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The recombinant expression systems for structure determination of eukaryotic membrane proteins 被引量:4
1
作者 Yuan He Kan Wang Nieng Yan 《Protein & Cell》 SCIE CAS CSCD 2014年第9期658-672,共15页
Eukaryotic membrane proteins, many of which are key players in various biological processes, constitute more than half of the drug targets and represent important candidates for structural studies. In contrast to thei... Eukaryotic membrane proteins, many of which are key players in various biological processes, constitute more than half of the drug targets and represent important candidates for structural studies. In contrast to their physiological significance, only very limited number of eukaryoUc membrane protein structures have been obtained due to the technical challenges in the genera- tion of recombinant proteins. In this review, we examine the major recombinant expression systems for eukaryotic membrane proteins and compare their relative advantages and disadvantages. We also attempted to summarize the recent technical strategies in the advancement of eukaryotic membrane protein purification and crystallization. 展开更多
关键词 eukaryotic membrane proteins recombinant expression structural biology integralmembrane proteins (IMPs) fluorescence detected sizeexclusion chromatography (FSEC) protein purification and crystallization
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去垢剂在膜蛋白纯化和结晶中应用的研究进展 被引量:6
2
作者 张辰艳 张仙芳 +2 位作者 郭云珠 郭卫红 尹大川 《材料导报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第5期73-78,共6页
解析膜蛋白结构并研究其功能是当前生物学领域最前沿的研究热点之一。但是由于膜蛋白疏水结构域的存在,蛋白在水相环境中容易聚合,造成其纯化乃至结晶过程有较大困难,是膜蛋白结构解析的最主要瓶颈之一。去垢剂作为一种双极性分子,是目... 解析膜蛋白结构并研究其功能是当前生物学领域最前沿的研究热点之一。但是由于膜蛋白疏水结构域的存在,蛋白在水相环境中容易聚合,造成其纯化乃至结晶过程有较大困难,是膜蛋白结构解析的最主要瓶颈之一。去垢剂作为一种双极性分子,是目前解决膜蛋白纯化与结晶问题的关键材料,它能在水相环境中维持膜蛋白构象的稳定,因此在膜蛋白纯化和结晶中得到了广泛的应用。讨论了去垢剂理化性质、膜蛋白纯化和结晶中去垢剂的选择及一些新兴去垢剂的发展等问题。 展开更多
关键词 膜蛋白 去垢剂 结构生物学 纯化和结晶
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去垢剂在膜蛋白研究中的应用 被引量:2
3
作者 谢浩 陈艳可 +1 位作者 孙恩杰 王宏炜 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期205-212,共8页
去垢剂是同时具有亲水极性基团和疏水非极性基团的双极性分子,能够使脂膜解体释放膜蛋白,并在溶液中为去膜状态下的膜蛋白提供疏水环境,维持和保护膜蛋白的疏水跨膜结构,在膜蛋白的结构和功能研究中有重要的意义。去垢剂的双极性和理化... 去垢剂是同时具有亲水极性基团和疏水非极性基团的双极性分子,能够使脂膜解体释放膜蛋白,并在溶液中为去膜状态下的膜蛋白提供疏水环境,维持和保护膜蛋白的疏水跨膜结构,在膜蛋白的结构和功能研究中有重要的意义。去垢剂的双极性和理化特性,如临界胶束浓度能够极大影响去垢剂和膜蛋白间的相互作用。在膜蛋白研究中,需要充分利用去垢剂的结构和特性:一方面,需要利用去垢剂代替脂质分子支持和稳定去膜状态下膜蛋白的结构和功能;另一方面,需要控制去垢剂和膜蛋白的相互作用,以满足膜蛋白结构研究如蛋白质结晶试验的要求。简要介绍了去垢剂在膜蛋白研究中的最新应用进展,涉及去垢剂在膜蛋白离体表达、分离和纯化、以及结构研究中的应用。 展开更多
关键词 去垢剂 膜蛋白 离体表达 纯化 蛋白质结构
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膜转运蛋白的功能性超表达和纯化 被引量:2
4
作者 谢浩 李其昌 郭小明 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1051-1058,共8页
膜转运蛋白结构和功能的研究是功能膜蛋白质组研究中的一个重要内容,而大量蛋白质的分离纯化是进行蛋白质的结构和功能研究的基础.目前,结构和功能膜蛋白质组学相关研究的瓶颈,在于不能有效地超量表达和纯化具有生物活性的膜转运蛋白.... 膜转运蛋白结构和功能的研究是功能膜蛋白质组研究中的一个重要内容,而大量蛋白质的分离纯化是进行蛋白质的结构和功能研究的基础.目前,结构和功能膜蛋白质组学相关研究的瓶颈,在于不能有效地超量表达和纯化具有生物活性的膜转运蛋白.影响膜转运蛋白超量表达和纯化的关键因素,包括目标蛋白的拓扑学结构分析和去垢剂的选择.进行膜转运蛋白拓扑学结构的分析,对于构建用于活体表达的重组膜转运蛋白具有指导意义.去垢剂能够稳定去膜状态的膜蛋白,在膜转运蛋白的离体表达和亲和纯化以及包涵体的处理过程中具有重要的作用.本文就目前功能膜蛋白质组学研究中所涉及的有关膜转运蛋白功能性超表达和分离纯化策略及关键技术作一简述. 展开更多
关键词 膜转运蛋白 功能性超表达 蛋白质纯化 去垢剂 拓扑学结构
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G蛋白偶联受体结构生物学进展 被引量:3
5
作者 葛保胜 《生命科学研究》 CAS CSCD 2009年第4期360-365,共6页
G蛋白偶联受体(GPCR)是具有7次跨膜螺旋的细胞整合膜蛋白,它们广泛地参与感光、气味、神经传递以及细胞增殖、分化、迁移等各类生理活动的调控,是现代药物研发的重要靶点.然而,GPCR结构生物学研究却受到高质量蛋白制备、稳定性以及结晶... G蛋白偶联受体(GPCR)是具有7次跨膜螺旋的细胞整合膜蛋白,它们广泛地参与感光、气味、神经传递以及细胞增殖、分化、迁移等各类生理活动的调控,是现代药物研发的重要靶点.然而,GPCR结构生物学研究却受到高质量蛋白制备、稳定性以及结晶方法等方面的限制.近年来,随着新型膜蛋白表达体系、新型去污剂、膜蛋白纯化及结晶技术的发展,使得G蛋白偶联受体结构解析工作取得了可喜的进展,也为进一步解析更多GPCR精细结构及相关药物研发奠定重要基础. 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体 结构生物学 去污剂 表达 纯化
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