合物,命名为束花石斛酚A;化合物1、3、4均为首次从束花石斛中分离得到。