血清 microRNA-155、microRNA-23b-3p、 microRNA-16-5p与难治性肺炎支原体肺炎 患儿病情严重程度及预后的关系

目的探讨血清microRNA-155(miR-155)、microRNA-23b-3p(miR-23b-3p)、microRNA-16-5p(miR-16-5p)水平与难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)患儿病情严重程度及预后的关系。方法前瞻性选取2023年6月—2023年12月杭州市儿童医院收治的101例RMPP患儿为研究对象,收集治疗前血清miR-155、miR-23b-3p、miR-16-5p水平。根据病情严重程度将患儿分为重症组39例与轻症组62例。所有患儿自治疗起随访1个月,根据治疗效果将患儿分为预后不良组22例与预后良好组79例。分析不同病情严重程度及不同预后RMPP患儿血清miR-155、miR-23b-3p、miR-16-5p水平;采用多因素逐步Logistic回归模型分析影响RMPP患儿预后的因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-155、miR-23b-3p、miR-16-5p预测RMPP患儿预后的价值。结果重症组患儿血清miR-155基因相对表达量高于轻症组(P<0.05),miR-23b-3p、miR-16-5p基因相对表达量均低于轻症组(P<0.05)。预后不良组患儿血清miR-155基因相对表达量高于预后良好组(P<0.05),miR-23b-3p、miR-16-5p基因相对表达量均低于预后良好组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,儿童器官功能障碍评分2(PELOD-2)[O^R=5.129(95%CI:2.111,12.466)]、miR-155[O^R=3.924(95%CI:1.614,9.535)]、miR-23b-3p[O^R=3.850(95%CI:1.584,9.356)]、miR-16-5p[O^R=3.777(95%CI:1.554,9.179)]是影响RMPP患儿预后的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-155、miR-23b-3p、miR-16-5p及三者联合预测RMPP患儿预后的敏感性分别为63.64%(95%CI:0.408,0.820)、72.73%(95%CI:0.496,0.884)、68.18%(95%CI:0.451,0.853)、86.36%(95%CI:0.640,0.964),特异性分别为70.89%(95%CI:0.594,0.803)、78.48%(95%CI:0.675,0.866)、72.15%(95%CI:0.608,0.814)、91.14%(95%CI:0.820,0.961),曲线下面积分别为0.725(95%CI:0.622,0.827)、0.718(95%CI:0.604,0.831)、0.710(95%CI:0.591,0.829)、0.923(95%CI:0.866,0.980)。结论血清miR-155、miR-23b-3p、miR-16-5p水平与RMPP患儿病情严重程度及预后有关,三者联合预测RMPP患儿的效能良好。

心脏超声斑点成像联合microRNA-16-5p、microRNA-206诊断非ST段抬高型急性心肌梗死的价值及与疾病严重程度的相关性

目的 探讨心脏超声斑点成像技术联合microRNA-16-5p(miR-16-5p)、microRNA-206(miR-206)诊断非ST段抬高型急性心肌梗死(NSTEMI)的价值及与疾病严重程度的相关性。方法 选取2020年1月—2023年12月延安大学咸阳医院收治的102例NSTEMI患者为研究对象,根据全球急性冠状动脉事件登记风险评分体系将患者分为低风险组(55例)、中风险组(32例)及高风险组(15例)。测定并比较3组心脏超声斑点成像参数、血清miR-16-5p和miR-206水平,并采用Spearman法分析其与疾病严重程度的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价心脏超声斑点成像参数联合miR-16-5p和miR-206在疾病严重程度评估中的诊断效能。结果 中风险组和高风险组的整体长轴收缩期峰值应变(GLS)、整体圆周收缩期峰值应变(GCS)、整体径向收缩期峰值应变(GRS)、整体面积收缩期峰值应变(GAS)、GAS变化率(GAS rate)及三维左心室整体应变(3D-Strain)参数比较,差异均有统计学意义(P <0.05)。中风险组和高风险组的GLS、GCS、GAS、GAS rate参数的绝对值均低于低风险组,GRS和3D-Strain参数低于低风险组(P <0.05);高风险组的GLS、GCS、GAS、GAS rate参数的绝对值低于中风险组,GRS和3D-Strain参数低于低风险组(P <0.05)。中风险组和高风险组血清miR-16-5p mRNA相对表达量均高于低风险组(P <0.05),高风险组血清miR-16-5p mRNA相对表达量高于中风险组(P <0.05);中风险组和高风险组血清miR-206 mRNA相对表达量均低于低风险组(P <0.05),高风险组血清miR-206 mRNA相对表达量低于中风险组(P <0.05)。Spearman相关性分析结果显示,疾病严重程度与miR-16-5p、GLS、GAS、GCS、GAS rate均呈正相关(rs=0.688、0.842、0.506、0.801和0.227,P=0.000、0.000、0.000、0.000和0.021),疾病严重程度与miR-206、GRS、3D-Strain均呈负相关(rs=-0.615、-0.815和-0.860,均P=0.000)。ROC曲线分析结果显示,心脏超声斑点成像参数联合miR-16-5p和miR-206在诊断NSTEMI患者疾病严重程度方面具有较好的准确性,曲线下面积为0.971(95%CI:0.927,1.000),敏感性为93.3%(95%CI:0.807,1.000);特异性为96.9%(95%CI:0.908,1.000)。结论 心脏超声斑点成像联合miR-16-5p和miR-206可作为评估NSTEMI患者疾病严重程度的有效诊断生物标志物,为临床提供新的诊断工具。

MicroRNA-16-5p和血管内皮生长因子与糖尿病微血管病变的相关性研究

目的探讨血清MicroRNA-16-5p(miR-16-5p)和血管内皮生长因子(VEGF)与糖尿病微血管病变(DMVC)的相关性.方法选取2021年6月至2023年6月收治的2型糖尿病(T2DM)患者作为研究对象,根据是否合并微血管病变分为单纯糖尿病(DM)的DM组(n=20)和发生微血管病变的DMVC组(n=51).同时选取同期健康体检者作为阴性对照(NC)组(n=20).统计临床资料,比较各组生化指标,qRT-PCR检测各组血清miR-16-5p的表达以及ELISA试剂盒检测各组血清VEGF的表达.分析糖尿病患者发生微血管病变的危险因素.结果DM组和DMVC组的DBP、FBG、LDL-C和HbA1c水平高于NC组(P<0.05),DMVC组的BMI、SBP和TG水平高于NC组(P<0.05).DMVC组血清miR-16-5p水平低于NC和DM组,血清VEGF水平高于NC和DM组,差异有统计学意义(P<0.05).Pearson相关分析显示血清miR-16-5p表达与VEGF呈负相关(P<0.05).logistic回归分析显示VEGF和miR-16-5p表达是糖尿病患者发生微血管病变的影响因素,ROC曲线分析显示血清miR-16-5p、VEGF及两者联合预测糖尿病患者发生微血管病变的曲线下面积(AUC)分别为0.841、0.702和0.837.结论血清miR-16-5p表达降低与糖尿病的发生发展有关,是发生微血管病变的危险因素,miR-16-5p和VEGF可作为预测糖尿病患者发生微血管病变的潜在生物学标志物.

基于16S rRNA基因测序技术分析原发性胆汁性胆管炎伴抑郁小鼠粪便样本中肠道菌群的变化

背景:肠道菌群失调或紊乱与脑和肝脏疾病之间存在联系,肠道菌群可能通过肠⁃肝⁃脑轴影响原发性胆汁性胆管炎(PBC)和抑郁的发生和发展。目的:应用16S rRNA基因测序技术分析PBC伴抑郁小鼠的肠道菌群情况。方法:将12只雌性小鼠随机分为对照组、胆汁淤积组、胆汁淤积+抑郁组和治疗组。对照组小鼠给予正常饲料和水喂养;胆汁淤积组小鼠采用含0.1%DDC的饲料连续喂养2周构建胆汁淤积模型;胆汁淤积+抑郁组小鼠先采用慢性温和不可预期应激方式刺激2周,再以含0.1%DDC的饲料喂养2周构建胆汁淤积+抑郁模型;治疗组小鼠在构建胆汁淤积+抑郁模型的基础上,腹腔注射盐酸氯米帕明(7.5 mg·kg^(-1)·d^(-1))2周。造模期间观察小鼠的行为学变化。造模结束后各组小鼠称重,行负重游泳试验、强迫游泳试验、悬尾试验和肝组织HE染色;采集新鲜粪便,基于16S rRNA基因测序技术分析小鼠肠道菌群的变化。结果:与对照组相比,胆汁淤积组和胆汁淤积+抑郁组小鼠体质量明显减轻(P<0.05),抑郁样行为明显加重(P<0.05);与胆汁淤积+抑郁组相比,治疗组小鼠体质量明显升高(P<0.05),抑郁样行为明显减轻(P<0.05)。胆汁淤积组、胆汁淤积+抑郁组和治疗组小鼠肝组织出现不同程度的胆汁淤积性损伤;与胆汁淤积+抑郁组相比,治疗组肝脏病理损伤明显减轻。小鼠粪便样本经测序抽平处理后获得个5491个操作分类单元(OTU),4组共有的OTU为162个。对照组与胆汁淤积组、胆汁淤积+抑郁组和治疗组小鼠粪便中微生物多样性和群落组成存在较大差异。在门水平上,胆汁淤积组厚壁菌门(Firmicutes)丰度明显升高;胆汁淤积+抑郁组变形菌门(Proteobacteria)丰度明显升高;治疗组厚壁菌门和变形菌门丰度均明显升高,拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度明显下降。对组间差异显著的物种行LEfSe分析发现,LDA值>4的微生物类群有38个。结论:PBC伴抑郁小鼠的肠道菌群结构和多样性均发生显著变化,抗抑郁治疗能改善肠道菌群的丰度和多样性,通过调节肠道菌群治疗PBC伴抑郁有可能成为一种新的治疗策略。

抑郁症患者治疗前血浆microRNA-16、microRNA-195表达水平研究

目前我国抑郁症患病率为1.6%,终身患病率为3.3%～。世界卫生组织曾报道,在全球范围内,共有超过3.5亿人患有抑郁症,遍布各个年龄组。它以情绪低落、思维迟缓、意志活动减退和躯体症状为主要表现。抑郁症发病机制仍不明确,与遗传因素、生物学因素和心理社会因素相关。

姜黄素通过调控microRNA-7641及其靶基因p16抑制膀胱癌T24细胞增殖的机制研究

目的确定可能导致膀胱癌的mi RNAs,并研究其在姜黄素抗癌作用中的机制。方法对T24和SV-HUC-1细胞进行了芯片测序和q PCR分析。检测mi R-7641在含姜黄素或不含姜黄素的T24和SVHUC-1细胞株中的潜在致瘤性。并使用蛋白质印迹分析p16是mi R-7641在T24细胞中作用的重要靶基因。结果姜黄素诱导mi R-7641的表达下调及p16的上调,而p16是mi R-7641的转录后水平靶点之一,从而导致膀胱癌细胞凋亡增加。结论研究表明姜黄素可能是治疗无肌肉浸润性膀胱癌的临床治疗的潜在有效药物。

microRNA-16在脂肪基质细胞脂向分化过程中的表达变化

背景:触发和控制脂肪基质细胞脂向分化的调控研究将有助于人为控制脂肪基质细胞的分化方向,促进对细胞分化的深入了解。目的:了解脂肪基质细胞脂向分化过程中microRNA-16的表达变化情况。设计、时间及地点:观察对比试验,2007-10/2008-03在四川大学口腔疾病研究国家重点实验室完成。材料:出生30d雄性体健SD幼鼠8只。成脂诱导培养液[DMEM培养液中加入地塞米松(1μmol/L)、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(0.5mmol/L)、胰岛素(10mg/L)]。方法:从SD幼鼠体内取出脂肪,采用密度梯度离心结合贴壁培养法获得了纯度高的脂肪基质细胞,采用脂向诱导液对第3代的脂肪基质细胞进行诱导培养,并以未诱导的细胞为对照。主要观察指标:应用microRNA芯片技术检测脂肪基质细胞脂向诱导后7d和未诱导microRNA-16的表达差异。采用实时定量PCR检测microRNA-16在脂肪基质细胞脂向分化前后表达量变化。结果:①成功获得纯度较高的脂肪基质细胞,成功诱导其脂向分化,诱导培养后7d观察到细胞形态学上表现出典型的脂肪细胞改变:细胞相互融合,成片生长,变为细长纺锤形;PPARγ免疫细胞化学染色呈阳性;油红O染色脂滴被染成橙红色。②成脂诱导前后microRNA-16表达明显下调,诱导前microRNA-16表达量为90.25。诱导后microRNA-16表达量为56.75,③实时定量PCR结果显示microRNA-16表达显著下调,与microRNA芯片结果一致。结论:PCR及芯片结果一致支持microRNA-16在脂肪基质细胞脂向分化过程中表达显著下调,可能在脂肪基质细胞脂向分化过程参与调控。

MicroRNA-16对类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞增殖、侵袭及细胞因子分泌的影响

目的:研究microRNA-16(miR-16)对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者滑膜成纤维细胞(rheumatoid arthritis synovial fibroblasts,RASFs)增殖、侵袭及细胞因子分泌的影响。方法:体外分离培养RASFs,脂质体转染化学合成的miR-16 mimic或miR-16抑制剂,分别采用MTT法、Transwell小室法和流式细胞术检测其对RASFs增殖、侵袭及凋亡的影响;RT-PCR和Western blotting检测miR-16对RASFs基质金属蛋白酶3/13(matrix metalloproteinase 3/13,MMP3/13)及白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)表达的影响。结果:增殖实验结果表明miR-16可显著抑制RASFs的增殖;细胞侵袭结果表明miR-16可显著抑制RASFs的侵袭;流式细胞术检测发现miR-16对RASFs凋亡无显著影响;miR-16可下调MMP3/13及IL-1β的表达水平。结论:miR-16在RA的发生中起着重要作用,它可能通过下调MMP3/13及IL-1β的表达抑制RASFs增殖和侵袭。这为进一步研究miR-16在RA中的作用机制奠定了基础。

基于16S rDNA分析首发抑郁症患者的代谢紊乱因素

目的通过16S rDNA测序技术对首发抑郁症患者肠道菌群分布、多样性和基因功能进行分析,探讨抑郁症患者代谢变化的情况。方法选取首发抑郁症患者13例为研究组,选取本市健康对照11名为对照组。采用16S rDNA基因测序法对两组肠道菌群进行物种注释分析和功能比较,统计两组肠道菌群分布、多样性和基因功能的变化。结果PCoA分析显示,两组群落组成结构比较,差异有统计学意义(P<0.05)。在门水平,研究组厚壁菌门(Fimicutes)降低、拟杆菌门(Bacteroidota)升高(P<0.05)。在属水平,研究组拟杆菌属(Bacteroides)和副拟杆菌属(Parabacteroides)的丰度升高(P<0.05)。研究组标志微生物为:变形菌纲(Alphaproteobacteria),拟杆菌门(Bacteroidota),拟杆菌纲(Bacteroidia)和拟杆菌目(Bacteroidales)。在三级KEGG途径分类下,与对照组相比,研究组苯丙氨酸生物合成、色氨酸生物合成、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、缬氨酸合成、亮氨酸和异亮氨酸合成、胰岛素抗性和胰岛素信号路径的基因表达量降低(P<0.05),转运功能、缬氨酸降解、亮氨酸和异亮氨酸降解、脂肪酸降解、谷胱甘肽代谢和PPAR信号路径的基因表达量升高(P<0.05)。结论肠道菌群结构及其基因功能的改变是导致机体代谢紊乱的重要因素,检测肠道菌群变化可为临床防治抑郁症提供新思路,依据基因功能变化可为研究抑郁症发生的具体机制提供参考。

microRNA-22抑制SIRT1表达对调控软骨细胞衰老的影响

目的研究microRNA-22在骨关节炎中对软骨细胞衰老的影响。方法原代培养人骨关节炎软骨细胞;软骨细胞转染microRNA-22模拟物、抑制物,通过MTT实验检测microRNA-22对于软骨细胞增殖活性的影响,通过半乳糖苷酶染色实验检测microRNA-22对于软骨细胞衰老的影响,通过Western blot检测microRNA-22对于靶基因SIRT1,以及细胞衰老标志物P16蛋白表达的影响。结果(1)与对照组软骨细胞相比,转染microRNA-22模拟物可显著抑制软骨细胞增殖速率,转染microRNA-22抑制物可促进软骨细胞增殖(P<0.01);(2)与对照组软骨细胞相比,转染microRNA-22模拟物可显著增加半乳糖苷酶染色阳性软骨细胞比例,促进软骨细胞衰老,转染microRNA-22抑制物可降低半乳糖苷酶染色阳性软骨细胞比例,减缓软骨细胞衰老(P<0.01);(3)与对照组软骨细胞相比,转染microRNA-22模拟物可显著抑制SIRT1蛋白表达水平,同时促进P16蛋白表达,转染microRNA-22抑制物可促进SIRT1蛋白表达,抑制P16蛋白表达水平(P<0.01)。结论在骨关节炎软骨细胞中,microRNA-22可抑制软骨细胞增殖,并通过抑制SIRT1蛋白表达、促进P16蛋白表达,促进软骨细胞衰老,从而在骨性关节炎的发生与进展中扮演了重要角色。

16项抑郁症状快速自评量表自杀条目在抑郁症自杀风险筛查中的有效性研究

目的:评价患者16项抑郁症状快速自评量表(QIDS-SR16)中的自杀条目能否作为抑郁症自杀风险评估的筛查工具。方法:入组来自中国5家精神病院的门诊抑郁症患者,使用简明国际神经精神访谈(MINI)5.0.0的自杀模块作为患者是否有自杀风险的标准,患者完成QIDS-SR16的抑郁症状自评后使用Kappa一致性检验将QIDS-SR16自杀条目的评估结果与MINI结果进行比较,使用受试者工作特征曲线进行准确性和特异度的评估。结果:共分析患者数据352例,使用MINI自杀模块和QIDS-SR16的自杀条目筛选出具有自杀风险的患者比例分别为23.3%和47.4%。一致性检验结果显示MINI自杀模块和QIDS-SR16的自杀条目评估结果存在一致性差异(Kappa=0.34,P<0.001),在QIDS-SR16自杀条目筛查判定自杀风险阳性的患者中(自杀条目得分≥1),60%(99/167)被MINI评估为无自杀风险。进一步按照QIDS-SR16自杀风险的严重程度进行分层分析,结果显示在这部分评估结果不一致的患者中,70%(69/99)判定为轻度自杀风险,20%(20/99)判定为中度自杀风险。QIDS-SR16自杀意念条目筛查自杀风险的诊断价值分析结果显示,当以QIDS-SR16的自杀条目≥1分为筛查标准,评估患者自杀风险的灵敏度为83.1%,特异度为63.6%,受试者工作特征曲线下面积为0.73(95%CI:0.68~0.78)。结论:利用症状评估工具QIDS-SR16量表中的单个条目进行自杀风险的筛查具有良好的敏感性及应用的便利性。QIDS-SR16的自杀条目能够对抑郁症人群自杀风险进行初步的筛查。

急性缺血性脑卒中的microRNA-16表达水平及其对预后的影响

目的探讨microRNA-16(miR-16)在急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)中表达水平及其对预后的影响。方法选取辽阳市中心医院神经内科2016年1月-2020年1月收治的279例AIS患者(AIS组)作为研究对象,治疗结束后3个月,采用改良Rankin量表(modified rankin scale,MRS)评价患者预后,根据预后情况将患者分为预后良好组(196例)和预后不良组(83例)。另选取114例在本院例行体检的健康者作为健康组。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测血清中miR-16含量。比较AIS组和健康组外周血miR-16表达水平;比较预后不良组和预后良好组患者一般临床资料及生化指标;多因素Logistic回归分析预后不良的危险因素;受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析外周血miR-16表达水平对AIS预后不良的预测价值。结果AIS组外周血miR-16、miR-135b表达水平显著高于健康组(P<0.05);预后不良组患者年龄,糖尿病史率,外周血中miR-16、miR-135b表达水平,MRS评分,美国国立卫生研究院卒中量表(National Institute of Health stroke scale,NIHSS)评分均显著高于预后良好组(均P<0.05);年龄、糖尿病史、miR-16、miR-135b、MRS、NIHSS评分为AIS患者预后不良的影响因素(均P<0.05);miR-16、miR-135b、miR-16联合miR-135b预测AIS预后不良的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.739(95%CI=0.676~0.801)、0.704(95%CI=0.638~0.770),0.802(95%CI=0.745~0.859);miR-16联合miR-135b预测AIS预后不良的AUC大于miR-16、miR-135b的AUC(P<0.05)。结论miR-16在AIS中表达水平升高,升高预示患者预后不良,可作为预测AIS预后不良的标志物,且miR-16联合miR 135b对AIS患者预后不良的测价值高于单独miR-16、miR-135b。

基于16S rDNA高通量测序技术研究人参对LPS诱导的抑郁样行为小鼠肠道菌群的影响

目的研究人参对脂多糖(Iipopolysaccaride,LPS)诱导的抑郁样行为小鼠肠道菌群的影响。方法将小鼠随机分为空白组(Con)、模型组(Mod)、人参水提物组(GS)、盐酸氟西汀组(Flu);给药7 d后,进行旷场实验和悬尾实验,观察小鼠的行为学表现,并使用16S rDNA技术检测各组小鼠粪便肠道菌群变化及预测抑郁样行为小鼠肠道菌群相关的功能通路。结果与模型组相比,人参水提物组小鼠的活动次数和休息时间明显减少,活动总路程及平均速度显著增加;人参水提物组肠道菌群从门到属水平均发生了变化,部分有益菌的丰度增加,部分有害菌的丰度降低,其中厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌属(Bacteroides)、毛螺菌属(Lachnospiraceae_FCS020_group)、瘤胃菌属(Ruminococcaceae_UCG_009)、Lachnoclostridium菌属显著增多,均有往正常组回调的趋势;KEGG通路富集分析共发现31条功能通路与抑郁样行为小鼠肠道菌群相关。结论人参具有改善抑郁样行为小鼠肠道菌群失调的作用。

母爱剥夺诱导的抑郁大鼠海马miR-16的表达

目的:研究母爱剥夺是否诱发成年大鼠抑郁样行为表现,miR-16是否参与母爱剥夺诱发抑郁的病理过程。方法:在SD大鼠出生后第1天按窝随机分为母爱剥夺组(n=17)和正常对照组(n=17)。母爱剥夺组大鼠在出生后第1至14天每天接受6 h的母爱剥夺应激,正常对照组大鼠不接受任何实验处理。在大鼠13周龄时采用强迫游泳和糖水偏爱实验评定大鼠的抑郁水平;采用实时荧光定量RT-PCR检测大鼠海马miR-16的表达水平。结果:在强迫游泳实验中,母爱剥夺组大鼠的被动漂浮时间显著长于对照组大鼠,糖水偏爱率显著低于对照组(P<0.05);与对照组比较,母爱剥夺组大鼠海马内miR-16的表达水平显著增加(P<0.05),miR-16表达水平与抑郁样行为水平显著相关(P<0.05)。结论:母爱剥夺能使大鼠成年后表现出抑郁样行为,海马内miR-16表达水平升高,miR-16可能参与母爱剥夺诱发大鼠抑郁样行为的病理过程。

西酞普兰对抑郁症患者外周血miRNA-16/5-羟色胺转运体通路的影响

目的·探讨西酞普兰对抑郁症患者外周血miRNA-16/5-羟色胺转运体(serotonin transporter,SERT)通路相关指标的影响。方法·将未服药的抑郁症患者45例(未服药病例组)、经药物治疗的抑郁症患者32例(药物治疗组)及健康对照者32名(健康对照组)纳入研究,行汉密尔顿抑郁量表17项(Hamilton Depression Scale-17 items,HAMD-17)评估。采用荧光定量PCR检测血浆miRNA-16表达水平,采用Western blotting检测血小板中SERT蛋白表达水平。对未服药病例组中医师处方予以西酞普兰治疗的14例患者进行2个月的随访,随访结束后进行HAMD-17评估,检测血浆miRNA-16及血小板SERT蛋白的表达水平。结果·血浆miRNA-16表达水平在3组之间比较,差异无统计学意义(F=0.421,P=0.657);血小板SERT蛋白表达水平在3组之间比较,差异无统计学意义(F=0.112,P=0.894)。随访研究结果显示:14例处方予以西酞普兰治疗的患者,2个月后HAMD-17评分降低(Z=-3.187,P=0.001),血浆miRNA-16表达水平升高(t=2.455,P=0.032),血小板SERT蛋白表达水平无变化(t=-0.750,P=0.470)。结论·5-羟色胺再摄取抑制剂类药物西酞普兰对抑郁症患者血浆miRNA-16的表达具有下调作用;血小板5-羟色胺的减少并非是由血小板膜上SERT蛋白减少这一变化引起,可能与SERT功能降低有关。

降低脑脊液miR-16的水平对大鼠抑郁样行为的影响

目的:探讨降低脑脊液微小RNA-16(miR-16)的水平是否通过影响中缝核miR-16与5-羟色胺转运体(SERT)的表达参与抑郁症的发病。方法:SD大鼠侧脑室分别注入生理盐水、阴性对照液及miR-16拮抗剂5、10和20 nmol,隔天1次,共3次。而后进行蔗糖偏好实验和强迫游泳实验,并取脑脊液与中缝核组织,通过RTqPCR法测定miR-16水平,Western blot法测定SERT蛋白水平。结果:拮抗剂10和20 nmol组蔗糖偏好率[(46.67±9.35)%和(40.28±10.54)%]显著低于空白对照组[(54.72±11.25)%]和阴性对照组[(53.34±13.71)%],不动时间[(30.54±12.78)s和(36.23±8.57)s]则明显长于空白对照组[(16.71±5.58)s]和阴性对照组[(19.15±7.46)s](P<0.05),随着miR-16拮抗剂剂量的增加,抑郁样行为越明显。与空白对照组和阴性对照组相比,中缝核miR-16水平在拮抗剂3组均下降,并与注射剂量呈负相关(r=−0.57,P=0.000),中缝核中SERT蛋白水平则相反。结论:降低脑脊液miR-16水平可影响大鼠中缝核miR-16及SERT的表达,并与抑郁症的发病机制相关。

miR-16联合Cripto-1、ANXA7诊断胃癌及其淋巴结转移的临床价值研究

目的探讨microRNA-16(miR-16)联合畸胎瘤衍生生长因子(Cripto-1)、膜联蛋白A7(ANXA7)诊断胃癌及其淋巴结转移的临床价值。方法选取2017年6月至2019年9月南京大学医学院附属鼓楼医院内科治疗的胃部疾病患者546例,根据胃癌诊断标准分为胃癌组(121例)和非胃癌组(425例)。所有胃癌患者根据胃癌进展分为早期胃癌组(44例)、进展期胃癌组(77例),根据淋巴结是否转移分为淋巴结转移组(71例)、无淋巴结转移组(50例)。选择同期该院健康体检者50例作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测血清miR-16水平;采用酶联免疫吸附测定检测ANXA7和Cripto-1水平;采用Pearson相关分析胃癌患者血清miR-16水平与ANXA7、Cripto-1水平的相关性。采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析miR-16、ANXA7、Cripto-1诊断胃癌及其淋巴结转移的价值。结果胃癌组血清miR-16、ANXA7、Cripto-1水平均高于非胃癌组和对照组(P<0.05);进展期胃癌组血清miR-16、ANXA7、Cripto-1水平均高于早期胃癌组(P<0.05);淋巴结转移组血清miR-16、ANXA7、Cripto-1水平均高于无淋巴结转移组(P<0.05);miR-16、ANXA7、Cripto-1诊断胃癌的最佳临界值分别为11.81、71.51μg/L、2.26μg/L,3项指标联合诊断胃癌的ROC曲线下面积(AUC)为0.996,其灵敏度(95.04%)和特异度(97.26%)较高;miR-16、ANXA7、Cripto-1诊断胃癌淋巴结转移的最佳临界值分别为18.95、78.93μg/L、3.73μg/L,3项指标联合诊断胃癌淋巴结转移的AUC为0.996,其灵敏度(97.18%)和特异度(96.00%)较高;胃癌患者血清miR-16水平与ANXA7、Cripto-1水平均呈正相关(r=0.465、0.519,P<0.05)。结论血清miR-16、ANXA7、Cripto-1水平在胃癌患者中明显升高,且与胃癌发生发展相关,3项指标联合检测在诊断胃癌及其淋巴结转移中有一定价值。

基于16S rDNA高通量测序技术分析加味温胆汤对抑郁模型大鼠肠道菌群的影响

目的探讨加味温胆汤对抑郁模型大鼠肠道细菌丰度及构成的影响。方法采用孤养结合慢性不可预见性温和应激(CUMS)法复制抑郁模型大鼠,通过应用旷场实验、糖水消耗实验,检测各组大鼠情绪变化,评估抑郁模型是否成功复制及加味温胆汤抗抑郁效应;应用16s rDNA高通量测序分析技术,研究加味温胆汤对肠道细菌丰度及构成的调控作用。结果与空白组比较,抑郁模型大鼠旷场实验、糖水消耗量得分均减少(P<0.01),肠道有益菌Firmicutes和Bacilli丰度降低、有害菌Bacteroidetes和Bacteroidia丰度增加(P<0.05)。与模型组相比,加味温胆汤干预后,大鼠旷场实验、糖水消耗量得分升高(P<0.05),肠道有益菌Firmicutes和Bacilli丰度增加、有害菌Bacteroidetes和Bacteroidia丰度降低(P<0.01),且相似度上更接近于空白组。结论加味温胆汤可能通过增加益生菌抑制致病菌调控肠道菌群,从而发挥抗抑郁作用。

抑郁模型大鼠脑脊液miR-16与中缝核miR-16、5-羟色胺转运体表达的关联性研究

目的研究抑郁模型大鼠脑脊液miR-16是否能反映中缝核miR-16水平的变化,并与中缝核5-羟色胺转运体(serotonin transporter,SERT)的表达相关。方法将20只SD大鼠随机分为抑郁模型组和对照组,每组各10只。抑郁模型组大鼠接受21 d不可预知温和应激的刺激,对照组大鼠正常饲养。收集大鼠脑脊液测定miR-16,分离中缝核测定miR-16和SERT蛋白。比较模型组与对照组脑脊液miR-16、中缝核miR-16、SERT表达差异并分析三者的关联性。结果模型组大鼠脑脊液miR-16水平(0.19±0.10)和中缝核miR-16水平(0.65±0.22)均低于相应的对照组(0.35±0.12、0.84±0.18)(P<0.01),中缝核SERT水平(0.99±0.29)高于对照组(0.59±0.18)(P=0.002)。脑脊液miR-16与中缝核miR-16呈显著正相关关系(r=0.95,P=0.000),而且脑脊液miR-16与中缝核miR-16一样,与中缝核SERT呈显著负相关(r=-0.91,P=0.000)。结论抑郁模型大鼠脑脊液miR-16水平能反映中缝核miR-16水平,并与中缝核SERT表达相关,可能可作为抑郁症的生物标记物。

百合地黄汤对抑郁症大鼠肠道菌群的影响

目的:探究百合地黄汤对抑郁症大鼠肠道菌群的影响。方法:采用孤养和慢性不可预知性温和应激刺激制备大鼠抑郁症模型,经百合地黄汤给药后,采用糖水偏好试验和旷场试验进行药效学评价,并对大鼠的结肠进行病理学检测;收集大鼠粪便,应用16S rRNA高通量测序技术对大鼠肠道菌群多样性进行分析,并进行功能预测。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量明显降低;给药后,各剂量组大鼠体质量均有增加的趋势。糖水偏好实验结果显示,与正常组比较,模型组大鼠糖水偏爱度明显减弱(P<0.01);给药后,各剂量组糖水偏爱度均有增强的趋势,且中剂量组和低剂量组差异有统计学意义(P<0.01)。在旷场实验中,与正常组比较,模型组大鼠自主活动显著减弱(P<0.01);给药后,各剂量组大鼠自主活动均有增强的趋势,且低剂量组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。病理结果显示,模型组大鼠结肠黏膜遭到破坏,经百合地黄汤给药后,各给药组结肠黏膜损伤均有不同程度的恢复。在菌群多样性方面,经百合地黄汤治疗后,在门水平上,厚壁菌门的丰度明显增加,拟杆菌门、疣微菌门、变形菌门及蓝藻门的丰度明显降低,其中变形菌门和蓝藻门改变具有统计学意义(P<0.05)。在属水平上,降低了norank_f__Muribaculaceae、瘤胃球菌属及粪球菌属等菌属的丰度,升高了乳酸菌属、罗姆布茨菌属、Turicibacter及芽孢杆菌属等菌属的丰度,其中norank_f__Muribaculaceae、罗姆布茨菌属、Turicibacter、norank_f__Eubacterium_coprostanoligenes_group、Prevotellaceae_UCG-001及Prevotellaceae_UCG-001的改变有统计学意义(P<0.05)。京都基因和基因组百科全书(KEGG)功能预测显示,差异菌群的功能与氨基酸代谢、能量代谢、神经系统以及神经退行性疾病等相关。结论:百合地黄汤能够调节抑郁症大鼠的肠道菌群进而改善抑郁症大鼠的抑郁样行为。