排钱草总生物碱对免疫性肝纤维化大鼠Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGF-β_1表达的影响

目的 :观察排钱草总生物碱对免疫性肝纤维化大鼠肝脏胶原沉积和转化生长因子 β1(TGF β1)表达的影响 ,研究其对肝纤维化形成的抑制作用 ,并探讨可能的作用机制。方法 :设立模型对照组、药物对照组、排钱草总生物碱高、中、低剂量组和正常对照组 ,以腹腔注射猪血清方法诱导大鼠肝纤维化动物模型。排钱草总生物碱高、中、低剂量组大鼠在注射猪血清的同时分别灌服排钱草总生物碱 3 0mg/kg ,2 0mg/kg ,10mg/kg ,1次 /d ,共 8周。大鼠肝脏HE染色 ,观察各组大鼠肝组织的炎性坏死与胶原纤维沉积变化 ;免疫组化观察大鼠肝纤维化形成过程中腓钱草总生物碱对肝脏表达Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原蛋白及TGF β1的影响。结果 :与正常对照组比较 ,模型组大鼠肝脏出现典型的肝纤维化表现 ,肝脏胶原纤维间隔广泛形成 ,肝小叶与肝窦内胶原增生沉积明显 ,Ⅰ ,Ⅲ ,Ⅳ型胶原 (1. 2 8± 2 .5 9vs13 .82± 6. 5 5 ,1 .0 0± 1. 2 2vs 14. 69± 7 .16,1 0 3± 1 46vs 12. 44± 6/ 89,P值均 <0 . 0 0 1)及TGF β1表达明显增多。高、中、低剂量排钱草总生物碱均可以明显减轻大鼠肝脏内胶原纤维增生沉积 (P <0 . 0 5 ) ,抑制肝脏Ⅰ ,Ⅲ ,Ⅳ型胶原蛋白 (P值均 <0 0 5 )及TGF β1的合成表达。结论

排钱草总生物碱对肝纤维化大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

目的:探讨排钱草总生物碱对肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响。方法:采用逆转录定量PCR方法测定不同剂量排钱草总生物碱对大鼠肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的相对表达值。结果:高、中剂量组大鼠肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达显著低于模型组,P<0.05。与正常对照组相比差异无显著性意义。结论:排钱草总生物碱能显著降低猪血清所致免疫性肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达。

排钱草总生物碱对化学损伤性肝纤维化大鼠肝脏病理及超微结构变化的影响

目的 观察排钱草总生物碱对肝纤维化大鼠肝脏组织病理改变的影响。方法 用四氯化碳 (CCL4)复制肝纤维化大鼠动物模型。结果 动物造模后光镜下肝细胞变性坏死程度加重、胶原纤维分布明显增多。电镜下肝细胞及细胞器形态结构破坏明显 ,贮脂细胞、枯否氏细胞增多 ,胶原纤维分布广泛。经排钱草总生物碱治疗后 ,肝组织病变减轻 ,上述与纤维化有关细胞及胶原纤维明显减少。结论 排钱草总生物碱可以减轻CCL4致肝纤维化的病变程度 ,抑制肝纤维化的发展。

排钱草总生物碱对实验性肝纤维化动物相关指标的作用

目的 观察排钱草总生物碱对实验性肝纤维化的作用效果及其作用机制。方法 采用四氯化碳 (CCl4 )诱导肝纤维化模型 ,分别按阻断肝纤维化实验研究方法和治疗肝纤维化实验研究方法 ,从血清相关指标、肝脏羟脯氨酸含量和病理组织学等观察排钱草总生物碱的疗效 ,以秋水仙碱作为阳性对照药。结果 排钱草总生物碱能显著降低肝纤维化大鼠血清ALT、HA、γ 球蛋白及肝组织羟脯氨酸含量。肝脏病理组织学检查亦显示良好的作用效果。

排钱草总生物碱对大鼠肝星状细胞相关细胞因子蛋白表达的影响

目的探讨排钱草总生物碱对大鼠肝星状细胞T6(HSC-T6)中血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、转化生长因子βⅠ型受体(TβR-Ⅰ)蛋白表达的影响。方法将体外培养HSC-T6细胞分为空白对照组、阳性对照组(1.0μg/ml秋水仙碱)及37.5μg/ml、75.0μg/ml、150.0μg/ml排钱草总生物碱组。空白对照组加入培养液,其他组加入相应药物作用48 h后,提取总蛋白,免疫印迹法检测HSC-T6中PDGF-BB、TGF-β1、PI3K、TβR-Ⅰ蛋白表达水平。结果阳性对照组、37.5μg/ml、75.0μg/ml及150.0μg/ml排钱草总生物碱组的TGF-β1相对表达水平低于空白对照组(均P<0.05);5组PDGF-BB、PI3K及TβR-Ⅰ蛋白相对表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论排钱草总生物碱可下调HSC-T6中的TGF-β1蛋白表达水平,这可能是其抗肝纤维化的作用机制。

壮药排钱草总生物碱对大鼠肝星状细胞胶原和细胞因子生成的影响

目的:研究排钱草总生物碱对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)相关胶原和细胞因子的分泌影响。方法:体外培养HSC-T6细胞,将排钱草总生物碱(终浓度为500、250、125、62.5、31.25、15.625μg/m L)作用于细胞48h后,以MTT法检测细胞存活率,求出半数抑制浓度(IC50),根据IC50选取无细胞度浓度进一步研究;收集细胞上清液,用ELISA法分别检测Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(COL-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)、转化生长因子(TGF-β1)、血小板衍生因子(PDGF)的含量。结果:排钱草总生物碱能明显抑制HSC-T6细胞的增殖,其抑制作用与药物终浓度呈量效关系,求得IC50为337μg/m L;并显著降低HSC-T6细胞生成的COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TGF-β1,PDGF含量,与空白对照组比较,P<0.05或P<0.01。结论:排钱草总生物碱对HSC-T6细胞增殖有显著抑制作用,并能降低COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TGF-β1、PDGF的含量。