DSS/DMH复合法诱导Wistar大鼠结肠炎癌转化模型的建立及评价

目的:基于葡聚糖硫酸钠(DSS)/二甲基肼(DMH)联用,建立Wistar大鼠结肠炎癌转化模型并进行模型评价。方法:取40只Wistar大鼠,按每只30 mL/d剂量给予4%DSS饮用3 d,建立溃疡性结肠炎(UC)炎症期模型;随机取UC炎症期模型大鼠34只,继续给予DSS至第7天(死亡8只),建立UC活动期模型;随机取UC活动期模型大鼠20只,按每周25 mg/kg剂量颈部注射DMH 17周(死亡4只),建立UC相关性结肠癌(UC-CAC)转化期模型;随机取UC-CAC转化期模型大鼠10只,继续给予DMH至第24周(死亡4只),建立CAC模型,另设正常组和PBS对照组,每组6只。对结肠炎癌转化各时期大鼠和瘤体特征观察,检测结肠长度、壁厚、湿质量指数,对DAI和CMDI评分进行评价,检测各时期模型CRP、ESR、HGB水平,Masson染色观察结肠病理变化,免疫组化检测结肠瘤体MLH1、PMS2、MSH2、MSH6蛋白表达。结果:UC炎症期大鼠表现稀血便,UC活动期大鼠腹泻与血便量多次频;UC-CAC转化期大鼠结肠成瘤率66.67%(4/6),CAC期大鼠结肠成瘤率100.00%(6/6);CAC期大鼠在第11~18周体质量进入代偿期,之后进入失代偿期;各组比较,CAC期结肠长度最低,湿质量指数和壁厚最高;DAI与CMDI评分分别在UC活动期和CAC期最高;在UC活动期CRP水平最高,ESR和HGB在CAC期分别达到最高和最低;UC炎症期可见结肠隐窝扭曲变形,UC活动期可见隐窝脓肿,组织溃烂,UC-CAC转化期表现为管状中高度分化腺瘤;CAC期表现为高分化锯齿状腺瘤;MLH1、PMS2、MSH2、MSH6蛋白检测均为阴性。结论:DSS/DMH复合法可成功建立UC炎症期、UC活动期、UC-CAC转化期和CAC期结肠炎癌转化模型,方法可靠,特异性强,与中医湿热瘀毒发为癌肿的中医病机较契合。

溃疡性结肠炎癌变小鼠模型的建立

为探讨一种建立理想的溃疡性结肠炎（UC）癌变动物模型的方法，为人类UC癌变的研究提供理想的途径，本研究将84只Balb／c小鼠分为4组，即实验组（A组）和对照组（B、C、D组）：A组小鼠自由饮用5％葡聚糖硫酸钠（DSS）1周后，腹腔注射二甲肼（DMH，20mg／kg）1次，此后饮用生理盐水（NS）2周；B组小鼠自由饮用5％DSS1周后，腹腔注射1mlNS1次，然后饮用NS2周；C组和D组均自由饮用NS3周，于第1周后分别给予DMH（20mg／kg）腹腔注射（c组）和1mlNS腹腔注射（D组）。以上各组均以3周为一个循环，共重复3个循环。结果显示，单纯应用DSS（B组）3个循环仅有2只发生低级别异型增生，单纯的腹腔注射低剂量的DMH（c组）3次无明显异型增生和癌变发生；而联合使用同等剂量的DSS和DMH（A组）1周后出现UC急性期临床和病理改变，3个循环后出现典型结肠癌及高级别异型增生的临床和病理改变，第3循环末癌变率高达90．0％。结果表明，联合应用DSS和DMH可以在短时问内成功建立理想的UC癌变的动物模型。