石斛兰Dendrobium formosum Roxb.ex Lindl.幼苗培养基研究

实验旨在为石斛兰Dendrobiumformosum的幼苗寻找易于配制的简单培养基。使用兰花专用肥20-20-20,21-21-21。在实验中改良Vacin-Went培养基(Vacin,E.andWent,F1922)和1/2Vacin-Went培养基被用作参照。经过150d无菌培养后结果显示在某种程度上,肥料浓度为1g/l的21-21-21和20-20-20的培养基对兰花幼苗的生长影响相同,并且,它们可以替代Vacin-Went和1/2Vacin-Went培养基,从而使培养基的制备更加方便。

3种石斛药材中奇数碳脂肪酸组成差异

目的:研究3种石斛奇数碳脂肪酸(OCFA)成分及其含量。方法:采用气相色谱—质谱法(GC-MS)分析不同地区的金钗石斛、铁皮石斛、鼓槌石斛3种石斛的脂肪酸组成。结果:OCFA占细胞中总脂肪酸的8%,占总脂肪酸的相对丰度百分比从高到低依次为C_(15:0)、C_(17:0)、C_(23:0)、C_(19:0)、C_(21:0)。金钗石斛和铁皮石斛中C_(15:0)和C_(17:0)相对丰度的比值(C_(15:0)/C_(17:0))分别<1.6,>1.8,表明含有系列OCFA是兰科植物的共性。结论:植物中OCFA的存在可能与其药物活性具有相关性。

濒危石斛兰开花与授粉生物学特性研究

研究了14个石斛兰野生原种的开花特性与部分野生种的自交亲和力,结果表明:石斛兰不同种间单朵花期长短差异较大、为8～34 d不等,其中有4个种的单朵花期超过21 d;多数野生种的温室群体花期比原生地提前1～2个月,最早可提前到1月份;14个原种的平均单朵花期和显蕾期均为18 d,其中石斛兰的显蕾期较长;开花期间对6个石斛兰野生种进行自交,结果多数株间自交结实率高于株内自交,如鼓槌石斛和兜唇石斛的株间自花授粉结实率均超过80%,并显示,大苞鞘石斛的自交亲和力高、晶帽石斛的自交亲和力低。

兰科菌根真菌对石斛组培苗的接种效应

从野生球花石斛(Dendrobium thyrsiflorum)根系中分离到Dt1、Dt2、Dt5、Dt6、Dt7、Dt8 共6株真菌,将其接种到铁皮石斛(Dendrobium candidum)和球花石斛组培苗的根系上,定期测定石斛苗的株数、株高、叶数、新芽数等指标,并与不接种的石斛苗进行比较。试验结果表明,Dt5号和Dt8号真菌的接种效果最好,地上植株和地下根系生长均良好,株数增多、株高增加、落叶减少,新芽和新根萌发,因此它们对于石斛组培苗的成功栽培具有实际应用价值。

共生真菌对铁皮石斛幼苗生理特性的影响

以铁皮石斛(Dendrobium catenatum)无菌组培苗为材料,接种C20、C22、C35、C42这4株真菌菌株。共生培养60 d后,研究真菌对组培苗的平均鲜重增长率、营养元素、叶绿素和内源激素的影响。结果表明:(1)接菌组培苗的营养根重分离获得原接种菌株;(2)接菌组培苗的平均鲜重增长率,叶绿素a、b含量和营养元素N、P、K含量均高于对照;(3)接菌组培苗的GA3和IAA含量均高于对照,ABA含量低于对照。其中,接种C42的组培苗平均鲜重增长率和叶绿素a含量达极显著差异(p<0.01),接种C22和C35组培苗的平均鲜重增长率和叶绿素a含量达到显著差异(p<0.05),接种C20和C42的组培苗K含量达显著性差异,接种C20、C35、C42的组培苗IAA含量极显著地高于对照,接菌组培苗的N含量和GA3含量均达极显著差异,而接菌组培苗的ABA含量极显著地低于对照。因此,这4株真菌菌株可应用于铁皮石斛等兰科植物的栽培与生产中。

菌根真菌─新种─—石斛小菇(英文)

从云南省野生铁皮石斛（Dendrobiumcandidumwall．ExLindl．）根中分离出一菌根真菌，经系统形态学研究后，将其鉴定为小菇属（Mycena）一新种：石斛小菇（Mycenadendrobii）。标本保藏在中国科学院微生物研究所菌物标本室（HMAS）。用石斛小菇伴播12种兰科植物种子，实验结果表明该真菌对天麻（Gastrodiaelata）和密花石斛（Dendrobiumdensdlorum）种子萌发有明显促进作用。

美花石斛菌根真菌接菌方式与接种效应初步研究

自然条件下,兰科菌根真菌的共生对于兰科植物种子萌芽和植株生长是必不可少的。为探讨有益共生真菌对兰科植物生长的促进作用,特别是在实验室环境下接菌方式的改变与接种效应直接的联系,本研究从野生美花石斛(Dendrobium loddigesii Rolfe.)新鲜营养根中分离、筛选出3种菌根真菌(M1、M2和M3),采用单一接菌和混合接菌的接种方式,分析3个菌株及其不同接种方式对美花石斛生长的影响。研究得到优势菌株M1和M3,并证实混合接菌对美花石斛的生物量增长具有较好的正效应,两两混合接种方式M1-M2、M2-M3及3个混合接种方式M1-M2-M3均能较好的促进美花石斛生物量的积累。充分发挥混合接菌对兰科植物生长发育所产生的效能,提高生产效率,具有较强的现实意义。

3种热带兰感染2种病毒的症状探讨

建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)和齿兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,ORSV)是危害海南兰花最普遍的2种病毒。CymMV侵染蝴蝶兰后引发黄化斑、坏疽凹陷斑、畸形生长等多种症状;侵染石斛兰引发花叶、黄化斑、全叶黄化或红化、契形坏死、疱状突出等症状;侵染文心兰引发花叶、黄化、坏死、畸形生长等症状。ORSV的症状种类则相对简单,蝴蝶兰上引发环斑、系统性黄化、凹陷坏死、疱状突出等症状;文心兰上主要表现花叶;石斛兰上未检测到ORSV。

兰花新入侵害虫康瘿蚊的形态特征、分布危害及防控

【目的】研究兰花新入侵害虫康瘿蚊的形态特征及分布危害特点，为其防控提供参考。【方法】通过田间观察康瘿蚊的危害特点，并采集虫样于室内饲养，在体视显微镜及解剖镜下观察其形态特征。【结果】康瘿蚊雌成虫体长1.2-1.7 mm，雄虫略小；复眼位于头顶，由10个小眼面组成；前翅长1.2-1.5 mm，半透明，后翅特化为平衡棒；雄虫阳茎顶端尖，向外延伸，超出肛下板，雌虫产卵器较长,长度大于腹部的1/2。老熟幼虫长可达2.2 mm，白色至淡黄色，蛆状。蛹为被蛹，长约1.2 mm，椭圆形。目前已记录康瘿蚊寄主植物共10科22种，已知分布危害地区有：中国（台湾）、泰国、新加坡、菲律宾、日本、柬埔寨、越南、美国、澳大利亚等。康瘿蚊雌虫通常将卵产于植株顶端幼嫩的花苞上，造成花苞畸形、变色、褪色等，使花苞不能正常开放而脱落。【建议】加强检疫，避免康瘿蚊通过切花等传入我国其他省（市）；对已发生康瘿蚊危害地区应采取农业、物理和化学防治等措施控制其种群密度，避免其扩散传播。

兰花在全球花卉贸易中的地位及发展动态

近年来飞速发展的兰花产业,成为中国花卉业的重要组分,但发展中存在着一定的盲目性。基于此,有必要借鉴已趋成熟的国际兰花产业的发展经验和思路,以获悉不同种类兰花的适宜发展份额,剖析中国兰产业发展思路和国际发展空间,有助于指导兰花产业的发展。该文研究了近年全球兰花切花、盆花的进、出口贸易及主要进、出口国家的兰生产、消费情况,对其产量、面积、贸易额等进行了分析。结果表明蝴蝶兰、大花蕙兰、石斛兰等兰花为主要的贸易种类,其中,仅蝴蝶兰2005年全球消费量已达1.5亿株。主要的生产和出口国(地区),石斛兰和万代兰是泰国,蝴蝶兰是中国台湾;世界兰花切花、盆花的最大出口国和地区分别是泰国、台湾;兰花切花的最大进口和消费国是日本;兰花盆花的最大进口国是美国;马来西亚、新加坡、新西兰等国家主要发展兰花切花。通过回顾兰花进出口大国的生产、贸易、销售状况,理清了国际兰花的发展和趋势,同时对中国兰产业的发展有借鉴和启迪作用。

硝酸镧和兰科菌根真菌对铁皮石斛生理特性的影响

利用盆栽的方式研究了不同硝酸镧水平(0、1.0、3.0、5.0和7.0mg·L-1)下接种兰科菌根真菌对铁皮石斛生物量、多糖和蛋白质合成的影响,并分析了叶绿素含量、丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性的变化,以探讨硝酸镧和兰科菌根真菌对铁皮石斛生理特性的影响。结果表明:(1)添加适量的硝酸镧有利于菌根真菌侵染和菌根发育,提高铁皮石斛幼苗生物量。(2)在接种菌根真菌的同时添加5.0mg·L-1的硝酸镧,铁皮石斛的根重、茎叶重和总生物量均达到最大,分别是未添加硝酸镧以及未接种对照组的4.26倍、4.98倍和4.87倍,其菌根侵染率也高达92.8%;而且可显著提高叶片中叶绿素含量,并显著降低细胞内的丙二醛含量。(3)在适量(5.0mg·L-1)的硝酸镧水平下接种菌根真菌能促进铁皮石斛幼苗多糖和蛋白质的合成,并显著提高细胞内SOD、CAT和POD活性。研究认为,菌根真菌与适宜浓度硝酸镧(5.0 mg·L-1)联合使用能显著促进铁皮石斛菌根的形成,增强植株的生理活性和适应能力,提高其生物量和多糖等活性成分的积累,有效改善铁皮石斛的药用品质。

石斛兰的组织培养

[目的]研究适合石斛兰叶片愈伤组织的诱导、茎段腋芽的诱导、根系的诱导、增殖的培养基、生长调节剂的种类及浓度。[方法]设置5种叶片愈伤组织诱导培养基,3种茎段腋芽诱导培养基,3种根系诱导培养基,在温度为25℃,光照12h,光照强度2000lx进行培养。[结果]6-BA对石斛兰叶片愈伤的诱导有一定的抑制作用,较高浓度的2,4-D有利于叶片愈伤组织的诱导;MS+6-BA4.0mg/L+NAA1.0mg/L是茎段腋芽诱导最理想的培养基;添加2.0mg/L肌醇和10%的香蕉汁均能促进根系的诱导,后者的效果更明显。[结论]以容易获得的石斛兰幼嫩茎段为外植体材料研究了石斛兰的组织快繁,为石斛兰的快速繁殖提供了可行途径。

濒危石斛兰野生原种的迁地保护与引种驯化

总结了连续几年的石斛兰引种与驯化实践,探讨了石斛兰生长习性与栽培措施的特殊性,对其抗寒、耐旱及繁殖特性及对应的管理方法进行了阐述。

石斛兰多样性利用及保护现状

我国石斛兰资源多样性丰富,中国植物志收录了76种石斛兰(包括2个变种),本文通过回顾石斛兰种质利用情况及保护的现状,探讨了保护区内石斛兰濒危的主要原因,并提出了对石斛兰资源的保护和可持续利用的建议。

4种观赏石斛在四川成都及峨眉山地区的引种适应性研究

石斛兰具有极高的观赏价值。本研究以从云南引种的4种观赏石斛为试验材料,对其在四川两个引种地的生物学特性和适应性进行了研究。结果表明,引种取得初步成功,两个引种地中4种石斛均能正常生长和开花;成都引种区内的石斛长势优于峨眉山地区;鼓槌石斛成活率最高,适应性最强。

美花石斛组培苗菌根化中共生条件优化研究

兰科植物菌根真菌多样性很丰富,在植物不同的生长阶段能够促进其达到最佳生长状态的菌株种类和数量均不同。本试验通过对培养袋内的无菌组培苗进行接菌条件优化,以期寻找用最适真菌在最适的时间内与美花石斛组培苗共生培养的最佳菌株组合方式。结果表明:菌株F24b、B14、F25对原球茎小苗效果表现较好,且壮苗植株接菌处理在共生培养10周时鲜重增长率较不接菌效果显著;而生根植株接菌处理在共生培养7周时鲜重增长率较不接菌均有不同程度的提高。研究结果对提高种苗质量,提高石斛栽培中生产效率都有较大的实际意义。

石斛叶片蛋白质双向电泳技术体系的建立及优化

以石斛叶片为材料,建立了一套适用于石斛蛋白质组分析的双向电泳体系,探讨了石斛叶片蛋白的提取、蛋白定量以及双向电泳的一些关键技术。结果表明,通过三氯乙酸(TCA)法提取、高压等电聚焦和两步平衡等方法可以获得稳定、清晰的双向电泳图谱,获得了可分辨蛋白质斑点数约613个。

华石斛原生境条件下人工播种的初步探讨

由于人为的采挖和原生境的破坏,华石斛野生资源受到严重威胁。因此,保护华石斛野生资源及其生境,加快野生植株的繁殖显得非常重要。该研究以华石斛种子为材料,分别于7月和9月,播种于不同的附生宿主树种(毛绵杜鹃,竹叶松,碎叶蒲桃,大叶布拉栎和大果马蹄荷),并监测其种子萌发的状况。研究结果表明:(1)华石斛种子对附生树种有一定的选择性。人工播种的毛绵杜鹃上均有原球茎萌发,萌发率达到100%,平均每株树萌发14.71个原球茎。竹叶松和碎叶蒲桃上的原球茎数增加的差异不明显,对照大叶布拉栎和大果马蹄荷则没有原球茎萌发。(2)播种时间影响华石斛种子萌发与原球茎的形成。7月份播种的毛绵杜鹃和竹叶松,原球茎萌发数较多;9月份播种的碎叶蒲桃上萌发的原球茎远远高于毛绵杜鹃和竹叶松上,达到为4.5个/株。该实验结果暗示雨季可能是华石斛播种的最佳时期。此外,人工播种树上萌发的原球茎基本集中在华石斛植株上方30cm至下方40cm的范围内,这为今后播种位置的选择提供了依据。

The Genome of Dendrobium officinale Illuminates the Biology of the Important Traditional Chinese Orchid Herb

Dendrobium officinale Kimura et Migo is a traditional Chinese orchid herb that has both ornamental value and a broad range of therapeutic effects. Here, we report the first de novo assembled 1.35 Gb genome se- quences for D. officinale by combining the second-generation Illumina Hiseq 2000 and third-generation PacBio sequencing technologies. We found that orchids have a complete inflorescence gene set and have some specific inflorescence genes. We observed gene expansion in gene families related to fungus symbiosis and drought resistance. We analyzed biosynthesis pathways of medicinal components of D. officinale and found extensive duplication of SPS and SuSy genes, which are related to polysaccharide generation, and that the pathway of D. officinale alkaloid synthesis could be extended to generate 16- epivellosimine. The D. officinale genome assembly demonstrates a new approach to deciphering large complex genomes and, as an important orchid species and a traditional Chinese medicine, the D. officinale genome will facilitate future research on the evolution of orchid plants, as well as the study of medicinal components and potential genetic breeding of the dendrobe.

兰科菌根真菌对干旱胁迫下铁皮石斛生长和抗氧化能力及相关基因表达的影响

利用盆栽的方式研究了干旱胁迫下接种兰科菌根真菌(OM)对铁皮石斛生长的影响,并分析了铁皮石斛叶片相对含水量、游离脯氨酸含量、电解质渗透率、丙二醛(MDA)含量、活性氧成分、抗氧化酶活性变化,用定量PCR技术分析了相关抗氧化酶基因的表达特性,以探讨菌根真菌对铁皮石斛干旱胁迫的缓解作用及其机制。结果表明:(1)与正常水分条件相比,干旱胁迫显著降低了铁皮石斛幼苗的生物量和叶片相对含水量,提高了叶片电解质渗透率、脯氨酸含量、MDA含量、O-·2产生速率和H2O2水平。(2)菌根真菌能显著提高干旱胁迫下铁皮石斛叶片相对含水量,降低叶片电解质渗透率、脯氨酸含量、MDA含量、O-·2产生速率和H2O2水平;在不同水分条件下,菌根真菌均能有效促进铁皮石斛幼苗生长,其株高、根重、茎叶重和总生物量均大于未接种组。(3)菌根真菌可诱导干旱胁迫下铁皮石斛超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)基因的表达,提高SOD、POD和CAT的活性,有效缓解干旱胁迫对质膜的过氧化伤害。研究认为,菌根真菌能提高干旱胁迫下铁皮石斛的抗氧化酶活性及其相关基因表达水平,增强铁皮石斛抗氧化防御能力,有效缓解干旱胁迫对铁皮石斛幼苗生长的抑制。