广金钱草全长转录组测序分析

目的:获得广金钱草Desmodium styracifolium(Osb.)Merr.全长转录组数据,深入挖掘其功能基因。方法:采用PacBio Sequel测序平台,对广金钱草的根、茎、叶3个部位混合样品进行全长转录组测序及分析。结果:共获得转录本140069条,N50长度为1542 nt,其中118906个(84.89%)转录本被成功注释。非冗余蛋白(NR)数据库注释中,与广金钱草最相近的物种是豆科植物密花豆Spatholobus suberectus Dunn;真核生物相邻类的聚簇(KOG)数据库注释中,比对到一般功能预测的转录本最多,有18064个;基因本体(GO)数据库注释中,86459个转录本分布于生物学过程、细胞组成和分子功能三大类45个功能组;京都基因与基因组百科全书(KEGG)注释中,参与广金钱草生物合成和其他次生代谢转录本3721个。在基因结构分析中,共得到74174个编码序列、3663个转录因子。简单序列重复(SSR)分析表明,40456个SSR中腺嘌呤和鸟嘌呤(AG)/胞嘧啶和胸腺嘧啶(CT)、AAG/CTT分别是二碱基、三碱基中优势重复类型。结论:获得了广金钱草全长转录本,为其后续的分子研究提供数据支持。

广金钱草中非黄酮类化学成分的研究

目的:对广金钱草中的化学成分进行研究。方法:采用硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱、ODS柱、制备HPLC等色谱方法对广金钱草的醇提物进行分离纯化,再通过理化性质及波谱数据分析鉴定化合物结构。结果:从广金钱草中分离得到20个非黄酮类化合物,分别鉴定为:(+)-去氢催吐萝芙木醇(1)、(-)-loliolide(2)、β-谷甾醇(3)、水杨酸(4)、(+)-isololiolide(5)、6,7-二甲氧基-4-羟基-1-萘甲酸(6)、2,5-二甲氧基对苯二甲酸(7)、对羟基苯乙酮(8)、3-吲哚甲醛(9)、香草酸(10)、异香草酸(11)、对羟基苯甲酸(12)、4,5-dihydroblumenol(13)、β-胡萝卜苷(14)、7-氧代-豆甾-5,25-二烯-3-O-β-D-葡萄糖苷(15)、广金钱草内酯(16)、12-羟基茉莉酮酸(17)、麦芽酚(18)、4,5-二甲基-3-羟基-2,5-二氢-2-呋喃酮(19)、广金钱草碱(20)。结论:其中,化合物1、2、5~9、13、15、17、19为首次从该植物中分离得到。

广金钱草的化学成分

目的研究广金钱草(Desmodium styracifolium (Osb.) Merr.)的化学成分.方法利用大孔吸附树脂色谱、硅胶色谱方法进行分离纯化;根据波谱解析、理化常数分析及文献对照进行结构鉴定.结果从广金钱草水提取物经过大孔吸附树脂的体积分数为60%的乙醇洗脱物中分离鉴定了6个化合物,分别为(3α,4β,5α)4,5-二氢3(1吡咯基)4,5二甲基2(3H)呋喃酮(Ⅰ)、水杨酸(Ⅱ)、香草酸(Ⅲ)、阿魏酸(Ⅳ)、3,4二甲氧基苯酚(Ⅴ)和乙二酸(Ⅵ).结论化合物Ⅰ～Ⅳ首次从广金钱草分离得到,其中化合物Ⅰ为新天然产物.

不同来源和部位的广金钱草中化学成分研究

目的:研究不同市场、不同产地、不同部位的广金钱草中3种化学成分含量,为广金钱草临床应用提供科学依据。方法:采用HPLC法,对不同药材市场、不同产地广金钱草地上部分、茎及叶中夏佛塔苷、异夏佛塔苷和异牡荆苷的含量进行测定。色谱柱为Agilent Zorbax SB-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%甲酸溶液(32∶68),流速为1.0 mL/min,检测波长为272 nm。结果:叶中夏佛塔苷、异夏佛塔苷和异牡荆苷的含量均高于地上部分和茎;亳州、安国、玉林、樟树、禹州5个市场地上部分及五通、中庸、宛田3个产地样品叶中夏佛塔苷含量多数均≥0.13%;异夏佛塔苷存在于地上部分、茎、叶中,异牡荆苷仅存在于叶中;玉林市场药效成分含量要优于其他市场,五通产地的药材质量要优于中庸、宛田产地。结论:广金钱草药材质量评价时,建议增加异夏佛塔苷这一指标;贮存药材时,建议减少贮存时间、保持药材完整性;叶是广金钱草3种化学成分的主要富集部位。

广金钱草多糖抗氧化活性研究

目的研究广金钱草多糖的抗氧化活性。方法采用分光光度法研究了广金钱草多糖提取物的体外抗氧化作用,建立1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH自由基)、超氧阴离子自由基、还原力等几种不同的体外抗氧化模型,以此来评价该多糖的抗氧化活性。结果广金钱草提取纯化后的多糖样品中纯多糖含量达63%,当DPPH自由基清除率为50%时样品的浓度(IC50)为0.115 mg·m L-1。伴随着多糖浓度的升高其清除自由基能力逐渐增强,广金钱草多糖还原力的大小与其浓度大小成正比。结论广金钱草多糖表现出较高的抗氧化性,其浓度与抗氧化活性呈现一定的量效关系。

广金钱草总黄酮胶囊对照品的研究(英文)

目的:为广金钱草总黄酮胶囊制备含量测定用化学对照品。方法:采用常规柱层析结合制备型HPLC分离目标化合物,通过HPLC法测定其纯度和稳定性及其在胶囊中的含量,根据光谱数据(UV、IR、ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、DEPT、1H-13CCOSY、1H-1HCOSY、1D-HOHAHA、1D-NOE、HMBC)鉴定其结构。结果:分离到的化合物被鉴定为异夏佛塔苷,其纯度在99以上,常温条件下放置3个月内稳定,其溶液在常温条件下8h内稳定。异夏佛塔苷在广金钱草总黄酮胶囊中含量为3.0以上。结论:该化合物可作为广金钱草总黄酮胶囊的含量测定用对照品,并且能从广金钱草中分离得到。

不同产地广金钱草药材质量研究

目的对不同产地广金钱草质量进行研究。方法采用薄层色谱法,以异牡荆苷及邻羟基苯甲酸为对照品,石油醚（60~90℃）-乙酸乙酯-甲酸（体积比3∶1∶0.2）及甲苯-乙酸乙酯-甲酸（体积比1∶8∶1）为展开剂,对不同产地的广金钱草及其混淆品进行对比研究;分别采用柱色谱-紫外分光光度法、高效液相色谱法、紫外-可见分光光度法测定不同产地广金钱草药材中总黄酮、异牡荆苷、总多糖的含量。结果广东阳春产和广东化州产广金钱草薄层色谱与其他产地所产的广金钱草差异较大,广金钱草与其混淆品的薄层色谱差异很大;各地广金钱草异牡荆苷的含量在0.1~0.8 mg.g-1范围内,总黄酮含量在1%~3%范围内,总多糖的含量在2%~6%范围内。结论该薄层色谱法可用于广金钱草的鉴别,大部分产地的广金钱草药材各成分含量有显著性差异。

柱色谱-紫外分光光度法测定广金钱草中总黄酮的含量

目的 建立广金钱草中总黄酮的含量测定方法。方法 选用测定波长 2 72 nm,以 6 - C-葡萄糖 - 8- C-木糖洋芹素 (vicenin- 2 )为对照品 ,采用柱色谱 -紫外分光光度法对不同来源的广金钱草进行了总黄酮的含量测定。结果 vicenin- 2在 10 .8～ 2 5 .2 μg/ m L 具有良好的线性关系 ,回归方程为 Y=0 .0 30 9X+0 .0 16 (r=0 .9999) ,平均回收率为 10 0 .82 % ,RSD为 1.30 %。结论 该方法操作简便 ,结果准确 ,重复性好 。

RP-HPLC法同时测定广金钱草中夏佛塔苷和异夏佛塔苷

目的用RP-HPLC分离广金钱草中的夏佛塔苷和异夏佛塔苷,并对其进行定量测定。方法色谱柱为依利特C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为乙腈-0.025 mol/L磷酸溶液（三乙胺调pH至3.02）（15∶85）;柱温30℃;体积流量0.9 mL/min;检测波长270 nm。结果广金钱草中夏佛塔苷的线性方程为Y=2×106X-153 980,进样量在0.158~0.898μg范围内线性关系良好（r=0.999 7）,回收率为100.0%,RSD为0.7%;异夏佛塔苷的线性方程为Y=3×106X-86 359,进样量在0.076~0.436μg范围内线性关系良好（r=0.999 6）,回收率为99.9%,RSD为0.6%。结论增加异夏佛塔苷的色谱检测有利广金钱草及其制剂的质量控制。

广金钱草营养体的化感作用

采用室内生物测定的方法,研究了广金钱草根、茎叶的水浸液对萝卜、白菜、广金钱草种子萌发和幼苗生长的化感效应。结果表明,广金钱草根、茎叶水浸液对萝卜、白菜种子的萌发率均呈抑制效应,且随浓度的增加抑制效应增强;对广金钱草种子发芽率呈现促进效应,但各浓度处理的差异不显著。而广金钱草根部和茎叶水浸液对萝卜、白菜胚根和茎的生长呈促进作用,且随处理浓度增加促进作用增强。对广金钱草根部呈现低浓度促进高浓度抑制的现象,而对其茎的生长呈现促进作用。广金钱草营养体具有一定的化感作用,但对其自身种子萌发和根、茎的生长无抑制作用。

广金钱草根腐病病原生物学特性研究

目的:研究温度、pH、培养基、碳源和光照对广金钱草茄病镰刀菌生长、产孢以及孢子萌发的影响。方法:设置不同处理,每处理接3个平板,每项实验重复3次。结果:茄病镰刀菌生长温度范围为12～37℃,最适为20～30℃。茄病镰刀菌在pH3.0～14.0范围内均能生长,最适pH为9.0～11.0。PDA、PSA、OMA和Czapek培养基对茄病镰刀菌生长影响不显著,但对孢子萌发率有较大影响,在Czapek培养液中孢子萌发率最高。不同碳源Czapek培养基上茄病镰刀菌生长和孢子萌发率明显不同,以蔗糖和麦芽糖为碳源的培养基菌落扩展最快,其次是葡萄糖和乳糖,果糖最差,同时以果糖、葡萄糖、麦芽糖和蔗糖为碳源的Czapek培养液孢子萌发最高,而乳糖较低。光照对茄病镰刀菌菌丝生长没有影响,但有利于产孢。

广金钱草化学成分的研究

自豆科山蚂蝗属植物广金钱草[Desmodium styracifolium (Osbeck)Merr.]中分离得到八个化合物,其中两个为新化合物,命名为广金钱草碱(desmodimine,Ⅰ)和广金钱草内酯(desmodilactone,Ⅱ),两个已知三萜类成分为羽扇豆酮(Ⅲ)和羽扇豆醇(Ⅳ);其他还有三十三烷(Ⅴ),硬脂酸(Ⅵ),β-谷甾醇(Ⅶ)和花生酸花生醇酯(Ⅷ)。并通过光谱分析推定两个新化合物的化学结构。其他六个化合物均为首次从该植物中分离得到。

广金钱草田间育苗影响因素研究

【目的】观察广金钱草在田间育苗过程中,播种季节和播种密度对其种子发芽率和生长状况的影响。【方法】对种子的品质进行检验后,在3-10月间进行播种试验,比较不同播种时间和密度对种子发芽率及生长状况的影响。【结果】以广东平远为种植基地,3-10月间种子的发芽率均比较稳定,苗长势良好;随着播种密度的增加,种子发芽率减少,在0.5-1 g/m^2范围内,发芽率达80%。【结论】广金钱草可在春、夏、秋3季播种,以秋季最佳,其适宜的播种密度为0.5-1g/m^2。

基肥对中药材广金钱草植株生长的影响及效益分析

为了探讨施基肥对广金钱草植株生长、产量及效益的影响。采用施用鸡粪和鸡粪加复合肥进行广金钱草种植试验。结果表明:施基肥的处理与对照相比,植株主茎平均多长6.2～21.3 cm、分枝多3.9～13.5条,药材产量每平方米增产最少为82.7 g,最多达422.4 g;以每平方米施鸡粪6 kg的处理效果最佳,植株主茎最长、分枝最多、产量最高,投入产出比最高(1∶5.28)。基肥能极大促进广金钱草植株生长和增加分枝,显著提高药材产量及效益。

广金钱草抑制一水草酸钙结晶生长有效成分的研究

本文对广金钱草多糖类进行了提取和精制,并通过电导法观察精制前后对一水草酸钙结晶生长的抑制作用,发现精制后比精制前的作用更强。

广金钱草绿色药材生产基地环境质量评价

[目的]使广西临桂县栽培的广金钱草达到绿色药材的标准。[方法]参照国家环保局《环境检测分析方法》布点采样,对广金钱草规范化种植基地的大气环境、土壤环境和水源质量进行检测。[结果]广西临桂县中庸乡宛田村广金钱草种植基地大气质量达到GB3095-1996一级标准,水源质量达GB5084-92标准,土壤环境达GB15618-1995二级标准。[结论]广西临桂县中庸乡宛田村广金钱草种植基地环境质量良好,各生态条件适合广金钱草生长,符合药用植物绿色出口生产基地行业标准(YB-T-1-2003)的要求。

不同地区广金钱草遗传多样性的ISSR分析

目的:对广东省、广西壮族自治区共15个产地的广金钱草遗传多样性以及亲缘性关系进行分析。方法:应用inter-simple sequence repeat(ISSR)技术,对广东省、广西壮族自治区的样品进行遗传多样性分析;使用Popgene 1.32软件对扩增结果进行分析,并使用UPGMA软件绘制聚类图。结果:7条ISSR引物扩增出的产物共有51条清晰的条带,其中多样性条带为41条;Shannon多样性指数(I)为0.3,Nei’s遗传多样性指数(H)为0.246 4,居群间的遗传分化系数(G_(ST))为0.123 8,基因流(N_m)为3.539 7。结论:广东、广西两地栽培以及野生广金钱草具有较高的遗传多样性,其遗传距离跟地理距离有一定的关联性。

广金钱草红外指纹图谱共有峰率和变异峰率双指标序列分析方法

目的尝试建立一种符合广金钱草自身特点的红外指纹图谱分析方法。方法利用共有峰率和变异峰率2个指标,以不同广金钱草样品的红外指纹图谱为参比,计算出所测样品相对于参比品的共有峰率和变异峰率,并按照共有峰率的大小建立不同的序列。结果该方法可初步区分不同产地的广金钱草。结论利用共有峰率和变异峰率双指标序列分析方法可以对2个或多个广金钱草样品进行方便的鉴别。

紫外分光光度法测定广金钱草中总黄酮的含量

目的:建立广金钱草中总黄酮的含量测定方法。方法:采用紫外分光光度法,以芹菜素为对照品,测定波长272nm。结果:芹菜素在2.144～10.72μg/mL浓度范围内与吸光度呈良好的线性关系,r=0.9997(n=5)回收率为97.3%,RSD为1.8%(n=5)。结论:此方法操作简单,精密度、稳定性和重复性良好,有助于广金钱草药材的质量控制。

广金钱草规范化栽培技术

目的规范广金钱草种植全过程。方法以国家食品药品监督管理局发布的《中药材生产质量管理规范》(GAP)为指导原则,控制影响广金钱草质量的各种因子。结果确定广金钱草的规范化种植规程。结论规范化种植可使广金钱草药材达到“真实、优质、稳定、可控”的目的。