细茎石斛多糖的降血糖活性作用

观察细茎石斛(Dendrobiummoniliforme(L.)Sw.)多糖对多种模型小鼠血糖水平的影响,探讨其降血糖作用机理.采用昆明种小鼠分组,分别以细茎石斛多糖(100mg·kg-1、200mg·kg-1)、格列苯脲片(50mg·kg-1)、盐酸苯乙双胍(50mg·kg-1)或生理盐水灌胃,测定各正常小鼠、肾上腺素性糖尿病和四氧嘧啶性糖尿病小鼠的血糖水平.结果100mg·kg-1、200mg·kg-1两个剂量的细茎石斛多糖均能显著降低肾上腺素、四氧嘧啶引起的糖尿病小鼠的血糖水平(p<0.01),提高四氧嘧啶性糖尿病小鼠的葡萄糖耐量(p<0.01),但对正常小鼠的血糖水平无影响.细茎石斛多糖具有明显的降血糖作用,是一种值得开发利用的降糖植物多糖.

细茎石斛多糖DMP4a-1的结构特性及免疫活性研究

目的研究从细茎石斛中分离纯化得到的酸性多糖DMP4a-1的结构性质,初步鉴定其免疫调节活性。方法 应用高效 凝胶渗透色谱(HPGPC),TLC,GC,GC．MS,IR,高碘酸氧化等方法进行组成结构分析,采用双抗夹心ELISA法检测巨噬细胞TNF-α 分泌水平、用CCK-8试剂进行脾淋巴细胞增殖实验。结果 细茎石斛水溶性酸性多糖DMP4a-1平均相对分子质量为3 049,主 要由葡萄糖,甘露糖,鼠李糖,阿拉伯糖和半乳糖组成,其分子摩尔数之比为2．873:2．850:1．762:1．279:l,糖链结构中存在1→ 4,1→3及1→6糖苷键,且摩尔数比为1．194:2．430:1。体外实验证明,DMP4a-1可明显刺激巨噬细胞分泌TNF-α,促进脾淋巴细 胞增殖。结论细茎石斛多糖DMP4a-1是一种β-D-吡喃杂多糖,在结构上与抗肿瘤多糖类似,富含1→3糖苷键,具有免疫增 强功能。

三种药用石斛多糖成分的比较研究

研究了细茎石斛、细叶石斛和铁皮石斛三种药用植物石斛在多糖质量分数、分布、组成以及分子相对质量大小上的差异.运用糖含量测定方法分析三种石斛不同部位的总多糖TPs(totalpolysaccharides)和水溶性多糖WPs(watersolublepolysaccharides),运用糖醛酸和蛋白质质量分数测定、离子交换柱色谱以及凝胶柱色谱方法分析WPs.分析表明,铁皮石斛TPs和WPs质量分数均为最高,细叶石斛WPs质量分数明显低于其他两种,三种石斛多糖在各部位分布情况存在差异;不同石斛的WPs的组成和分子相对质量大小也不同.分析证实,三种药用石斛在多糖质量分数、分布、组成及分子相对质量大小上具有明显差异.

霍山县3种石斛叶片光合特性及其对光强的响应

目的研究石斛的光合特性,了解其适宜栽种的光强。方法测定霍山县3种石斛(霍山石斛Dendrobiumhuoshanens,铁皮石斛D.candium,铜皮石斛D.moniliforme)的光合速率对光强响应曲线,不同光强处理时叶绿素荧光参数的变化及3.0×104lx瞬时光强下叶片荧光猝灭诱导。结果霍山县3种石斛属于阴生植物对光强的响应,光饱和点、光补偿点较低,净光合速率和表观量子效率都较低;大于4.0×104lx强光下石斛叶片受光抑制严重。结论霍山县3种石斛生长光强,一般为(0.2～2.0)×104lx;可以在(2.5～3.0)×104lx光强的环境中生长;不适宜在大于4.0×104lx光强的环境中生长。

柱前衍生化HPCE法测定不同种源石斛中多糖的单糖组成

目的:采用PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)柱前衍生化-HPCE法测定多糖的单糖组成,探讨不同种源霍山石斛、铜皮石斛及野生河南石斛药效物质基础的相似性。方法:采用石英毛细管柱(100 cm×50μm),350mmol/L硼酸溶液(以1.0 mol/L Na OH溶液调至p H 10)为缓冲液,运行电压20 k V,柱温为25℃,检测波长250 nm,运行时间34 min。结果:5种石斛样品共检出木糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖、半乳糖醛酸和核糖6种单糖。相似度评价显示,同一种源石斛样品10个批次间的相似度均在0.98以上,但不同种源的霍山石斛、铜皮石斛及野生河南石斛单糖组成及含量明显不同。结论:多糖部位PMP柱前衍生化-HPCE法具有简单、快速、准确、重现性好等优点,为不同种源的霍山石斛、铜皮石斛与野生河南石斛的定性鉴别及药材内在质量评价提供新的参考依据。

细茎石斛内生和根围细菌多样性及促生能力分析

对采自湖北省英山县的细茎石斛〔Dendrobium moniliforme(Linn.)Sw.〕根、茎和叶中的内生细菌及其根围苔藓内生细菌和根围土壤细菌进行分离,并采用扩增核糖体DNA限制性酶切分析(ARDRA)与UPGMA聚类分析相结合的方法对这些细菌菌株进行鉴定和多样性分析;在此基础上,采用平板检测技术测定了这些细菌菌株的解磷、解钾、产生长素和嗜铁素的能力。结果显示:从细茎石斛根和茎以及根围苔藓和根围土壤中共分离获得75株细菌菌株,从叶中未分离出内生细菌。其中,源自根和茎的内生细菌菌株分别为14和7株;源自根围苔藓的内生细菌菌株偏少,仅14株;源自根围土壤的细菌菌株最多,达到40株。75株菌株可被分成33个ARDRA簇,通过16S r DNA序列测定及比对,它们分别隶属于链霉菌属(Streptomyces)、芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、拉恩氏菌属(Rahnella)、潘多拉菌属(Pandoraea)、微杆菌属(Microbacterium)、赖氨酸芽孢杆菌属(Lysinibacillus)和泛菌属(Pantoea),其中芽孢杆菌属和假单胞菌属为优势属。在75株内生和根围细菌中,有22株菌株兼具解无机磷和有机磷的能力、25株菌株具有解钾能力、64株菌株具有产生长素能力、39株菌株具有产嗜铁素能力,其中有9株菌株兼具解磷、解钾、产生长素和嗜铁素的能力。总体上看,细茎石斛的内生和根围细菌数量多且多样性较高,其中9株兼具4种促生潜力的菌株可作为促进细茎石斛生长的候选菌株。

铜皮石斛花挥发性成分的GC-MS分析

目的:研究细茎石斛花中的挥发性成分。方法:水蒸气蒸馏法提取挥发油,用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法进行成分分析,结合计算机检索对分离的化合物进行结构鉴定。结果:分离出41个色谱峰,鉴定出29个化合物,占79.05%。其中相对含量大于2.0%的有:2,4,4三甲基-二戊烯(11.17%)、5,5-二甲基-2-己烯(11.12%)、β-石竹烯(6.47%)、异土木香内酯(5.95%)、邻苯二甲酸二乙酯(4.70%)、1,3,3二甲基丁烯-1,1-二苯基(5.20%)、2,2,4三甲基-1-戊醇(4.23%)、2-甲基-N-苯基-2-丙烯(2.73%)、3-甲基丁醛(2.12%)、异长叶烯(2.03%)等。结论:应用气相色谱-质谱联用技术对细茎石斛花挥发性成分进行的分析研究表明,烯、醛、酯和醇类等挥发油成分构成了细茎石斛花的芳香特征,与铁皮石斛花的挥发油成分组成差异较大。

细茎石斛无菌萌发与快速繁殖

以细茎石斛八成熟蒴果为外植体,通过对其种子无菌萌发、继代增殖及生根壮苗培养基的筛选,建立了细茎石斛离体快繁技术体系。结果表明:细茎石斛八成熟蒴果里的种子接种到无菌萌发培养基上,30~60d后,长成顶端有绿色叶原基的原球茎;6-BA和KT2种细胞分裂素对细茎石斛无菌苗的增殖培养效果,以6-BA的增殖效果较好,其推荐的浓度为0.50mg/L,增殖系数高达11.40;NAA对无菌苗生根壮苗培养的效果明显优于IBA;NAA的最佳浓度为4.00mg/L。

GC-MS法检测云南产细茎石斛花中挥发性成分

利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)方法研究细茎石斛花挥发性化学成分,为细茎石斛花茶质控标准以及与其他石斛花区分提供科学依据。采用正己烷回流法从云南产细茎石斛花中提取挥发性成分,并用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对其化学成分进行分析鉴定。结果表明:分离出了91个色谱峰,鉴定出72个化合物。其中相对含量较高的有二十一烷(38.957%)、二十三烷(13.558%)、二十二烷(5.245%)、2-十七烷酮(2.072%)等。云南产细茎石斛花的挥发油中主要化学成分包括烷烃、烯烃、醇、酮、酸、酯、酚等,其中长链烷烃含量最多,该研究为对云南产细茎石斛的进一步开发应用提供理论依据。

霍山产铜皮石斛多糖含量测定及其卤虫毒活性研究

基于正交试验探究提取次数、料液比、提取时间及温度对多糖提取的影响。以卤虫的校正死亡率及LD_(50)值评价铜皮石斛多糖的卤虫毒活性。实验结果显示,对铜皮石斛多糖提取的影响因素从小到大依次为:提取次数<料液比<提取时间<温度,最佳提取条件为料液比1∶40、提取2 h、浸提温度60℃、提取3次。铜皮石斛多糖卤虫毒活性研究表明,在4 h、8 h和12 h的LD_(50)值分别为1.03、0.66和0.38 mg/m L,相同给药时间内,多糖对卤虫毒性的强弱随浓度的增高而增高,表现出明显的量效关系。在最优提取条件下测得霍山产铜皮石斛多糖含量为25.24%;铜皮石斛多糖具有显著的卤虫毒活性。

霍山石斛薄层鉴别研究

[目的]研究霍山石斛薄层鉴别方法,为霍山石斛质量标准的制定提供依据。[方法]采用薄层色谱法对霍山石斛、铁皮石斛、细茎石斛、河南石斛进行定性鉴别。[结果]霍山石斛能明显地区别于铁皮石斛、细茎石斛及河南石斛。[结论]已确定的薄层鉴别方法操作简单、可靠、专属性强,可以用于霍山石斛的薄层鉴别。

细茎石斛中1种中性多糖的纯化与结构分析

目的研究从细茎石斛Dendrobium moniliforme中得到的中性多糖DMP2-A的化学结构和在水溶液中的构象。方法利用单糖组分分析、甲基化分析、红外光谱(IR)、尺寸排除色谱-激光光散射仪联用等方法分析其结构特征和溶液构象。结果 DMP2-A由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖组成,其中木糖残基主要以1-链接的末端糖存在;葡萄糖残基链接方式为1,3-链接、1,4-链接和1,3,6-链接;半乳糖残基链接方式为1,3-链接、1,4-链接和1,3,6-链接;阿拉伯糖残基以1,3,5-链接;甘露糖残基以1,3,6-链接。该多糖在0.15 mol/L的Na NO3水溶液中重均相对分子质量为1.07×104,存在少量聚集体,聚集数约为38。结论 DMP2-A为多分枝、结构复杂的多糖,其化学结构及在水溶液中的聚集形态为首次报道。