HPLC法同时测定南葶苈子饮片中槲皮素、山奈酚及异鼠李素的含量

目的建立南葶苈子饮片中槲皮素、山奈酚及异鼠李素的含量测定方法。方法采用Diamond-C18色谱柱;甲醇-0.4%磷酸溶液(50∶50)为流动相;流速1.0mL·min-1;检测波长360nm。结果线性范围:槲皮素0.1184～0.8288μg,r=0.9995,山奈酚0.0258～0.1806μg,r=0.9994,异鼠李素0.0444～0.3108μg,r=0.9994;平均回收率:槲皮素99.51%,RSD=2.10%(n=6),山奈酚101.03%,RSD=2.08%(n=6),异鼠李素99.80%,RSD=2.09%(n=6)。结论该法操作简便、准确,重复性好,可用于南葶苈子饮片中槲皮素、山奈酚及异鼠李素的含量测定。

HPLC法测定不同产地南葶苈子中芥子碱硫氰酸盐的含量

目的:采用HPLC法测定不同产地南葶苈子中芥子碱硫氰酸盐的含量。方法:色谱柱:Phenomenex-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-0.08mol/LKH2PO4溶液(11∶89);检测波长:326nm;流速:1mL/min;柱温:30℃。结果:芥子碱硫氰酸盐在0.944～4.720μg之间,线性关系良好,加样回收率99.08%,RSD=0.61%(n=6)。结论:该方法操作简便、准确,具有很好的重现性和稳定性。产地对南葶苈子中芥子碱硫氰酸盐的含量有明显影响。

HPLC法同时测定南葶苈子中槲皮素山柰素及异鼠李素的含量

目的：建立南葶苈子中槲皮素、山柰素及异鼠李素的含量测定方法。方法：色谱柱：Diamond-C18（4.6mm×250mm,5μm）;流动相：甲醇-0.4%磷酸溶液（50∶50）;检测波长：360nm;流速：1.0mL/min;柱温：30℃。结果：槲皮素在0.1184-0.8288μg范围内,r=0.9995,加样回收率99.46%,RSD=0.98%（n=6）;山柰素在0.0258-0.1806μg范围内,r=0.9994,加样回收率98.75%,RSD=1.30%（n=6）;异鼠李素在0.0444-0.3108μg范围内,r=0.9994,加样回收率98.77%,RSD=1.47%（n=6）。结论：该方法操作简便、准确,重复性好,可用于南葶苈子中槲皮素、山柰素及异鼠李素的含量测定。

播娘蒿种子脂肪油组分的GC-MS分析

The chemical constituents of the fatty oil from seeds of Descurainia sophia(L.) Webb ex Prantl were analyzed by GC-MS.The results showed that thirty-four compounds were isolated and identified,representing 97.259% of the total fatty oil.The main constituents of oil were unsaturated fatty acids(31.745%),unsaturated fatty acid esters(38.631%) and saturated fatty acid esters(12.285%).The main compounds with contents over 10%(V/V) followed as: 9,12,15-calendic acid-2,3-dihydroxypropyl ester(14.763%),(9Z,12Z,15Z)-calendic acid ethyl ester(14.723%) and(Z,Z)-9,12-octadecadienoic acid(13.073%).

南葶苈子的化学成分

目的对十字花科植物播娘蒿(Descurainiasophia(L )WebbexPrantl)的种子南葶苈子提取物的化学成分进行分离鉴定。方法南葶苈子的乙醇提取物经D10 1大孔树脂用水及不同体积分数的乙醇洗脱,硅胶柱色谱分离,通过波谱( 1H NMR ,13 C NMR)分析和化学方法鉴定其结构。结果所得到的2个化合物分别被鉴定为4 戊烯酰胺( 4 pentenamide ,Ⅰ)、5 羟甲基糠醛( 5 hydrox ymethylfurfural,Ⅱ)。结论化合物Ⅰ为一个新天然产物;化合物Ⅱ为首次从播娘蒿属植物中分离得到。

葶苈子醇沉组分免疫调节作用研究

目的:研究葶苈子醇沉组分的体内外免疫调节作用。方法:采用体外淋巴细胞增殖实验考查葶苈子醇沉组分对正常小鼠脾脏中T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖的影响;采用碳廓清实验、血清溶血素实验、迟发型超敏反应实验,考察葶苈子醇沉组分对环磷酰胺诱导的免疫低下小鼠非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫的影响;考察葶苈子醇沉组分对免疫低下小鼠免疫器官和血清中细胞因子含量的影响。结果:葶苈子醇沉组分能够促进刀豆蛋白A(Con A)诱导的T淋巴细胞的增殖和脂多糖(LPS)诱导的B淋巴细胞的增殖(P<0.01);提高免疫低下小鼠碳廓清指数K、吞噬指数α、半数溶血值HC50和耳廓肿胀度(P<0.05或P<0.01);缓解免疫低下小鼠体质量的降低及胸腺和脾脏的萎缩(P<0.05或P<0.01),提高血清中IL-2、IFN-γ和IL-4的含量(P<0.05或P<0.01)。结论:葶苈子醇沉组分能够促进体外淋巴细胞的增殖,保护免疫低下小鼠的免疫器官,增强免疫低下小鼠的非特异性免疫和特异性免疫,具有免疫促进作用。

南葶苈子的化学成分

目的对十字花科植物播娘蒿 (Descurainiasophia(L )WebbexPrantl)种子南葶苈子的提取物的化学成分进行分离和鉴定。方法南葶苈子的乙醇提取物经D1 0 1大孔树脂以水及不同浓度乙醇洗脱 ,硅胶柱色谱分离得到 8个化合物 ,通过波谱 (1H NMR ,13 C NMR)分析和化学方法鉴定了其结构。结果 8个化合物分别被鉴定为 β 谷甾醇 (β sitosterolⅠ )、胡萝卜苷 (daucosterolⅡ )、3 ,5 二甲氧基 4 羟基苯甲醛 (4 hydroxy 3 ,5 dimethoxybenzaldehydeⅢ )、芥子酸 (sinapicacidⅣ )、芥子碱硫酸氢盐 (sinapinebisulfateⅤ )、山萘酚 (kaempferolⅥ )、槲皮素 (quercetinⅦ )、槲皮素 7 O β D 吡喃葡萄糖基 (1→ 6) β D 吡喃葡萄糖苷 (quercetin 7 O β D glucopyranosyl(1→ 6) β

南葶苈子不同炮制品药效学与急性毒性实验研究

目的:观察研究南葶苈子不同炮制品的镇咳、祛痰、利尿作用和急性毒性。方法:采用小鼠"氨水引咳"法、"酚红排泌"法、大鼠"代谢笼"法观察不同炮制品在镇咳、祛痰、利尿方面的作用,测定小鼠的半数致死量和最大耐受量来考察其急性毒性。结果:南葶苈子不同炮制品能明显延长小鼠咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数,促进酚红排泌,增加大鼠排尿量,LD50未能测出,小鼠最大耐受量30g生药/kg,为成人临床常用剂量的200倍。结论:南葶苈子不同炮制品有明显的止咳、祛痰、利尿作用,其急性毒性较低。

葶苈子化学拆分组分止咳祛痰平喘作用研究

目的:探讨葶苈子的化学拆分组分的止咳祛痰及平喘作用。方法:分别采用氨水引咳法、气管酚红排泌法、组胺与乙酰胆碱致喘法、离体气管法观察葶苈子各化学拆分组分的止咳、祛痰、平喘作用。结果:葶苈子水煎液低、中、高剂量均能显著减少小鼠咳嗽次数、增加小鼠呼吸道的酚红排泌量,同时能延长豚鼠哮喘潜伏期,并且提高解痉率,与空白对照组比较,中剂量效果最好。与空白组相比,葶苈子20%乙醇组分、脂肪油组分、水部位组分均能显著减少浓氨水引起小鼠咳嗽的次数,并延长咳嗽潜伏期、增加酚红排泌量、延长豚鼠发生哮喘的潜伏期(P<0.01,P<0.05),此外,20%乙醇组分、水部位组分能使气管收缩幅度明显降低(P<0.01,P<0.05),具有一定的解痉挛作用。结论:葶苈子水煎液具有较好的止咳、祛痰、平喘作用,其有效部位为20%乙醇组分、脂肪油及水部位组分,其止咳祛痰和平喘作用最为显著,与水煎液中剂量作用相当。

播娘蒿甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆和表达分析

采用RT-PCR技术克隆了播娘蒿的甜菜碱醛脱氢酶基因全长cDNA序列(DsBADH)。DsBADHcD-NA序列全长1653bp,其中开放阅读框长1503bp,编码一个由501个氨基酸残基组成的蛋白质,推测的蛋白质相对分子质量为54kD,pI为5.5。序列比对结果表明DsBADH与其它物种的BADHs无论在核酸水平还是在蛋白质水平上都表现较高的同源性,表明BADH基因家族具有较高的保守性。DsBADH基因的氨基酸序列在进化上与同属十字花科植物BADH基因距离较近。蛋白质序列存在一个编码十肽的高度保守序列,该结构在醛脱氢酶中是高度保守的,这些残基可能包含NAD+结合位点及酶催化位点,而且含有与酶功能有关的醛脱氢酶高度保守的氨基酸残基Cys,表明DsBADH可编码活性蛋白。N端存在信号肽,初步将该酶定位于叶绿体。半定量RT-PCR分析表明,DsBADH在根、茎、叶以及角果中均表达,但在角果中的表达显著高于其它组织,而且表明DsBADH受盐诱导正调节表达。

南葶苈子各化学拆分组分化学成分的研究

目的:研究南葶苈子各拆分组分的化学成分,诠释南葶苈子各拆分组分发挥药效的物质基础。方法:运用Diaion HP-20、Toyopearl HW-40、MCI Gel CHP-20、ODS、Silica gel等柱色谱技术结合高压制备液相等方法进行分离纯化,并根据化合物的光谱数据和理化性质鉴定结构。结果:从南葶苈子的20%和80%乙醇组分中分离并鉴定了28个化合物的结构。从20%乙醇组分中分离得到13个化合物:山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(1),槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(2),异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(3),异鼠李素-3,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4),槲皮素-3,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5),山柰酚-3,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6),山柰酚-3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(7),芥子酸甲酯(8),丁香醛(9),(S)-对羟基苯基乳酸(10),(S)-2-羟基苯丙酸(11),东莨菪内酯(12),芥子酸(13);从80%乙醇组分中分离得到15个化合物:异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(14),槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(15),山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(16),槲皮素(17),山柰酚(18),异鼠李素(19),丁香酸(20),槲皮素-3-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷(21),槲皮素-3-O-β-D-吡喃木糖苷(22),6-O-[E]-Sinapoyl-(α-andβ)-D-glucopyranoside(23),dimethyl(E,E)-4,4′-dihydroxy-3,3′,5,5′-tetramethoxylign-7,7′-dien-9,9′-dioate(24),索马榆脂酸二甲酯(25),2-羟基-3-吲哚丙酸(26),2-羟基-3-吲哚丙酸甲酯(27),4'-甲氧基二氢槲皮素(28)。结论:化合物7-11,21-28均是首次从南葶苈子中分离得到。

南葶苈子饮片中多糖的提取及含量测定

目的:从南葶苈子饮片中提取多糖,并测定其含量。方法:水提醇沉法提取多糖,硫酸-蒽酮法测定多糖含量。结果:测得南葶苈子饮片中多糖含量较高,平均回收率100.26%,RSD=1.61%(n=6)。结论:首次从南葶苈子饮片中提取出多糖;其含量测定方法简便、准确,回收率高。

南葶苈子化学成分研究

研究十字花科植物播娘蒿种子（南葶苈子）提取物的化学成份。采用大孔树脂柱色谱和硅胶柱色谱对化合物进行分离和纯化,并通过波谱（1H-NMR1,3C-NMR,MS）分析和化学方法鉴定了其结构。从南葶苈子中分离鉴定出6个化合物：2,5-二甲基-7-羟基-色酮（2,5-dimethyle-7-hydroxychromone,1）、对羟基苯甲醛（p-hydroxy benzaldehyde,2）、异香草酸（isovanillic acid,3）、丁香酸（syringic acid,4）、对羟基苯甲酸（p-benzoic acid,5）和烟酸（nicotinic acid,6）。化合物1~6为首次从播娘蒿属植物中分离得到。

葶苈子对肾阴虚水肿模型干预作用的代谢组学研究

目的:运用代谢组学方法研究肾阴虚水肿大鼠尿液代谢组学的变化及葶苈子的干预作用。方法:通过UPLC-Q-TOF-MS检测各组大鼠尿液中代谢产物的变化;运用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLSDA)等方法分析和筛选潜在生物标志物;应用MeV软件对生物标志物进行热度图绘制和聚类分析。结果:由40个与模型相关的生物标志物富集得到了4条显著受到干扰的代谢途径:苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸和嘧啶代谢途径。经葶苈子干预后,模型大鼠体内多数生物标志物的水平被回调至正常水平,代谢紊乱得以纠正。结论:代谢组学可从整体代谢水平上阐释肾阴虚水肿模型以及葶苈子对其干预机制,为中医证候和中药作用机制研究提供了一种新的研究思路和方法。

播娘蒿DsCOR基因的原核表达、蛋白纯化、及性质研究

利用PCR方法扩增DsCOR基因的蛋白编码序列,经BamHⅠ、SacⅠ酶切后连接入pET32a原核表达载体,构建的pET32a-DsCOR融合重组表达质粒转化大肠杆菌BL21进行原核表达.建立了"煮沸-镍离子亲和层析"的蛋白纯化方法.对纯化的DsCOR蛋白进行高温耐受性、pH耐受范围、紫外耐受性方面的研究.

分光光度法测定南葶苈子中总黄酮的含量

目的:建立南葶苈子药材中总黄酮的含量测定方法。方法:采用分光光度法,以芦丁为对照品,以5%三氯化铝甲醇溶液为显色剂,在波长413nm处对样品中的总黄酮进行含量测定。结果:总黄酮在3～30μg.mL-1线性关系良好,平均加样回收率98.95%,RSD=0.90%(n=6)。结论:该方法操作简便、准确,具有很好的重现性和稳定性,适用于南葶苈子中总黄酮的含量测定。

ID-ICP-MS法测定高脂血症大鼠给予南葶苈子油前后肝肾中铁、铜、锌的含量

目的比较对照组和高脂血症组大鼠肝肾中铁、铜、锌的含量差异,并比较给予南葶苈子油治疗前后肝肾中三种元素的含量变化,为高脂血症的临床检验和治疗提供参考。方法选取18只SD雄性大鼠,随机分成3组,对照组,高脂组和南葶苈子组,建立高脂血症大鼠模型,对照组和高脂组给予生理盐水,南葶苈子组给予同剂量南葶苈子油,6周后采集肝肾样本,采用消解法制备肝肾组织和标准牛肝组织样品,并用同位素稀释法(ID)联合电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法,同时测定各组肝肾中的铁、铜、锌的含量。结果铁、铜、锌3种元素的定量限为0. 0490、0. 1140、0. 0707 ng·g-1,精密度RSD分别为1. 55%、0. 54%、1. 12%,重复性RSD分别为2. 71%、1. 59%、3. 23%。对照组,高脂组和南葶苈子组肾中铁元素含量分别为24. 21±2. 78、37. 88±2. 63、32. 51±2. 17μg·g-1,锌铜含量比分别为4. 87±1. 80,12. 42±2. 90,8. 57±3. 42;肝中铁元素含量分别为34. 52±5. 64、47. 17±11. 90、37. 03±7. 73μg·g-1,锌铜含量比分别为7. 73±0. 67,8. 98±1. 56,7. 85±2. 14。结论该方法适用于大鼠肝肾中铁、铜、锌3种元素的测定。高脂血症与铁的含量、锌和铜的比值呈正相关,给予南葶苈子油后均不同程度地降低。

独行菜和播娘蒿化学成分及药理作用研究进展

独行菜Lepidium apetalum和播娘蒿Descurainia sophia分别系十字花科独行菜属和播娘蒿属植物,其种子入药分别称为北葶苈子和南葶苈子。现已从2种植物中分离得到了异硫氰酸和硫苷类成分,以及强心苷、黄酮、三萜、甾醇、香豆素、生物碱、酚酸、挥发油、脂肪油、氨基酸等成分。这两种植物对心血管、高血脂等疾病具有显著功效,所含的成分具有降压、抗癌、细胞毒、抗氧化等药理活性。对独行菜和播娘蒿的化学成分及药理作用研究进行分类汇总和比较,为进一步研究常用中药葶苈子提供参考。

南葶苈子油抗抑郁作用的初步研究

通过小鼠悬尾实验,发现南葶苈子油对小鼠强迫悬尾造成的抑郁症状有一定的效果;在小鼠强迫游泳实验中,南葶苈子油连续灌胃15 d能明显缩短游泳不动时间;此外,小鼠连续灌胃15 d南葶苈子油能明显增强5-HTP诱导的甩头行为,在小鼠抗利血平拮抗实验中,对利血平造成的小鼠眼睑下垂及体温下降也表现出有一定的拮抗作用.

南葶苈子抑制氧化应激与自噬通路抗H_2O_2诱导的H9c2细胞损伤作用研究

目的探究南葶苈子水提物(DS)对H_2O_2诱导的心肌H9c2细胞损伤的保护作用及潜在机制。方法使用高效液相色谱与质谱联用方法分析鉴定DS中主要成分峰。采用H_2O_2处理制备H9c2细胞损伤模型,分为对照组、模型组、普罗布考组及DS 100、200、400μg/m L组,MTT法检测H9c2细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞自噬水平、线粒体膜电位;试剂盒检测细胞氧化应激相关指标;Incell-Western法检测凋亡通路关键蛋白和自噬标志性蛋白表达水平。结果共分析鉴定了DS中含量最高的7种成分。与模型组比较,DS可以提高H9c2细胞活力(P<0.05、0.01)与细胞存活率(P<0.01),改善线粒体膜电位水平(P<0.01),调节凋亡通路关键蛋白Caspase-3和Bax/Bcl-2蛋白表达(P<0.01),抑制心肌细胞凋亡;并能极显著降低细胞自噬水平(P<0.01),升高自噬标志性蛋白自噬微管相关蛋白轻链3B(LC3B)、p62表达水平(P<0.01),抑制心肌细胞自噬;降低心肌活性氧(ROS)水平(P<0.01),调节细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)水平(P<0.01),改善心肌细胞氧化应激。结论 DS可以有效保护由H_2O_2引起的H9c2细胞损伤,其机制可能与改善细胞的氧化应激、抑制细胞凋亡和自噬有关,其物质基础可能与所含的黄酮苷类成分有关。